ESTUDO ANATMICO DE CAFEEIROS ENXERTADOS Estudo anatmico de cafeeiros enxertados

Anatomic study of grafted coffee trees

Fbio Pereira Dias1, Daniel Melo de Castro2, Antnio Nazareno Guimares Mendes3, Haroldo Silva Vallone4, Alex Mendona de Carvalho5, Gladyston Rodrigues Carvalho6

735

RESUMO Neste trabalho, objetivou-se, avaliar as caractersticas anatmicas do caule de cafeeiros enxertados, auto-enxertados e pfranco. Foram utilizadas as cultivares Catuca Amarelo 2 SL e Topzio MG 1190 (Coffea arabica L.) e o porta-enxerto Apoat IAC 2258 (C. canephora Pierre ex Froehn.). As sees anatmicas longitudinais e transversais foram realizadas aos 30, 60 e 90 dias aps a enxertia. Os resultados no mostraram evidncias de incompatibilidade de reconstituio e formao de tecidos entre as cultivares estudadas. Termos para indexao: Caf, enxertia, anatomia, Coffea spp. ABSTRACT This work aimed at evaluating the anatomic features of grafted, self-grafted and ungrafted coffee tree stems. The longitudinal and transversal sections were performed at 30, 60, and 90 days after grafting in Catuca Amarelo 2 SL and Topzio MG 1190 (Coffea arabica L.) cultivars, as well as in the Apoat rootstock. The results did not show evident signs of incompatibility of tissue reconstruction and formation between the cultivars studied. Index terms: Coffee, grafting, anatomy, Coffea spp.

(Recebido em 7 de julho de 2006 e aprovado em 27 de maro de 2008) INTRODUO A utilizao da enxertia no cafeeiro surgiu em 1887, na Ilha de Java, onde os cafeeiros da espcie C. arabica L., produtores de cafs de fina qualidade, mas suscetveis aos fitonematides, eram enxertados sobre cafeeiros da espcie C. liberica Hiern., uma vez que plantas de C. liberica, apesar de atingidas, resistiam melhor (MENDES, 1938). A enxertia consiste na unio das partes de interesse, at que ocorra a regenerao dos tecidos, permitindo o desenvolvimento das partes unidas como se fossem uma nica planta (SHIMOYA et al., 1968). Conforme Janik (1966), citado por Shimoya et al. (1968), a tcnica fundamental da enxertia consiste na colocao do tecido cambial do cavalo e do cavaleiro em ntima associao, formando uma conexo contnua. Scatena & Scremi-Dias (2000) comentam que o parnquima um tecido constitudo de clulas vivas, potencialmente
1

meristemtico, que conserva sua capacidade de diviso, mesmo aps as clulas estarem completamente diferenciadas, sendo de grande importncia no processo de cicatrizao ou regenerao de leses, como na unio de enxertos ou outras leses mecnicas. Simo (1966), citado por Shimoya et al. (1968), relata o quanto a afinidade anatmica necessria para o perfeito desenvolvimento da planta e, como na enxertia no h intertroca de clulas, cada tecido continua a fabricar as suas. Quando h clulas de tamanho, forma e consistncia distintos, ocorre a incompatibilidade do enxerto e do portaenxerto. Hess (1965), citado por Shimoya et al. (1968), comenta que a formao do tecido de unio da enxertia se d a partir da produo abundante de clulas, principalmente na regio dos raios vasculares (regio do floema). O cavalo produz mais tecido e este no diferenciado inicialmente, sendo denominado de calo.

Engenheiro Agrnomo, Doutor Agricultura Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia Minas Gerais Campus Bambu Fazenda Varginha s/n, Rodovia Bambu-Medeiros, Km 05 38900-000 Bambu, MG dfabio@cefetbambui.edu.br Engenheiro Agrnomo, Doutor em Fitotecnia (Produo Vegetal) Fisiologia Vegetal Universidade Federal de Lavras/UFLA Campus da UFLA Cx. P. 3037 37200-000 Lavras, MG daniel.mec@hotmail.com.br 3 Engenheiro Agrnomo, Doutor Departamento de Agricultura/DAG Universidade Federal de Lavras/UFLA Campus da UFLA Cx. P. 3037 37200-000 Lavras, MG naza@ufla.br 4 Engenheiro Agrnomo, Doutor Agricultura Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia Minas Gerais Campus Bambu Fazenda Varginha s/n, Rodovia Bambu-Medeiros, Km 05 38900-000 Bambu, MG haroldo@cefetbambui.edu.br 5 Engenheiro Agrnomo, Mestrando em Fitotecnia (Produo Vegetal) Departamento de Agricultura/DAG Universidade Federal de Lavras/UFLA Campus da UFLA Cx. P. 3037 37200-000 Lavras, MG carvalho.am@hotmail.com 6 Engenheiro Agrnomo, Doutor em Agronomia/Fitotecnia Centro Tecnolgico do Sul de Minas Empresa de Pesquisa Agropecuria de Minas Gerais/ EPAMIG Campus da UFLA Cx. P. 176 37200-000 Lavras, MG carvalho@epamig.ufla.br
2

Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

736

DIAS, F. P. et al. Departamento de Biologia da Universidade Federal de Lavras (UFLA).O material (caules) das cultivares Topzio MG 1190 e Catuca Amarelo 2SL foram colhidos, fixados e conservados em lcool 70%, no dia da realizao das enxertias e 30, 60 e 90 dias aps a enxertia, coletadas plantas de cada tratamento (enxertados, auto-enxertados e p franco). As sees anatmicas transversais foram realizadas no perodo de outubro de 2004 a fevereiro de 2005, na regio do enxerto, com auxlio de micrtomo manual de mesa, com incluso do caule em medula do pecolo da folha de embaba (ALVARENGA et al., 2002). As sees foram clarificadas em soluo de gua sanitria 50% (hipoclorito de sdio 2%) por um perodo de 8 minutos, seguido de duas lavagens em gua destilada, por 10 minutos cada. Aps a clarificao, as sees foram coradas com azul de astra e safranina (safranina 0,1% em gua e azul de astra 1% em gua, na proporo de 5:95), por 30 segundos e lavados rapidamente em gua destilada. As lminas foram montadas em gua glicerinada (1:1) e observadas em microscpio ptico. J para o preparo das lminas permanentes (sees longitudinais), foi utilizada a tcnica usual de incluso em parafina, conforme Kraus & Arduin (1997). As sees longitudinais foram realizadas no Laboratrio de Anatomia da Madeira do Departamento de Cincias Florestais da UFLA, com auxlio de micrtomo de deslizamento. A desparafinizao foi realizada utilizando duas seqncias de xilol puro, por 15 minutos cada. As lminas com as sees foram colocadas em lcool puro por 30 minutos e coradas com os corantes azul de astra (1% em lcool), por 10 minutos sendo, em seguida, transferidas para safranina (1% em lcool) por 30 segundos (KRAUS & ARDUIN, 1997). As sees foram desidratadas e colocadas em xilol puro, realizando-se imediatamente a montagem das lminas em Blsamo do Canad sinttico, que foram observadas em microscpio tico. As observaes e os registros fotogrficos foram realizados em fotomicroscpio Olympus, modelo BX 60, do Laboratrio de Citogentica do Departamento de Biologia da UFLA. RESULTADOS E DISCUSSO Na Figura 1 so apresentadas as sees transversais dos caules das duas cultivares de C. arabica (Catuca Amarelo e Topzio), 4 a 5 cm abaixo do cotildone e do porta-enxerto Apoat (C. canephora), 4 a 5 cm cima do colo, conforme metodologia proposta por Souza et al.

