Criterios de clasificacin de las micobacterias cido-alcohol resistencia Presencia de cidos miclicos con cadenas de C22 y C26 Elevado contenido

do de G+C Otras especies relacionadas como Nocardia Son parcialmente cido-alcohol resistentes (se decoloran parcialmente) Las cadenas de cidos miclicos son ms cortas El contenido de G+C es menor La pared celular de las micobacterias es especial y les dota de muchas de sus caractersticas especficas.

 Est formada por: Una pared G+ Polisacrido (arabinogalactano) unido al PG y formando steres con cidos miclicos de alto peso molecular Cubierta de polipptidos Cubierta hidrofbica con cidos miclicos muy antignicos, formada popr lpidos libres, glucolpidos y peptidoglucolpidos Los lpidos suponen el 60% del peso de la pared celular Las cadenas peptdicas suponen el 15% del peso de la pared celular
Estructura. Mycobacterium tuberculosis es un bacilo aerobio obligado, sin movilidad, de crecimiento muy lento. No produce cpsula de polisacridos. Su envoltura celular es poco usual. Partiendo del interior hacia el exterior, presenta una membrana citoplsmica cubierta por una capa extensa de peptidoglicanos unidos a polisacridos, los cuales se encuentran esterificados con los cidos miclicos (60% del peso de la pared celular), formados por lpidos libres, glucolpidos y peptidoglucolpidos; tal estructura, que le brinda una apariencia cerosa, le confiere una alta hidrofobicidad, resistencia a detergentes, a un buen nmero de antibiticos, a las tinciones habituales y le da afinidad por la tincin cido alcohol resistente de Ziehl Neelsen y Kinyoun. Por otra parte, las cadenas de pptidos son antgenos responsables, de manera importante, de la estimulacin de la respuesta inmune celular del hospedero (de hecho, se utilizan para preparar derivados proticos purificados - PPD - til como prueba de reactividad cutnea para evaluar la exposicin a M. tuberculosis).

Los cidos miclicos forman complejos con apariencia acordonada cuando se unen a carbohidratos. Los sulfolpidos presentes inhiben la fusin fago-lisosomal y a menudo se consideran indicadores de cepas virulentas. (Lippincott's Illustrated Reviews: Microbiology, 2007). La envoltura celular tambin incluye adhesinas y no contiene toxinas conocidas. Mycobacterium Leprae se presenta como un bacilo recto o ligeramente incurvado. Es no esporulado, inmvil y no capsulado. Aunque es grampositivo es difcil, al igual que M. tuberculosis, ponerlo de manifiesto por este mtodo. Cuando se tie con mtodo de Ziehl-Neelsen, se visualiza como un bacilo rojo sobre fondo azul, cido-alcohol-resistente, pudindolo hacer de forma uniforme o presentar grnulos con mayor tamao que el dimetro promedio de la clula. Los bacilos que toman la coloracin cido-alcohol-resistente de manera uniforme son clulas viables y sanas mientras que es probable que los que presentan granulaciones en rosario no sean viables. La cido-alcohol-resistencia de M. leprae puede ser eliminada por

medio de la extraccin prelimiar con piridina, una propiedad til para diferenciar a este microorganismo de la mayor parte de las otras micobacterias. Puede emplearse tambin para visualizarlo la fluorescencia con auramina o naranja de acridina. Sin embargo a diferencia de otras micobacterias no se colorea en negro Sudn III y posee actividad fenolsica M. leprae presenta una triple cubierta rica en polisacridos externos y en peptidoglicano basal que forma la pared que rodea al citoplasma. Peptidoglicano arabinogalactanos y micolatos contribuyen significativamente a la integridad estructural de la pared. En cambio otros, glicolpidos, glicopeptidolpidos y trehalosa que contienen lipooligosacridos se han encontrado que son componentes activos de las micobacterias. La ms notable de las molculas de glicolpidos asociados a la pared celular de M. leprae es el glicolpido fenlico I (PGL-I), con un trisacarido especial que ha demostrado ser especie especfico e inmunognico durante la infeccin de M. leprae. La presencia de glicina en vez de alanina en la pared le dota de fragilidad y crecimiento aberrante. El citoplasma posee una estructura central con cidos nucleicos y ribosomas. M. leprae se desarrolla lentamente y tiene un tiempo de generacin de 1 da. Se comporta como un parsito intracelular obligado. Hasta el presente no se ha conseguido su cultivo en medios de laboratorios. M. leprae posee varios antgenos de superficie y citoplasmticos, algunos de los cuales son comunes a otras micobacterias y nocardias.

