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MICOBACTRIAS E ESPIROQUETDEOS

CINCIAS BIOLGICAS BACHARELADO 5 TERMO 1-2012 Profa. Ana Rita

Micobacterias - morfologia

BAAR

So bacilos aerbios, finos (0,2 a 0,6 x1 a10 m). Parede rica em lipdeos complexos - cidos graxos (ac. miclicos) e ceras. Superfcie resistente descolorao com cidos - bacilos lcool-cido resistentes (BAAR). Crescimento lento tempo de gerao 12 a24 h culturas 3 a 8 semanas de incubao.

Micobactrias espcies de interesse clnico

Mycobacterium Mycobacterium Mycobacterium Mycobacterium Mycobacterium

tuberculosis avium-intracellulare tb kansasii gordonae leprae - hansenase

M. tuberculosis - Patogenia

Inalao de aerossis infectados vias areas multiplicao nos macrfagos alveolares lise celular linfcitos atrados formao de granulomas. Poucos bacilos controle por macrfagos ativados (resposta Th1) leses mnimas.
Muitos bacilos e resposta celular intensa necrose tecidual. Disseminao de macrfagos infectados para linfonodos locais e para outros rgos (medula, bao, rins, SNC).

Tuberculose

Rx do pulmo com tb

Corte histolgico, mostrando infiltrado celular

Teste intradrmico de tuberculina (PPD)

Verifica imunidade celular se h linfcitos T sensibilizados pelo antgeno (se houve contato com o bacilo).

M. tuberculosis - Epidemiologia

Causa a tuberculose, principal causa de morte entre as doenas infecto contagiosas. A cada ano 8 a 10 milhes de infectados infectam outras 100 milhes de pessoas levando a morte cerca de 3 milhes de pessoas.

80% da populao infectada habita pases subdesenvolvidos inclusive o Brasil.

M. tuberculosis - Epidemiologia

Aumento da incidncia desde 1990. Transmisso: contato direto por inalao de aerossis infectados.
Grave problema de sade pblica indigentes, usurios de drogas, prisioneiros e infectados pelo HIV propagao para outras populaes. Principal medida de controle: identificar os infectados e propiciar-lhes terapia adequada.

Diagnstico laboratorial da tuberculose

1. Demonstrao de bacilos lcoolcido resistentes (BAAR) em preparaes coradas pela tcnica de Ziehl-Neelsen ou colorao fluorecente.
2. Isolamento e identificao de M. tuberculosis ou outras espcies. 3. Antibiograma teste de sensibilidade in vitro aos frmacos antituberculosos.

Procedimentos de segurana

Fluxo laminar

Risco biolgico classe 3 (elevado). Zonas separadas do laboratrio e dotadas de meios especiais como cabines de segurana (fluxo laminar) Centrfugas seguras.

Exame bacterioscpico colorao de Ziehl-Neelsen


Esfregao fixado pelo calor.
Fuccina concentrada, com aquecimento (penetrao do corante).

Enxague com gua.


BAAR corados em vermelho.

Descoramento com 3% de HCl em 70% de lcool (os BAAR permanecem corados).

Clulas, leuccitos e Enxague com gua. demais bactrias corados Azul de metileno (colorao de em azul.

fundo).

Isolamento de micobactrias em cultura pura


o

Colnias de M. tuberculosis (pigmento amarelo).

Meios de cultura: Lwenstein-Jensen Caldo 7H9 ou 7H11 (para amostras estreis) Middlebrook Incubao: 30 C, 3 a 11% de CO2, por 7 a 10 dias. Sistemas automatizados: BACTEC

Identificao clssica

Provas bioqumicas, morfolgicas e de fisiologia. Temperatura tima (28-37 C), velocidade de crescimento (3-60 d), produo de pigmentos (na presena e na ausncia de luz), acmulo de niacina, reduo de nitrato nitrito, hidrlise do tween 80, urease e outras.

Identificao por quimiotaxonomia

Anlise de cidos miclicos pela tcnica de cromatografia em camada delgada. Cromatografia lquido-gasosa. Cromatografia de alta presso (HPLC).

Identificao por sistemas comerciais

Sistemas automatizados: BACTEC.


Sistemas manuais: Sepi-Chek System (BBL), MGIT (Becton Dickinson).

Tcnicas de biologia molecular: PCR e outras.

Antibiograma

Necessrio: M. tuberculosis resistente a mltiplas drogas. Convencional Placas de Petri divididas em 4 quadrantes com 5 mL de meio em cada (meio 7H10 basal). O 1 sem droga, os demais com diferentes concentraes da droga em estudo (utilizada no tratamento). Droga adicionada aps esfriamento do gar a 45 C. Prova em caldo resultados mais precisos e mais confiveis. BACTEC

M. avium-intracellulare

Ambiente (solo, gua, alimentos) Indivduos imunocompetentes colonizao transitria assintomtica. Tuberculose em pacientes com funo pulmonar comprometida. Tuberculose em pacientes com AIDS infeces graves, disseminadas, atingindo quase todos os rgos.

M. leprae - Patogenia

Causa a hansenase Manifestaes clnicas dependem da resposta imune do hospedeiro. Forma tuberculide forte resposta celular (Th1), muitos linfcitos, numerosos granulomas nos tecidos e poucos bacilos. Forma lepromatosa fraca resposta celular (Th1), muitos bacilos nos macrfagos. Formas intermedirias.

