2.

Verraria de precisão
M1 A VERRERIE PRINCIPAL
Buretas (ver ficha M 9)
1. Vidraria comum pouco precisa
Pipetas graduadas
Ttubos de ensaio e tubos de hemólise Utilizadas para colher as soluções a serem dosadas
Utilizados para reações de caracterização, e os reagentes.
os dosagens colorimétricas. Dois tipos:
pipetas a um traço de medição
(Esquema da direita)
Coupelles e tamancos
Para receber o produto na pesagem. pipetas de dois traços de calibração
(Esquema à esquerda)
Cilindros
Contêm os reagentes a serem coletados para realizar a 3. Vidraria de alta precisão
manipulação. Antes do preenchimento a partir do
flacon de réserve, y noter au marqueur le nom Pipetas graduadas
du produit et les lettres-symboles de sécurité. Utilizadas para colher a solução a ser dosada
ou um volume dado de reagente intervindo
Fioles Erlenmeyer ou vasos de reação precisamente na dosagem. 10
Recebem a solução a ser dosada e os reagentes
qui ensemble forment o meio reacional Existem também pipetas graduadas a
onde é realizado o dosagem volumétrica. um traço e dois traços de medição.

Balões
Permitem o aquecimento de líquidos a Frascos aferidos
alta temperatura. Usadas para a confecção de soluções exatas.

