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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARAN CENTRO DE ENGENHARIAS E CINCIAS EXATAS CURSO DE ENGENHARIA QUMICA Engenharia Bioqumica

PRODUO DE CIDO CTRICO

Toledo

II 2009 Acadmicos: Caroline Coldebella Fernando Igncio Baena Alves Guilherme Takeshi de Oliveira Rodrigo Zunta Raia

PRODUO DE CIDO CTRICO

Relatrio apresentado como requisito parcial de avaliao da disciplina de Engenharia Bioqumica, do curso de Engenharia Qumica, da UNIOESTE Campus Toledo.

Professor: Sergio Lucena

Toledo 2009

III

Sumrio

Lista de Figuras........................................................................................... Introduo..................................................................................................... cido Ctrico................................................................................................. 1. Histrico..................................................................................................... 2. Caractersticas do cido ctrico.................................................................. 3. Obteno dos micro-organismos de interesse.......................................... 3.1 Aspergillus niger...................................................................................... 3.2 Seleo de Aspergillus niger para a produo do cido ctrico............... 3.3 Meios de cultura....................................................................................... 4. Processos de Obteno do cido ctrico................................................... 4.1 Processo Koji de fermentao................................................................. 4.2 Processo de fermentao em superfcie................................................. 4.3 Processo de fermentao por cultura submersa..................................... 5. Separao do produto desejado................................................................ 6. Bioqumica da fermentao do cido ctrico.............................................. 7. Aplicaes do cido Ctrico....................................................................... Referncias Bibliogrficas..........................................................................

IV VII 1 1 1 3 3 4 7 7 8 10 12 16 16 19 22

IV

Lista de Figuras

Figura 1 Frmula estrutural do cido ctrico.............................................. Figura 2 Aspergillus niger......................................................................... Figura 3 Cultura de Aspergillus niger mutante........................................ Figura 4 Fluxograma da produo industrial de cido ctrico.................... Figura 5 Ciclo do cido ctrico.................................................................... Figura 6 - Aplicao de cido Ctrico na indstria alimentcia

2 3 4 15 18

(Refrigerantes)................................................................................................ 19 Figura 7 - Aplicao farmacutica do cido Ctrico (Produtos Efervescentes)................................................................................................ 20 Figura 8 - Aplicao cosmtica de cido Ctrico (Desodorantes e Loes).. 20 Figura 9 - Aplicao veterinria de cido Ctrico (Vermfugos)..................... 21

Introduo

O cido ctrico, que at 1923 era obtido a partir de citrato de clcio (cujo comrcio era monopolizado por um cartel controlado pelo governo italiano, que mantinha seu preo em nveis muito altos), passou a ser obtido por um novo processo de fermentao, que quebrou o poder desse cartel e tornou os preos consideravelmente menores que aqueles praticados antes de 1923. Hoje, quase todo o cido ctrico comercializado no mundo produzido por fermentao (embora uma pequena parte ainda seja atrada de frutas ctricas, no Mxico e na Amrica do Sul). Trs processos so usados para a fabricao de cido ctrico:

Processo Koji: no qual o substrato slido, sendo utilizada uma linhagem especfica de Aspergillus niger.

Processo de fermentao em superfcie: o miclio do fungo (A. niger) cresce sobre a superfcie do meio de cultura esttico, sendo o produto da fermentao recolhido do meio.

Processo de fermentao por cultura submersa: o fungo se desenvolve inteiramente submerso no meio de cultura lquido sob agitao (que serve para assegurar a homogeneidade tanto da distribuio dos microorganismos quanto dos nutrientes.