Hansenase leses

M. leprae - Epidemiologia

Mais de 12 milhes de casos no mundo, a maioria na sia e frica. Reservatrios: tatus. Transmisso contato interpessoal. Inalao de aerossis infecciosos ou contato de pele com secrees respiratrias e exsudatos de feridas.

Diagnstico laboratorial da hansenase

Demonstrao de BAAR em exsudatos de leses colorao de Ziehl-Neelsen.


BAAR dispostos em globias.

M. leprae no cresce em meios de cultura. Teste intradrmico lepromina (Reao de Mitsuda). Forma tuberculide: poucos bacilos na leso. Reao de Mitsuda positiva. Forma lepromatosa: muitos bacilos na leso. Reao de Mitsuda negativa.

Espiroquetdeos
Bactrias em forma de espiral, longas, finas, mveis (rotao e flexo). 3 gneros: Treponema, Leptospira e Borrelia.

Treponema palidum

Mede 2 a 20 m de comprimento por 0,1 a 0,2 m de dimetro. No visvel ao microscpio comum. Microscopia de campo escuro ou impregnao pela prata. No cresce em meios de cultura. Infeco experimental em testculos de coelhos. Agente etiolgico da sfilis (DST).

Sfilis

Congnita Transmisso: via transplacentria a partir do 4 ms da gestao. Leses no feto, morte do feto. Adquirida Transmisso: via sexual, beijo, transfuso sangunea, inoculao acidental. Fases: Primria, secundria e terciria.

Sfilis primria

Presena de cancro duro, leso genital que aparece 10 a 20 dias aps infeco. Leso com bordas endurecidas, e a base recoberta por exsudao purulenta, rica em treponemas. Geralmente o cancro acompanhado de lifadenite regional.

Mesmo sem tratamento a leso cicatriza em 4 a 6 semanas.

Sfilis secundria

Manifestaes aparecem 2 a 10 semanas aps o aparecimento do cancro. Linfadenopatia generalizada e erupes cutneas maculares e papulares, e lceras rasas nas mucosas da boca, vulva, vagina e reto.
Leses cedem espontaneamente em poucas semanas.

Sfilis terciria

Surge 8 a 25 anos depois da infeco inicial. Leses destrutivas e graves em qualquer tecido ou rgo. Mais comum aorta, sistema nervoso central e esqueleto. Gomas granulomatosas e grandes, com necrose, principalmente na pele e ossos. Evoluo com perodos curtos de sintomas e perodos longos de remisso.

Sfilis - Diagnstico Laboratorial

Sifils primria: demostrao do T. pallidum na secreo da leso (cancro duro) por:

Microscopia de campo escuro (treponemas vivos e mveis)

Fontana Tribondeau (impregnao pela prata)

Imunofluorescncia Direta

Sfilis - Diagnstico Laboratorial

Aps desaparecimento do cancro: demonstrao de anticorpos (sorologia). Anticorpos inespecficos VDRL (Veneral Disease Research Laboratory) Anticorpos especficos FTA-ABS, TPHA e ELISA.

Sfilis - Tratamento

Penicilina (escolha). Cefalosporinas, tetraciclinas ou eritromicina (alrgicos PN). Negativao do VDRL 6 meses a 2 anos aps tratamento. Outros testes sorolgicos continuam positivos.

Leptospira

L. interrogans agente da leptospirose. Sorotipo mais frequente: icterohaemorrhagiae (causa sndrome de Weil). Morfologia: 6 a 16 m de comprimento por 0,1 m de dimetro e uma extremidade em forma de gancho.

Leptospirose

Reservatrios: animais silvestres e domsticos. Rato principal. Transmisso: gua e urina dos animais, principalmente ratos. Perodo de incubao: 10 dias. Penetrao das bactrias pela pele e depois de proliferar no sangue vo para os rins, fgado e SNC. Sintomas: febre alta com calafrios, dor de cabea e dor muscular principalmente nos membros inferiores, hiperemia conjuntival. Pode ocorrer nuseas, vmitos e diarria.

Leptospirose - Diagnstico e Tratamento

Demonstrao da leptospira em material clnico campo escuro. Pesquisa de anticorpos especficos sorologia. Tratamento: Penicilinas e tetraciclinas. Valor apenas nos 2 primeiros dias da infeco. Antisoros especficos.

Borrelia

B. recurrentis causa febre recorrente. Transmisso por piolhos ou carrapatos. Diagnstico laboratorial: demonstrao da bactria no sangue em campo escuro. Tratamento: tetraciclina.
B. borgdorferi doena de Lyme, enfermidade sistmica com alteraes cutneas, articulares, neurolgicas e cardacas. Rara no Brasil. Transmisso: carrapatos. Diagnstico laboratorial: demonstrao de anticorpos (IFI ou ELISA). Tratamento: doxiciclina.

Borrelia

Borrelia burgdorferi

Doena de Lyme leses articulares

Bibliografia

TRABULSI, L. R. & ALTERTHUM, F. Microbiologia, 5 ed., So Paulo, Atheneu, 2008. MURRAY, P. R.; ROSENTHAL, K. S.; KOBAYASHI, G. S.; PFALER, M. A. Microbiologia Mdica, 4 ed., Rio de Janeiro, Editora Guanabara Koogan, 2004. KONEMAN, A.; DOWELL, S. Diagnstico Microbiolgico: Texto e Atlas Colorido, 6 ed., Rio de Janeiro, Editora Mdica Cientfica, 2008.
http://www.medicinanet.com.br/conteudos/revisoes