Epruquetas
Permitem distribuir um volume pouco preciso.
Notavelmente usadas para água destilada e os
reagentes usados para criar uma condição química
particular ao desenrolar da dosagem.
 M2 AJUSTE E PRECISÃO PIPETAS GRADUADAS Erro no volume (mL)
DA VERRERIE PRINCIPAL
Classe A Classe B
Pipetas de um traço
AJUSTE DO VOLUME AO TRAÇO DE Jauge 1 mL +/- 0,006 +/- 0,010
A superfície de um líquido em um recipiente não é plana, ela assume 2 mL +/- 0,010 +/- 0,020
a aparência de um menisco côncavo assim como o ajuste do volume na 5 mL +/- 0,030 +/- 0,050
fioles et pipettes est fait comme le montre la figure. 10 mL +/- 0,050 +/- 0,10
Pipetas de dois traços
INSTRUÇÕES A SEREM RESPEITADAS PARA 1 mL +/- 0,006 +/- 0,010
2 mL +/- 0,010 +/- 0,020
UM BOM AJUSTE : 5 mL +/- 0,030 +/- 0,050
10 mL +/- 0,050 +/- 0,10
Segurar o frasco ou a pipeta bem
Menisco verticalmente 3. A vidraria de alta precisão das classes A e B: pipetas e
fioles jaugées.
colocar os olhos em frente à graduação
O erro sobre o volume extraído é inferior a 0,5 %.
para evitar erros de paralaxe
PIPETES Erro no volume (mL)
- fazer coincidir a parte inferior do menisco JAUGEES Classe A Classe B
com a linha de medição. 1 mL +/ - 0,007 +/ - 0,015
2 mL +/ - 0,010 +/- 0,020
5 mL +/- 0,015 +/ - 0,030
Observação: com uma solução fortemente colorida ou opaca, a parte inferior do menisco
10 mL +/ - 0,020 +/ - 0,040
não é detectável. Realize então o ajuste na parte superior do menisco. 15 mL +/ - 0,025 +/ - 0,050
20 mL ou 25 mL +/ - 0,030 +/ - 0,060
A PRECISÃO 50 mL +/ - 0,050 +/- 0,10
A escolha do vidro a ser utilizado depende da precisão que impõe a 100 mL +/ - 0,080 +/ - 0,16
manipulação. Assim, distingue-se:
FIOLES Erro no volume (mL)
1. A vidraria comum pouco precisa: béqueres, Erlenmeyers, JAUGEES Classe A Classe B
tubo de ensaio. 10 mL +/ - 0,025
O erro no volume coletado é de 1 a 5%. 20 ou 25 mL + / - 0,04
Exemplo: ao medir 100 mL em um béquer, o erro é, portanto, de 50 mL +/ - 0,06 +/ - 0,15
+/- 1 à 5 mL 100 mL +/ - 0,10 +/ - 0,20
200 ou 250 mL +/ - 0,15 +/ - 0,30
500 mL +/ - 0,25 +/ - 0,50
2. A vidraria de precisão de classe A e classe B: buretas e
1000 mL +/ - 0,40 +/ - 0,80
pipetas graduadas.
Com esse tipo de vidro, o erro no volume retirado é inferior
Nota: as pipetas graduadas e calibradas de 1 e 2 ml têm quase a
a 1%, a vidraria de classe A sendo mais precisa do que a vidraria de
mesma precisão.
classe B.
 M3 UTILIZAÇÃO DAS PIPETAS M4 AS PIPETTES AUTOMÁTICAS
GRADUADAS OU JAUGADAS
(Evitar o termo pipetman que é uma marca)
Escolha da pipeta Diferentes tipos
A pipeta deve ser adequada ao volume a ser retirado, à precisão exigida pela Pipetas automáticas de grande volume: P 5000, P1000…
manipulação, ao respeito pela segurança e à viscosidade do líquido. Micropipetas: P200, P100, P50, P20…
Exemplos : Escolher obviamente uma pipeta adequada ao volume a ser retirado.
Ex : uma P200 para retirar 150µL e não uma P1000.
- para 5 mL de água do rio a ser dosada: pipeta graduada de 5 ml
- Para 9,5 mL de reagente: pipeta graduada de 10 ml
- Colocar 4,5 mL de um reagente perigoso: pipeta graduada de 10 ml Protocolo de utilização
- Para 1mL de leite a medir: pipeta de 1 ml de escoamento total.
Ajuste o volume a ser retirado e coloque o bico apropriado.
Protocolo de utilização Enxaguar o bico ou cone:
- cone fora da solução, pressione o botão de pressão da
1- Adapter une propipette et rincer la pipetteà l ’eau distillée puis pipetar até o primeiro batente,
com a solução a ser coletada. - introduzir de 2 a 5 mm da extremidade do cone na solução a
prélever e soltar lentamente o botão de pressão para aspirar a
2- Aspirar lentamente a solução até acima do zero ou do solução sem causar turbulências,
volume desejado mergulhando não mais de 1 cm da extremidade de - rejeitar o líquido aspirado na solução ou em uma lixeira.
a pipeta no líquido. apertando com força o botão de pressão.
Durante este enxágue, verifique bem a estanqueidade entre o cone e a
3- Limpar as paredes externas com papel filtro: a pipeta pipeta assim como o bom estado da pontinha.
est préférentiellement tenue horizontalement. Prélever a solução e entregá-la:
- cone fora da solução, pressione o botão de pressão
4-Ajustar o volume eliminando o excesso de solução no béquer até a primeira batida,
Inicialmente, coloque o traço de medição na altura dos olhos. - pipeta mantida na vertical, introduzir a extremidade do cone na
a pipeta é mantida verticalmente, sua extremidade contra solução e liberar lentamente o botão para aspirar a
a parede do recipiente, sem tocar a solução e formando um solução
ângulo de 10° a 40° com o recipiente. - verificar a ausência de bolhas de ar e enxugar com papel filtro os
eventuais gotas de líquido na parede externa do cone
5-Entregar regularmente a solução contra a parede do recipiente sem tocar na abertura.
de destino, respeitando rigorosamente os mesmos - liberar lentamente a solução pressionando completamente o
precauções mencionadas anteriormente. botão de pressão. A pipeta é mantida verticalmente, a extremidade
• Para uma pipeta de um traço, deixe toda a solução escorrer. o cone se apoia contra a parede do recipiente segurado na mão de acordo com um
• Para uma pipeta graduada com 2 traços, coloque o olho na altura do 2.èmetraço de
jauge et arrêter l’écoulement à ce niveau. ângulo de 10° a 40°.
• Para uma pipeta graduada de escoamento parcial, coloque o olho à altura do O escoamento da solução ocorre contra a parede do recipiente,
graduação desejada e interromper o fluxo. sem tocar no líquido já presente.
Remessa no lugar: soltar o botão de pressão, descartar o cone
6- Remoção do excesso: eliminar o restante da solução, enxaguar a pipeta sujo em uma lixeira e colocar a pipeta em seu suporte.
imediatamente na água destilada e guardá-la.
 M5 REALIZAÇÃO DE UMA PESAGEM M6 CONFEÇÃO DE UMA SOLUÇÃO
EM FIOLE JAUGEE