VI

VII

cido Ctrico

1. Histrico

A descoberta do cido ctrico atribuda ao alquimista islmico Jabir Lbn Hayyan no oitavo sculo depois de Cristo. Os eruditos medievais na Europa conheciam a natureza cida dos sumos de limo e da lima; tal conhecimento est registrado na dcima terceira enciclopdia Speculum Majus, recompilada por Vincent de Beauvais. O cido ctrico foi o primeiro cido isolado em 1784 pelo qumico sueco Carl Wilhelm Scheele, que o cristalizou a partir do suco do limo. A produo de cido ctrico a nvel industrial comeou em 1860, baseado na indstria italiana dos ctricos. Em 1893, C. Wehmer descobriu que cultivos de penicillium podiam produzir cido ctrico a partir do acar. Entretanto, a produo microbiana do cido ctrico no chegou a ser industrialmente importante at a Primeira Guerra Mundial, que interrompeu as exportaes italianas de limes. Em 1917, o qumico americano James Currie descobriu que certos cultivos de Aspergillus niger podiam ser produtores eficientes de cido ctrico, e a indstria Pfizer comeou a produo em escala industrial usando esta tcnica anos mais tarde.

2. Caractersticas do cido ctrico

O cido ctrico um cido orgnico tricarboxlico presente na maioria das frutas, sobretudo em ctricos como o limo e a laranja. Sua frmula qumica C6H8O7 e sua frmula estrutural est representado na Figura 1.

VIII

Figura 1 Frmula estrutural do cido ctrico (Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_c%C3%ADtrico)

A acidez do cido ctrico devida aos trs grupos carboxilas -COOH que podem perder um prton em solues. Como conseqncia forma-se um on citrato. Os citratos so bons controladores de pH de solues cidas. Os ons citratos formam sais denominados citratos com muitos ons metlicos. O citrato de clcio ou "sal amargo" um importante citrato, que se utiliza geralmente na preservao e condimentao dos alimentos. Alm disso, os citratos podem quelar ons metlicos, e utilizar como conservantes e suavizadores de gua. Na temperatura ambiente, o cido ctrico um p cristalino branco. Pode existir na forma anidra (sem gua), ou como monohidrato que contm uma molcula de gua para cada molcula de cido ctrico. A forma anidra se cristaliza em gua quente, enquanto a forma monohidratada do cido ctrico se cristaliza em gua fria. O monohidrato pode ser convertido na forma anidra aquecendo-se acima de 74C. Quimicamente, o cido ctrico compartilha as caractersticas de outros cidos carboxlicos. Quando aquecido acima de 175C, se decompem produzindo dixido de carbono e gua.

IX 3. Obteno dos micro-organismos de interesse

3.1 Aspergillus niger Aspergillus um gnero de fungos que apresenta colorao branca amarelada com formao de pednculos e uma ponta colorida. So importantes agentes decompositores de alimentos. So utilizados na produo de alimentos e produo comercial de cido ctrico, glucnico e glico. A Figura 2 representa o fungo Aspergillus niger.

Figura 2 - Aspergillus niger (Fonte:http://129.215.156.68/Images/Asexual%20structures%20of%20Aspergillus%20niger.jpg)

Sua classificao cientfica a seguinte:


Reino: Fungi Filo: Ascomycota Subfilo: Pezizomycotina Classe: Eurotiomicetos Ordem: Eurotiales Famlia: Trichocomaceae Gnero: Aspergillus

X 3.2 Seleo de Aspergillus niger para a produo do cido ctrico Atravs do mtodo de Foster e Davis, compara-se a variabilidade natural de linhagens produtoras (1949). Esse mtodo baseado na utilizao de um meio indicador de pH para o crescimento de uma colnia de fungos onde, a produo de cido avaliada pela relao entre o dimetro do halo que se forma em torno da colnia e o dimetro desta. Aps essa avaliao, a melhor linhagem ser escolhida e submetida radiao ultravioleta, com a finalidade de conseguir linhagens mutantes com maior produo de cido. Aps essa seleo, se for obtida uma linhagem melhor, esta ser submetida novamente irradiao, com o objetivo de obter linhagens altamente produtoras de cido. Seu esquema est representado na Figura 3.