Caractersticas de Mycobacterium tuberculosis tuberculosis El M. Tuberculosis es un bacilo en forma de bastoncillo de extremo redondeado. Es resistente al cido y al alcohol Tiene una longitud de 1 a 4 micras, y de 0.3 a 0.6 micra de dimetro. Se comprueba con la tcnica de tincin de ZIEHLNEELSEN o algunas de sus variantes debido a los componentes lipdico de su pared celular. Caractersticas de Mycobacterium tuberculosis Esta micobacteria es Gram positiva, aerobia. Su gran virulencia se debe a que puede vivir largo tiempo fuera del organismo ( 6 a 8 meses). Pero la exposicin a la luz la destruye. Casi siempre es positiva la prueba de niacina y esto nos sirve para diferenciarla de otras micobacterias. En condiciones ptimas de laboratorio las cepas de M. tuberculosis tardan en replicarse una sola vez aproximadamente en 18 horas. Las colonias se

hacen visibles en un medio de LOWENSTEIN JENSEN; pueden aparecer despus de 6 semanas.

Las mycobacterias en general pueden variar mucho en su morfologa, desde formas cocoides pequeas a largos filamentos, M. tuberculosis suele tener una morfologa caracterstica, bacilo delgado de forma recta o ligeramente curvada en frotis teidos, y su tamao suele ser de 1-4 micras de largo por 0,3-0,5 micras de ancho. Ocasionalmente, forma ramificaciones verdaderas que se observan en cultivos enriquecidos y en frotis de ganglios linfticos gaseosos.

Son bacilos no formadores de esporas, sin flagelos ni cpsula. La estructura celular de M. tuberculosis consta de una gruesa pared, separada de la membrana celular por el espacio periplsmico, con cuatro capas. La ms interna es el glicopptido o peptidoglicano con molculas de N-acetilglucosamina y cido-Nglucolilmurmico (en lugar del habitual N-acetilmurmico) con cortas cadenas de alanina. Esta capa es el esqueleto de la bacteria que le da forma y rigidez. Externamente, hay otras 3 capas compuestas, una por polmeros de arabinosa y galactosa, otra formada por cidos miclicos (que son cidos grasos derivados) y otra superficial formada por lpidos como los sulfolpidos, el cord factor, llamado as por su aparente asociacin con la forma acordonada con que se agrupan las mycobacterias virulentas, y los micsidos que son al igual que el anterior glicolpidos. No difiere del resto de las bacterias en cuanto al citoplasma y el ADN nuclear. Las mycobacterias son aerobios estrictos y no crecen en ausencia de oxgeno. La M. tuberculosis se desarrolla de forma adecuada en medios simples que contienen una fuente de carbono, una de nitrgeno e iones de metales

esenciales entre ellos hierro y magnesio. Para su cultivo, se requiere un medio ms complejo que contenga una base de patata-huevo o una base de agar-suero. Los bacilos tuberculosos tienen un crecimiento muy lento incluso en condiciones ptimas y requiere de 10 a 20 das de incubacin a 37C. Aunque la proliferacin puede tener lugar a un pH que oscila entre 6 a 7.6, el pH ptimo de crecimiento es de 7.

Las mycobacterias son muy resistentes a la desecacin. El medio ambiente en el que se encuentran constituye un factor muy importante para su viabilidad. Por ejemplo, cuando se exponen a la luz solar directa, los bacilos tuberculosos de los cultivos son destruidos en 2 horas, pero si estos estn presentes en el esputo, pueden permanecer viables durante periodos ms largos. Las mycobacterias son ms resistentes a la desinfeccin con productos qumicos que otros microorganismos no formadores de esporas, probablemente como consecuencia de su contenido en lpidos. Son sensibles al calor hmedo y son destruidos por las temperaturas de pasteurizacin.