PREPARAÇÃO DO BALANÇO : 1- Coloque o produto no frasco graduado limpo e enxaguado. Trata-se de:
1- Limpar a bandeja e o interior da balança com o auxílio do - seja diretamente de um soluto pesável se apresentar uma boa solubilidade,
pincel. - seja do soluto a ser solubilizado previamente em um pequeno bécher com um
2- As portas estando fechadas, ligue a balança e então mínimo de solvente e um agitador,
aguardar a exibição do zero seja uma solução inicial a ser diluída, retirada com a ajuda de uma pipeta.
- onde fazer o ajuste do zero pressionando o botão Eventualmente, poderá-se usar um funil.
correspondente.
Observação: em alguns modelos, está previsto verificar 2- Enxaguar com o solvente todo o material que continha o soluto em
a horizontalidade da balança graças a um nível de bolha. recuperando o líquido de enxágue na frasco.
TARAGE : 3- Adicione o solvente até 2/3 de preenchimento do frasco, em seguida
3- Coloque o sabot ou a taça na bandeja da balança. homogeneizar a solução por rotação verificando se seu conteúdo toma
4- Realizar a tara, portas fechadas, pressionando o botão um aspecto homogêneo desprovido de grãos de produto.
correspondente.
4- Continuar a enchê-lo até cerca de 1 cm abaixo do
PESEE : traço de medidor.
5- Adicione o produto aos poucos com uma espátula, evitando
de ultrapassar a massa desejada. 5- Limpar o interior do gargalo do frasco com papel de filtro para
6- Noter la valeur de la pesée en gardant les portes fermées. eliminar as gotas residuais.
REMISE EN PLACE : 6- Ajustar o volume até a linha de medição com um conta-gotas
7- Retirar o recipiente de pesagem. e sem tocar a superfície do líquido. O frasco está posicionado em um plano
8- Balança desligada, limpar se necessário e fechar as portas. horizontal e a linha de medição está na altura dos olhos.
Exemplos de pesagens:
Instruções de pesagem Massa a pesar 7- Fechar o frasco com uma tampa ou um filme plástico e agitar.
Peser environ 1 g de colorant por rotação e inversão para homogeneizar bem a solução.
para preparar 100 ml de solução
indicadora.
Pese exatamente 0,1 g de Observação importante: antes de usar, transfira uma parte do
produto para fazer 200 ml de conteúdo da ampola em um béquer limpo e seco. Nunca se deve retirar
solução padrão. diretamente em um frasco com a ajuda de uma pipeta.
Peser environ exactement 70 mg
de produto a colocar em um
Erlenmeyer para um titulação.
 M7 A DISPENSA OU DISTRIBUIDOR M8 UTILIZAÇÃO DE UMA CENTRÍFUGA

Utilizado para entregar rapidamente e sem grande A centrifugação é uma técnica que utiliza um campo de força em rotação rápida para
precisão de um volume de reagente em um tubo a separar é uma dispersão de um sólido dentro de um líquido
- seja uma dispersão de um líquido em outro líquido não
ensaio, um vaso de reação… miscíveis e de densidade diferente.
Exemplo: centrifugação de um tubo de sangue total para separar as células da fase
Muito útil para reagentes perigosos: ácidos líquido.
fortes, bases fortes... Aspect Aspecto depois
ao partir: centrifugação