Figura 3 - Cultura de Aspergillus niger mutante (Fonte: http://www.mycology.adelaide.edu.au/gallery/photos/aspergillus12.gif)

A seguir, ser listado um exemplo de como realizar esta seleo: Material necessrio:

Vrias linhagens de Aspergillus niger

Soluo salina, tubos com 90mL

Soluo de tween 80, tubos com 2mL

Luz ultravioleta

XI Placas de Petri Meio de Foster Meio completo para fungos O meio Foster composto por 50 g de glucose, 5 g de peptona, 1 g de KH2PO4, 0,5 g de MgSO4.7H2O, 1000 ml de gua destilada e 18 g de gar.

Mtodo Parte A:

1. Dissolver o meio de Foster e distribuir em placas de Petri esterilizadas. Esperar solidificar.


2. Semear as vrias linhagens de Aspergillus niger fornecidas da seguinte

maneira: com uma agulha, coletar condios e seme-los por picada no centro da placa. Semear uma linhagem por placa. Incubar a 30C. 3. Avaliar a capacidade de produo de cido de cada linhagem no segundo e no quarto dia. 4. Medir o dimetro do halo produzido e o dimetro da colnia. Calcular o ndice cido. ndice cido = dimetro do halo dimetro da colnia

5. Escolher a colnia de maior ndice cido para executar a parte B.

Parte B:

XII
1. Com o auxlio de uma ala ou uma agulha fazer uma suspenso de

condios em 2mL de tween 80. Agitar.


2. Fazer a contagem dos condios dessa suspenso em hematocitometr.

Dependendo da contagem, deixar mais densa ou no essa suspenso, de tal maneira que 1mL dela, diludo em 9mL de soluo salina, tenha 10-6 condios por mL, aproximadamente.
3. Colocar essa ltima suspenso em placa de Petri vazia e esterilizada.

Tirar uma alquota, fazer diluies de 10-3 e 10-4, em soluo salina, e semear 0,1mL por placa contendo meio completo (controle). Incubar a 30C por 72 horas. 4. Proceder irradiao com luz ultravioleta por trinta segundos.
5. Fazer diluies dessa suspenso mutagenizada em soluo salina a

10-3 e 10-4. Semear vrias placas contendo meio completo, cada uma com 0,1mL dessa diluio. Incubar a 30C por 72 horas.
6. Em seguida, as colnias desenvolvidas so escolhidas ao acaso e

semeadas, cada uma no centro de uma placa de Petri contendo meio de Foster. Inocular um grande nmero de colnias. Incubar a 30C por quatro dias. Fazer o mesmo com as placas-controle. 7. Medir o dimetro do halo formado e o dimetro da colnia. Calcular o ndice cido. 8. Calcular o ndice cido das colnias das placas-controle.
9. Escolher a colnia ou as colnias que apresentarem melhor ndice cido

e submet-las a uma segunda irradiao e, portanto, a uma segunda seleo. 3.3 Meios de cultura

XIII Os meios de cultura devem ser ligeiramente cidos, para possibilitarem um bom desenvolvimento dos fungos. Os fungos so diferenciados, atravs de meios especiais, pela morfologia, por exames microscpicos ou por outras tcnicas bacteriolgicas gerais e especiais.

4. Processos de Obteno do cido ctrico

O cido ctrico um dos cidos orgnicos mais empregados, com uma produo atingindo a cerca de 63,5 milhes de quilogramas. cidos orgnicos como, por exemplo, o cido fumrico, cido malico e cido adpico podem ser usados para substituir o cido ctrico. Ele fabricado pela fermentao aerbica do acar bruto ou do acar de milho por uma casta especial de Aspergillus niger, de acordo com a pesquisa clssica de Currie, exceto para produo de pequenas quantidades (menos de 7%) onde a produo ocorre por meio de refugos de frutas ctricas, As reaes globais so: C12H22O11+H2O+3O22C6H8O7+4H2O C6H12O6+1.12O2C6H8O7+2H2O A fermentao transforma o acar e a dextrose, compostos com cadeias lineares, em compostos com cadeias ramificadas. Um processo mais antigo, de fermentao em tanques rasos, foi abandonado em virtude do dispendioso processamento manual e do desenvolvimento do processo de fermentao submersa. Em linhas gerais, o processamento pode ser esquematizado da seguinte maneira: solues contendo acares em dissoluo so inoculadas com o micro-organismo adequado para sintetizar cido ctrico. As solues

XIV aucaradas correspondem a mosto de sacarose que esterilizado e resfriado. Aps o resfriamento, inoculado com cultura pura de Aspergillus niger.

