INSTRUKCJA Oznaczanie azotu amonowego metoda kolorymetryczna z odczynnikiem nesslera

Zasady oznaczania Oznaczanie azotu amonowego polega na reakcji jonu amonowego z odczynnikiem Nesslera, w wyniku ktrej powstaje zwizek kompleksowy NH2Hg2OJ o zabarwieniu topomaraczowym. Intensywno zabarwienia mierzona spektrofotometrycznie przy dugoci fali 400-425 nm wzrasta wraz ze wzrostem zawartoci jonu amonowego. Metod stosuje si do oznaczania azotu amonowego w wodzie w zakresie ste 0,04-3,0 mg dm-3. Czynniki wpywajce na oznaczanie Czynnikami przeszkadzajcymi w oznaczaniu s nastpujce parametry i zwizki: mtno i barwa powyej 20 mg Pt dm-3, jony elaza, wapnia i magnezu oraz fenole, ktre tworz z odczynnikiem Nesslera osady oraz siarkowodr i siarczki, ktre daj zwizki barwne. Gdy w badanej prbce wystpuj wymienione czynniki przeszkadzajce w oznaczaniu naley je usun zgodnie ze wskazaniami przedstawionymi w literaturze (np. Siepak i in. 1992, Zieliski i in. 1993). Aparatura i szko Spektrofotometr lub kolorymetr fotoelektryczny o zakresie obejmujcym dugo fal 400-500 nm, kuwety szklane o gruboci warstwy absorbujcej 1 i 5 cm. Cylindry Nesslera typ niski, o pojemnoci 50 cm3 Pipety 1 dm3, 10 cm3, 25 cm3, Kolby miarowe o pojemnoci 1 dm3. Odczynniki i roztwory Odczynnik Nesslera: Winian sodowo - potasowy C4H4O6NaK. 4H2O cz. d. a., roztwr: Woda destylowana Chlorek amonowy, roztwr wzorcowy podstawowy: Chlorek amonowy, roztwr wzorcowy roboczy: Przygotowanie do bada Przygotowa spektrofotometr lub kolorymetr fotoelektryczny do pracy zgodnie z jego instrukcj obsugi. Pomiary absorbancji wykonywa przy dugoci fali 400 nm i z kuwet 5 cm dla zawartoci azotu amonowego do 0,05 mg oraz z kuwet 1 cm dla zawartoci 0,05 - 0,15 mg. Wykonanie oznaczenia 1. Sporzdzanie krzywych wzorcowych Do dwunastu cylindrw Nesslera odmierzy kolejno: 0,0; 0,5; 0,8; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0; 7,0; 10,0; 12,0; i 15,0 cm3 roztworu wzorcowego roboczego chlorku amonowego i uzupeni do kreski wod destylowan woln od amoniaku. Tak sporzdzone roztwory zawieraj odpowiednio nastpujce iloci azotu amonowego: 0,000; 0,005; 0,008; 0,01; 0,02; 0,03; 0,04; 0,05; 0,07; 0,10; 0,12; i 0,15 mg. Do kadego cylindra doda po 1 cm3 roztworu winianu sodowo-potasowego i wymiesza.

Nastpnie dodawa po 1 cm3 odczynnika Nesslera w takich odstpach czasu, aby pomiar kadego wzorca by wykonany dokadnie po 10 minutach od chwili jego dodania. Jako odnonik stosowa wod destylowan. Wykreli krzyw wzorcow, odkadajc na osi odcitych zawartoci azotu amonowego wyraone w mg N-NH4, na osi rzdnych zmierzone wartoci absorbancji. 2. Pomiar stenia azotu amonowego Do trzech cylindrw Nesslera o pojemnoci 50 cm3 odmierzy po 50 cm3 badanej prbki lub mniejsz objto, tak aby zawarto w niej azotu amonowego wynosia 0,005-0,15 mg. Roztwr uzupeni do kreski wod destylowan woln od amoniaku. Nastpnie doda 1 cm3 roztworu winianu sodowo-potasowego, wymiesza, doda 1 cm3 odczynnika Nesslera i powtrnie wymiesza. Po upywie 10 minut zmierzy absorbancj badanych roztworw, w kuwecie 1 lub 5 cm przy uyciu wody destylowanej jako odnonika. Obliczanie i podawanie wynikw Zawarto azotu amonowego w prbce odczyta z odpowiedniej krzywej wzorcowej. Zawarto azotu amonowego N-NH4 obliczy wedug wzoru: N-NH4 [mg dm-3] = (a. 1000) / v gdzie: a - zawarto azotu amonowego N-NH4 w badanej prbce odczytana z krzywej wzorcowej [mg], v - objto prbki wody pobranej do oznaczania [cm3]. Za wynik naley przyj redni arytmetyczn wynikw dwch rwnolegle wykonanych oznacze, przy czym rnica midzy nimi nie moe przekracza: - 0,05 mg dm-3 przy steniu 1,0 mg dm-3 N-NH4, - 0,1 mg dm-3 przy steniu 1,0 mg dm-3 N-NH4.