Protocolo de utilização
Regras de utilização de um centrifugador
1- Ajustar o volume a ser entregue.
1. Escolha dos tubos e disposição no aparelho:
Os tubos de fundo cônico geralmente de baixa capacidade
2- Amortecer o pistão com uma ou duas coletas a rejeitar e
certificar-se da ausência de bolhas de ar na tubulação. permitem concentrar o resíduo em um volume muito pequeno
que os tubos a fundo redondo são previstos para tratar volumes mais
3- Coloque a tubulação da dispensete contra a parede do grandes. Para os tubos de vidro, é necessário adaptar nos copos de
recipiente de destino, este sendo mantido inclinado. centrifugação das proteções de borracha para evitar quebras.
-Depositar os tubos dois a dois nos locais previstos para
4- Aspirar e liberar o líquido procedendo da seguinte maneira nível dos compartimentos e de forma simétrica em relação ao eixo
de acordo com o tipo de modelo : central.

2. Equilíbrio: Os baldes colocados simetricamente em relação ao eixo

1ercas
de rotação não devem apresentar uma diferença de peso
- Levante o pistão totalmente sem fazer turbulências.
superior a 0,1 g. Certifique-se de verificar, se necessário, por meio de uma
- Pressione até o fim com um movimento a uma velocidade constante e nem
nem muito rápido, nem muito lento. balança Roberval, e para completar a falta de peso por adição
água destilada no copo mais leve.
2èmecas 3. Ligação do aparelho: Consulte o manual do aparelho e
Pressione lentamente e sem ondulações o pistão até o batente. régler la durée et la vitesse selon les indications du protocole
- Deixe o pistão voltar à sua posição inicial. Espere bem o retorno operatório.
complete o cilindro dianteiro antes de fazer uma nova adição.
4. Recuperação dos tubos: proceder com cuidado para evitar os
5- Preparação: recuperar a última gota do recipiente lesões por quebra de vidro e contaminação por material
de destino ou em uma lixeira que estará sempre disposta biológico se houve quebra durante a centrifugação.
sob a tubulação na ausência de utilização da dispensete.
 M9 AS BURETAS Protocolo de utilização

Utilizadas para realizar dosagens volumétricas ou eventualmente Instruções de segurança:

para a distribuição de um grande volume de reagente. Use sempre óculos de proteção para evitar os
projeções de líquido nos olhos.
Différentes burettes et précision Usar luvas apenas ao manusear a
a solução apresenta riscos químicos ou biológicos.
Tolerâncias em mL
para o material de classe A 1- Preenchimento da bureta com a solução:
Macroburettes Rejeitar a água destilada que contém em uma lixeira.
50 mL +/- 0,050 - Enxaguar várias vezes com água destilada usando um frasco de spray e
25 mL +/- 0,030 uma vez com um pouco de solução de enchimento (para evitar o
Semi-micro buretas desperdício, fazer escorrer um fio fino de solução contra a parede
10 mL +/- 0,020 en tournando a bureta em seu suporte)
Encher a bureta até cerca de 5 mm acima do
5 mL +/- 0,015
2 mL +/- 0,010 graduação zero.(Proceder de maneira a evitar bolhas de ar).
-Limpar a ponta da bureta com papel filtro e se
1 mL +/- 0,007
Micropipetas Capillaires, seringues necessário toda a altura do tubo.
Ajuste o volume para o nível da graduação zero e limpe
A macrobureta de 25 ml é a mais utilizada, ela libera
gotas de 0,05 ml. o interior do col da burette com papel filtro.