4.1 Processo Koji de fermentao A bioconverso dos resduos agrcolas e da indstria de alimentos est recebendo crescente ateno, uma vez que essas matrias residuais apresentam recursos possveis e utilizveis para a sntese de produtos teis. Nesse contexto, a fermentao em estado slido (FSS) desempenha um papel de destaque no aproveitamento de resduos slidos, pois, em virtude do crescimento microbiano, ocorre a sntese de diversos compostos, dos quais muitos apresentam grande interesse para segmentos industriais, alm de elevado valor agregado. O termo fermentao em estado slido, ou fermentao semi-slida, ou fermentao em meio semi-slido aplica-se ao processo de crescimento de micro-organismos sobre substratos slidos sem a presena de gua livre. A gua presente nesses sistemas encontra-se ligada fase slida, formando uma fina camada na superfcie das partculas. A FSS, tambm, apresenta as seguintes caractersticas: A fase slida atua como fonte de carbono, nitrognio e demais componentes, alm de servir como suporte para o crescimento das clulas microbianas. O ar, necessrio ao desenvolvimento microbiano, deve atravessar os espaos vazios do meio a presses relativamente baixas. O substrato no deve apresentar aglomerao das suas partculas individuais. O crescimento microbiano ocorre em condies mais prximas s dos habitats naturais.

XV O meio apresenta alta heterogeneidade e os substratos no esto completamente acessveis ao micro-organismo. Os substratos para a FSS so, em geral, resduos ou subprodutos da agroindstria. Farelos, cascas, bagaos e outros so materiais considerados viveis para a biotransformao. So recursos naturais renovveis e produzidos em grandes quantidades, o que, algumas vezes, faz com que se tornem um problema ambiental. A estrutura desses materiais tem como seus principais componentes celulose, hemicelulose, lignina, amido, pectina e protenas, o que os caracteriza como materiais extremamente heterogneos, e que servem tanto como fonte de carbono e energia quanto de suporte para o crescimento microbiano. No Brasil h uma grande gerao de resduos ou subprodutos agroindustriais, devido seu grande potencial para a produo agrcola. Nesse sentido, a fermentao em estado slido se apresenta como uma tecnologia capaz de propor caminhos alternativos para os resduos gerados, diminuindo possveis problemas ambientais, bem como, de agregar valor a essas matrias-primas, por meio da produo de substncias de interesse econmico, como enzimas, hormnios, cidos orgnicos, aromas, pigmentos e agentes de controle biolgico de pragas, entre outros, e com isso contribuir para uma maior diversificao do agronegcio nacional. Em escala comercial, uma das principais aplicaes da FSS a produo de cido ctrico a partir de farelo de trigo. Esse processo tambm conhecido por Koji. Antes da esterilizao, o pH do farelo ajustado para ficar entre 4 e 5. Cuidados devem ser tomados para que a concentrao final de gua no farelo, depois da esterilizao, seja de 70 a 80 %. Quando o farelo estiver numa temperatura em torno de 30 a 36C, ele inoculado em Koji (preparado prvio

XVI contendo amilases e proteases), que feito com uma cepa apropriada de A. niger, no to susceptvel presena de ons ferro como as usadas em outros processos. A temperatura durante a fermentao no deve exceder os 28C. A adio de 3 a 7 % de massa filtrada (filter cake) de fermentao de cido glutmico aumenta a produo. O amido originalmente presente no farelo sacarificado pela amilase do A. niger. A adio de -amilase ao farelo, depois de resfriado, tambm proveitosa. O farelo inoculado distribudo em bandejas com profundidade de 3 a 5 cm, ou disposto em camadas pouco espessas numa superfcie plana. Depois de 5 a 8 dias, o Koji recolhido, colocado em percoladores e o cido ctrico extrado como gua. Os mtodos de separao e purificao so essencialmente os mesmos utilizados nos outros dois processos.