Ajustagem ao zero e leitura do volume despejado 2- Realização da dosagem:

Colocar a ponta da bureta no frasco de reação e
Si solução incolor: Sim, solução muito colorida: pegar a torneira. Para um técnico destro, a torneira
est colocado à direita e segurado com a mão esquerda que envolve a parte de baixo
da bureta. A mão direita segura e agita o recipiente. Para um
técnico canhoto, é o inverso.
-Abra a torneira completamente para liberar a solução e ao
voisinage du point final, fermer partiellement le robinet pour
obter um fluxo de gotejamento.
Durante toda a dosagem, agite o recipiente por rotação.
Muitas buretas estão equipadas com uma faixa fotofórica (linha
azul vertical) facilitando o ajuste e a leitura dos volumes. No nível do
o menisco a banda se torna mais estreita e parece formar duas flechas 3- Reposição:
-Esvaziar completamente a solução que resta na bureta (na uma
tocando pelas suas pontas; é ao nível deste ponto de contato que
realizam-se o ajuste e a leitura dos volumes. lixeira ou no frasco original para os reagentes caros).
Enxágue várias vezes com água destilada.
Manter o frasco sempre cheio de água destilada.
 M 10 O FOTÔMETRO DE ABSORÇÃO Consigne de sécurité : porter des gants et des lunettes de
proteção apenas durante a manipulação da solução
É um dispositivo óptico que mede a absorção de radiações eletromagnéticas exposto a riscos químicos ou biológicos.
por uma solução colocada em um tanque ou diretamente aspirada com a ajuda de um cateter
relacionada ao aparelho. A absorbância da solução é proporcional à sua concentração
em condições bem definidas (ver aula). Geralmente, é um método por
comparação da absorvância dos ensaios com a absorvância de um ou mais 2. LECTURA NO ESPECTROFOTÔMETRO :
etais.
Ligar o aparelho e selecionar o comprimento de onda
1. PREPARATION DES CUVES de trabalho adaptada ao dosagem.

Confeccionamos previamente em uma série de tubos, diversas Fazer o zero do aparelho no indicador ou branco-reativos.
soluções reativas padrões, testemunha e teste que são então Nota: em alguns casos, o zero é realizado em água destilada.
transvasadas em tanque. A preparação é feita ao mesmo tempo e em Em seguida, medimos a absorbância do testemunho-reagentes e a
as mesmas condições operacionais para todos os tubos. retranche por cálculo aos valores de absorbância dos padrões e dos
ensaios.
Realização dos padrões
Trata-se de um ou mais tubos contendo a substância a ser dosada em concentração. -Calibrar o aparelho passando os tanques contendo os
connue. Operamos por diluição de uma solução inicial concentrada ao distribuir em
uma série de tubos : soluções reativas padrão em ordem crescente de
- volumes crescentes de solução inicial com uma mesma pipeta, concentração.
- então, adicione água destilada igualmente com uma mesma pipeta de forma a alcançar o
mesmo volume final em todos os tubos. Passar os tanques das soluções de teste.
Após homogeneização com o auxílio do vortex, obtém-se soluções conhecidas de
concentrações crescentes às quais basta adicionar os reagentes que reagem com o
substância a ser evidenciada. Refazer as medições se a progressão das absorbâncias não
não parece lógico.
Realização do testemunho-reagentes
É um tubo que permite ajustar o zero do aparelho. Obtém-se misturando
a água destilada com os reagentes de revelação. Reporter em uma folha todos os valores de absorbância exibidos
pelo aparelho à medida que a leitura avança.
Realização dos ensaios
A solução a dosar é misturada com os reagentes de revelação. Geralmente, realiza-se 3. LIMPEZA E ORGANIZAÇÃO
dois ensaios.