4.2 Processo de fermentao em superfcie Foi o primeiro a fornecer cido ctrico a baixo preo ainda utilizado por muitos fabricantes, mas considerado segredo industrial. Uma nica descrio detalhada desse processo foi publicada por MALLEA, em 1950. O mosto inoculado distribudo em bandejas rasas, feitas de alumnio com alto teor de pureza ou de ao inoxidvel. Ar mido soprado sobre a superfcie do mosto por 5 ou 6 dias, passando-se, depois a utilizar ar seco. Os esporos germinam dentro de 24 horas e o miclio cobre a superfcie do mosto. Oito ou dez dias depois da inoculao, a concentrao de acar reduzida de 20 a 25 % (inicial) para 1 a 3 % (final). Quando a fermentao terminar, o mosto pode ser drenado e substitudo por outro novo. Nesse caso devem ser tomados os cuidados necessrios para garantir que o miclio continuar

XVII flutuando sobre a superfcie (se ele for submerso, torna-se inativo). Isso faz com que o tempo do ciclo de fermentao seja reduzido (j que o perodo inicial de crescimento de 3 dias, no qual a produo de cido ctrico pequena, estar sendo eliminado). Contudo, duvidoso que essa prtica seja empregada em produo de larga escala. As fontes de carbono de escolha so a sacarose, e os melaos de cana e de beterraba (que so economicamente vantajosos, embora a produo de cido seja ligeiramente menor). Melaos so subprodutos da indstria aucareira, que contm 50 a 60 % de sacarose, que no pode ser removida por simples cristalizao. Como a concentrao de ons metlicos interfere no rendimento da fermentao, eles devem ser removidos ou ter sua concentrao reduzida quando esses ons estiverem presentes em

quantidades indesejveis no mosto (por adsoro com uma combinao de CaCO3, slica gel, fosfato de clcio e amido). O pH do meio de cultura para a produo de cido ctrico usualmente de 5 a 6 (faixa inicial), caindo na fase de germinao do esporo rapidamente para a faixa de 1,5 a 2,0, devido remoo de ons amnio do meio. Se aumentar ou for ajustado para 3,5 (aproximadamente) depois da mudana inicial, ocorre a formao de cido oxlico no miclio que, s vezes, excretado para o meio e dificulta a purificao do cido ctrico. A produo nesse processo de aproximadamente 80 a 85 % da massa de carboidratos inicialmente fornecida.

4.3 Processo de fermentao por cultura submersa AMELUNG, em 1930, usando Aspergillus niger japonicus

(provavelmente A. japonicus Saito) borbulhou brandamente uma corrente de ar

XVIII em um meio de cultura de 15 cm de profundidade, obtendo dessa forma crescimento do miclio submerso e detectando a presena de cido ctrico no meio, mas em quantidades inferiores produo observada na fermentao de superfcie. KLUYVER e PERQUIN, em 1933, descreveram os experimentos que fizeram com um meio sendo agitado e PERQUIN, em 1938, aplicou tambm para a fermentao submersa a idia de Molliard de deficincia de fosfato (nenhum dos dois reconheceu, no entanto, a influncia da presena de traos de ons metlicos no rendimento da fermentao). Seguindo os conceitos de Molliard-Perquin, SCIZS, em 1944, obteve uma patente para a fermentao de cultura submersa por crescimento de A. niger num meio rico em fosfato, com posterior transferncia para outro meio sem fosfato, ou pelo mtodo de crescimento do miclio em um meio no qual inicialmente no havia sido fornecida a quantidade adequada de fosfato. Ele supunha que o crescimento do miclio poderia remover todo o fosfato do meio, deixando-o livre dessa substncia. MOYER, em 1953, descobriu que a adio de metanol nos meios de cultura resultava no aumento da produo de cido ctrico. Todavia, nem mesmo a aplicao do conceito de Molliard-Perquin levou a um processo comercialmente vivel. Estudos conduzidos pelos laboratrios Miles no conseguiram demonstrar qualquer relao entre a quantidade de fosfato assimilvel no meio de cultura e o rendimento do processo. SHU e JOHNSON em 1947 e 1948, demonstraram que quando ons de mangans ou de ferro estavam presentes em concentraes suficientes, pouco ou nenhum cido ctrico era produzido no meio. Contudo, o A. niger crescia muito melhor quando esses ons eram fornecidos em quantidades menores.