Escolha e preenchimento dos tanques Esvaziar o conteúdo dos tanques em lixeiras adequadas.
- Dependendo do protocolo operacional, utilize microcubetas ou macrocubetas, - Enxaguá-los com água e deixá-los de molho em uma solução de limpeza se
para doseagem no visível (cubeta de plástico) ou para doseagem no UV (cubeta em elas devem ser reutilizadas.
quartz ou em plástico especial).
Desligar o aparelho.
- Verificar a limpeza, a ausência de arranhões, o estado seco e não tocar os
faces transparentes dos recipientes. Limpe-os com papel Joseph, se necessário. -
-Homogeneizar as diferentes soluções antes de proceder ao enchimento das
cubos e logo antes da leitura no espectrofotômetro.
-Encher os tanques até 2/3 da altura ou até menos para evitar qualquer
inversão no aparelho.
 M 11 OS APARELHOS DE DESTILAÇÃO
APPAREIL
Eles permitem o isolamento de uma substância a partir de uma mistura. DE MARKHAM :
Exemplos: recuperação do álcool do vinho, isolamento do nitrogênio do leite ...
Distingue-se: os aparelhos totalmente automatizados,
- os aparelhos de destilação para dosagens em método macro como
o aparelho de Schloesing
- os dispositivos para dosagens em micro método chamados de
treinamento a vapor d'água: aparelhos de Markham e Parnas.

Instruções de segurança:
Usar óculos de proteção ao montar um aparelho para se proteger
os olhos dos cacos de vidro em caso de quebra.
- Não forçar ao montar as diversas peças. Em caso de utilização de
tubos de borracha, é aconselhável molhá-los com água antes de sua
mise en place sobre o vidro.

APARELHO DE DESTILAÇÃO DE SCHLOESING :

APARELHO
DE PARNAS :

Conselhos de utilização:
A circulação da água em um refrigerante sempre acontece de baixo para cima para
assegurar sua eficácia.
A ebulição no balão deve ser regular.
- Durante o uso, algumas partes da montagem estão muito quentes,
aguardar o resfriamento antes de qualquer ação no aparelho.
 ESQUEMA DA MONTAGEM :
M 12 O pH - MÉTRO

Trata-se de um aparelho que mede uma diferença de potencial entre dois eletrodos.
mergulhos na solução a ser estudada e, em seguida, deduz o potencial de hidrogênio ou pH.
As eletrodos são:
- uma eletrodo de calomel que tem um potencial estável, independente do pH do
Bécher
solução. Ela serve como eletrodo de referência, com
- uma eletrodo de vidro com uma membrana de vidro que permite a passagem dos íons solução
H+. Son potentiel varie donc en fonction du pH de la solution.
à testar

Durante uma titulação potenciométrica, o arranjo também inclui uma

bureta trazendo o reagente titulante antagonista na solução a ser titulada.

PROTOCOLO DE UTILIZAÇÃO:

O pH-metro é graduado diretamente em unidade pH, mas para ser confiável,

ele é previamente calibrado com soluções de pH conhecido, os
soluções tampões.
Para a utilização, seguimos o manual técnico que varia de um aparelho para outro.
a outra, mas de uma maneira geral, é preciso:

- Enxaguar bem os eletrodos com água destilada e secá-los com um

papel Joseph depois mergulhá-los na solução tampão.

Calibrar o aparelho com uma ou mais soluções tampão.

Enxaguar cuidadosamente os eletrodos com água destilada e secá-los

Observação: Existem eletrodos chamados combinados que associam eletrodo de vidro e com papel Joseph antes de mergulhá-los na solução a
eletrodo de referência, mais resistentes a choques do que os eletrodos de vidro. testador.
Precauções técnicas : Leia o pH da solução a ser testada.
- O eletrodo de vidro é muito frágil e não deve entrar em contato com o
barra magnética do agitador magnético.
- Entre duas medições, não deixe os eletrodos ao ar, mas mergulhe-os - Lave bem e guarde os eletrodos ao final da utilização.
em água destilada ou guardá-los em sua solução de conservação (água
destilada para o eletrodo de vidro, solução saturada de cloreto de potássio
para o eletrodo de calomel.