XIX A remoo dos ons metlicos indesejveis do meio por troca inica foi demonstrada por WOODWARD e colaboradores em 1949, e o uso do on cobre como um antagonista do ferro foi descoberto por SCHWVEIGER em 1957, tornando possvel o uso comercial do processo. As vantagens do processo de fermentao submersa sobre o de superfcie em termos de custos de investimento e operao induziram pesquisadores a procurar desenvolv-lo para a obteno de cido ctrico. O meio de cultura no processo de fermentao submerso esterilizado por meio rpido, ou ultrarrpido, por passagem de vapor com fluxo turbulento atravs de tubos de trocadores de calor com camisas de vapor, e imediatamente resfriado at aproximadamente 30C em outro trocador de calor. O inculo habitualmente usado so esporos de uma cepa adequada de A. niger crescida em meio nutriente slido. A composio do meio de cultura (alm da fonte de carboidratos) a seguinte: A concentrao desses ons

adicionados ao meio para neutralizar os ons cobre ons ferro varia de 0,1 a 50,0 mg/l, dependendo da quantidade de ferro presente no meio. De 0,01 % a 0,03 % (mas pode chegar KH2SO4 MgSO4.7H2O (sulfato de magnsio heptahidratado) a 2 %) 0,25 %

Caso o meio contenha uma quantidade de ferro muito baixa, deve-se suprir essa deficincia, at que se atinja uma faixa de 0,1 a 0,2 mg/l. O pH deve

XX ser ajustado antes da inoculao com on amnio para aproximadamente 4,0. Durante a fermentao, o pH muda rapidamente para a faixa de 1,5 a 2,0. Pouco cido ctrico formado antes do pH atingir esse nvel. A aerao da cultura submersa deve ser contnua na taxa de 0,5 a 1,15 v/v de soluo por minuto e no pode ser interrompida, pois mesmo um breve lapso no suprimento de ar pode cessar o processo por vrios dias e a agitao mecnica no necessria. Agentes anti-espumantes (livres de ferro, cobalto ou nquel), devem ser adicionados para evitar perdas devidas ao excesso de espuma. Os fermentadores de ao comum tm de ser adequadamente revestidos, para evitar a contaminao com ons metlicos. Podem ser usadas tambm como fontes de carboidratos, para a produo de cido ctrico, solues concentradas de xarope de cana-de-acar (com 30 a 35 % de acar invertido, uma mistura de glicose e frutose, ambos os acares na mesma proporo), de glicose ou de sacarose, (tratadas com ferrocianeto para a remoo ou complexao do ferro presente no substrato). O processo de fermentao empregado descontnuo, uma vez que tcnicas de fermentao contnua no so adequadas para a produo de cido ctrico por serem muito dispendiosas e, provavelmente, economicamente inviveis. Na Figura 4, est representado o processo de cultivo submerso para a obteno do cido ctrico: o processo pode ser subdividido em uma seqncia coordenada de converses bioqumicas, com a ao do Aspergillus niger, e de diversas operaes unitrias e converses qumicas.

XXI

Figura 4 - Fluxograma da produo industrial de cido ctrico.

5. Separao do produto desejado

O meio filtrado dever ser submetido outra filtrao caso esteja turvo, devido presena de resduos de anti-espumante, de miclio ou de oxalato. O citrato precipitado da soluo por adio de suspenso de hidrxido de clcio (que dever ter um baixo teor de magnsio para no haver formao de citrato de magnsio, que solvel em gua). Em seguida, o citrato de clcio filtrado e a massa transferida para um tanque, onde ela vai ser tratada com cido sulfrico para precipitar o sulfato de clcio. O sobrenadante contendo o cido ctrico purificado por tratamento com carvo ativado e desmineralizado por sucessivas passagens atravs de colunas com resina de troca inica e a soluo purificada ento cristalizada por evaporao, sendo os cristais removidos por centrifugao. Pode ser necessria uma recristalizao para atender os padres USP (United States Pharmacopoeia). H um processo de

XXII separao (patenteado pelas Usinas de Melle) em que o cido ctrico extrado por filtrao do caldo fermentado, com uso de solventes orgnicos, sendo depois descolorido e cristalizado.

6. Bioqumica da fermentao do cido ctrico

O cido ctrico elaborado e excretado em meios de cultura cujo pH esteja prximo de 1,8 a 2,0. A degradao da glicose (gliclise, seqncia de reaes bioqumicas catalisadas por enzimas especficas) produz energia e metablitos. O produto final da gliclise o cido pirvico que, na presena de oxignio, metabolizado em acetil-CoA. Existem duas vias principais para obteno da gliclise; A do monofosfato de hexose (HMP) e a de EmbdenMeyerhof-Parnas (EMP). Na fermentao com A. niger, ambas as vias so usadas durante todo o tempo. A de maior atividade durante a fase de crescimento, quando pouco cido ctrico produzido, a HMP. J a via EMP, cuja maior atividade ocorre durante a fase vegetativa, desempenha o principal papel na gliclise da fermentao ctrica, pois atravs dela que a maior parte do citrato formada. Em condies aerbias, o piruvato gerado da glicose sofre

descarboxilao oxidativa formando acetil-CoA. O acetil-CoA derivada da via EMP condensa-se com o oxalacetato para formar citrato. Acredita-se que a entrada desse composto no ciclo de Krebs seja abortada, no pela inativao das enzimas que catalisam essa passagem, mas devido excessiva acidez do meio (pH prximo de 2). O ciclo do cido citrico a via final comum para a oxidao de molculas alimentares. A maioria da molculas entram no ciclo como Acetil

XXIII CoA. O ciclo tambm fornece intermedirios para a biossntese. Em eucariontes, as reaes do ciclo do cido ctrico ocorrem no interior da mitocndria, em contraste quelas da gliclise, que ocorrem no citossol. Um modelo global do ciclo cido ctrico mostrado na Figura 5.

Figura 5 - Ciclo do cido ctrico (Fonte: http://www.bioq.unb.br/htm/aulas2D/ciclo_de_krebs.htm)

Um composto de quatro carbonos (oxaloacetato) se condensa com uma unidade acetila de dois carbonos, para produzir um cido tricarboxlico de seis carbonos (citrato). Em seguida formado o isocitrato, um ismero estrutural do composto anterior. Este ismero (isocitratro) descarboxilizado oxidativamente, cujo composto resultante, de cinco carbonos (-cetoglutarato), sofre nova descarboxilao oxidativa para fornecer um composto de quatro carbonos (succinato). O oxaloacetato ento regenerado a partir do succinato. Dois tomos de carbono entram no ciclo como uma unidade acetila e deixam o

XXIV ciclo na forma de duas molculas de CO2. Um grupamento acetila mais reduzido que o CO2 e, deste modo, devem ocorrer reaes de oxidorreduo no ciclo do cido ctrico. Realmente, existem quatro das tais reaes. Trs iontes hidretos (portanto, seis eltrons) so transferidos a trs molculas de NAD+, enquanto um par de tomos de hidrognio (portanto, dois eltrons) transferido a uma molcula de flavina-adenina-dinucleotdeo (ATP) quando so oxidados pelo O2 na cadeia transportadora de eltrons. Adicionalmente, uma ligao fosfato de alta energia formada em cada volta do prprio ciclo do cido ctrico

7. Aplicaes do cido Ctrico O cido ctrico comercializado como anidro monoidratado e como sal sdico. Na indstria alimentcia usado como aditivo (acidulante e antioxidante) na fabricao de refrigerantes, sobremesas, conservas de frutas, gelias, doces e vinhos. Tambm utilizado na composio de sabores artificiais de refrescos em p e na preparao de alimentos gelatinosos. Previne a turbidez, auxilia na reteno da carbonatao, potencializa os conservantes, confere sabor frutal caracterstico, prolonga a estabilidade da vitamina C, reduz alteraes de cor, reala os aromas e tampona o meio.

Figura 6 - Aplicao de cido Ctrico na indstria alimentcia (Refrigerantes).

XXV

Entre suas aplicaes farmacuticas esto a de anticoagulante (em transfuso sangunea) e seu emprego na fabricao de produtos

efervescentes, onde componente essencial na reao com os bicarbonatos. Inibe a oxidao por metais da vitamina C e confere sabor agradvel. Nos xaropes estabiliza os princpios ativos, confere sabor, alm de possuir ao expectorante.

Figura 7 Aplicao farmacutica do cido Ctrico (Produtos Efervescentes).

Na indstria de cosmticos usado para regular o pH de loes adstringentes, como sequestrante, em cremes de lavagem (rinse) e fixadores de cabelo. Em colnias, desodorantes, loes e cremes reduzem a oxidao de componentes aromticos e escurecimento indesejvel, alm de estabilizar emulses.

XXVI

Figura 8 Aplicao cosmtica de cido Ctrico (Desodorantes e Loes).

Na indstria txtil utilizado como alvejante, auxiliando na estabilizao dos perxidos, na mercerizao, permitindo a neutralizao a quente e nos banhos de tingimento, corrigindo o pH. Empregado tambm na indstria veterinria nas formulaes de antibiticos e vermfugos, na agricultura em adubos foliares e formulao de defensivos.

Figura 9 Aplicao veterinria de cido Ctrico (Vermfugos).

Pode ser empregado como agente sequestrante em galvanoplastia, em curtumes e na reativao de poos de petrleo. Utiliza-se tambm no lavado qumico de membranas de osmose, por possuir ao desincrustante (2,5% os resultados aparecem com um tempo

XXVII mnimo de contacto de 30 minutos e a uma temperatura de 35). Ainda por sua ao desincrustante, utilizado na lavagem qumica de equipamentos de dilise.

Referncias Bibliogrficas

NEDER, R. N.; Microbiologia: manual de laboratrio. Editora Nobel. So Paulo, 1992.

AQUARONE, E.; LIMA, U. A.; BORZANI, W. Biotecnologia: Tecnologia das fermentaes. Volume1. Editora Edgard Blcher. So Paulo, 1975.

SHREVE, R. N.; BRINK Jr, J. A.; Indstrias de processos qumicos. 4 Edio. Editora Guanabara Koogan. Rio de Janeiro, 1997.

PINTO, G. A. S.; BRITO, E. S.; ANDRADE, A. M. R.; FRAGA, S. L. P.; TEIXEIRA, R.B. Fermentao em estado slido: Uma alternativa para o aproveitamento e valorizao de resduos agroindustriais tropicais

Comunicado tcnico on-line Embrapa, 1 Edio, Fortaleza CE, 2005.

STRYER, L.; Bioqumica. 4 Edio. Editora Guanabara. Rio de Janeiro, 1996.

XXVIII Histrico disponvel em: http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_c%C3%ADtrico Acessado dia 1 de junho de 2009

Caractersticas do cido ctrico disponvel em: http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_c%C3%ADtrico. Acessado dia 1 de junho de 2009 Aspergillus niger disponvel em: http://pt.wikipedia.org/wiki/Aspergillus Acessado dia 1 de junho de 2009