Quando os tecidos calosos do cavalo e do cavaleiro se encontram, ocorre a soldadura. Nessa unio parcial, j ocorre passagem de gua e nutrientes de um para o outro, iniciando o mecanismo de pega. Diante disso, formao do tecido caloso de grande importncia e particularmente os tecidos vasculares e parnquimas devem exercer a principal funo de unio das partes de interesse. Estrada-Luna et al. (2002), estudando a histologia de microenxertia em espcies de cactus (Opuntia spp.), descreveram que, nas primeiras horas aps a enxertia, j havia evidncia de atividade do cmbio. Nos primeiros quatro dias aps a enxertia, observaram as primeiras evidncias de diviso celular a partir de clulas parenquimatosas de calos nas regies da enxertia. A incompatibilidade um dos principais fatores que afetam o pegamento do enxerto. Duas plantas so consideradas incompatveis quando no formam, entre as partes enxertadas, uma unio perfeita. Entre os principais sintomas de incompatibilidade, podem ser citados: falta de unio entre o enxerto e o porta-enxerto, diferenas entre o dimetro das duas plantas, amarelecimento e desfolha do enxerto, pouco crescimento vegetativo e diferenas na consistncia ou na afinidade dos tecidos (HOFFMANN et al., 1996). Pina & Errea (2005) comentam que o mecanismo de incompatibilidade de enxertos no completamente entendido e muitos trabalhos recorrem s causas citolgicas e bioqumicas como resposta. No entanto, esses autores comentam que a formao de calo pode ser uma resposta passiva a um ferimento proporcionado pelo processo de enxertia, no implicando em compatibilidade futura. Em culturas, como na videira, Hatmann & Kester (1990), citados por Pauletto et al. (2001), comentam que o porta-enxerto influencia no crescimento vegetativo, na produo e na qualidade do cacho, e responde diferentemente de acordo com a copa sobre ele enxertada. No cafeeiro, a enxertia j uma tcnica bastante utilizada, principalmente para reas infestadas com nematides (DIAS et al, 2008). Pesquisas bsicas, como o conhecimento das caractersticas anatmicas, so importantes para melhor compreenso do comportamento dessas plantas no campo, por se tratar da utilizao de duas espcies distintas (C. arbica L. enxertada sobre C. canephora Pierre ex Froehn.). Diante disso, conduziu-se este trabalho, com o objetivo de avaliar as caractersticas anatmicas do caule de cafeeiros enxertados em Apoat IAC 2258. MATERIAL E MTODOS As anlises anatmicas das plantas de cafeeiro foram feitas no Laboratrio de Anatomia Vegetal do Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

Estudo anatmico de cafeeiros enxertados (2002). Na regio caulinar, onde realizado o enxerto, nota-se bastante semelhana entre os tecidos vasculares das cultivares de C. arabica, mas, na cultivar Apoat, parece haver maior dimetro do sistema vascular. Essa diferena pode estar relacionada a alguns fatores, como, a defasagem da poca de semeadura adotada (12 dias), para que, no momento da enxertia, todas as plntulas estivessem num mesmo estdio de desenvolvimento (palito de fsforo), a localizao das sees ao longo do caule, bem como provveis diferenas anatmicas das duas espcies. Souza et al. (2002) comentam que, conforme a temperatura, as sementes de Apoat podem ser semeadas at 15 dias antes das sementes de C. arabica, para que, no momento da enxertia, ambas estejam no mesmo estdio de desenvolvimento. necessrio saber se, apesar de estarem num mesmo estdio de desenvolvimento, as caractersticas anatmicas, principalmente dos tecidos vasculares, so as mesmas. Em uma enxertia, importante o maior contato possvel entre as regies cambiais das duas plantas. Sendo assim, a defasagem cronolgica deve ocorrer, principalmente, para uniformizar as regies cambiais das duas espcies, fazendo com que coincidam ao mximo possvel no momento da enxertia. Portanto, estudos anatmicos na regio da enxertia das cultivares de cafeeiro associados poca de semeadura devem ser realizados, visando a conhecer o dimetro mdio dos tecidos vasculares e a regio cambial das plantas utilizadas.

737

Na Figura 2, so apresentados as sees das plantas enxertadas sobre o porta-enxerto Apoat e autoenxertadas, 30 dias aps a enxertia. Observa-se a juno das partes, caracterizando a cicatrizao da regio da enxertia. O preenchimento dos espaos por clulas parenquimatosas (calo) observado em todas as sees. Shimoya et al. (1968) comentam que o tecido parenquimatoso exerce papel importante, uma vez que ele promove a primeira ligao ou soldadura. Dessa forma, quanto maior a superfcie de contato de parnquima de ambas as partes, maior ser o xito da operao. Esses mesmos autores comentam que em citros o fenmeno de pega possvel que ocorra no primeiro dia, uma vez que no observada a formao de tecido caloso e a soldadura se inicia pela periferia e se estende para o centro. Observa-se, nas Figuras 2 e 3, que a soldadura da enxertia no cafeeiro se inicia do centro, prximo aos tecidos condutores e se expande periferia. Quando no ocorre uma perfeita justaposio do enxerto com o porta-enxerto, observa-se um desenvolvimento exagerado do parnquima cortical do enxerto para alcanar a superfcie do portaenxerto. Na Figura 3, observa-se o preenchimento dos espaos por calo parenquimatoso e o incio da reconstituio do xilema, 30 dias aps a enxertia. Isso tambm foi observado em outras sees, tanto de enxertados, quanto de auto-enxertados.

A) Topzio

C) Catuca

E) Apoat

B) Topzio

D) Catuca Amarelo

F) Apoat

Figura 1 Sees transversais dos caules das cultivares Topzio, Catuca Amarelo e Apoat no dia da enxertia. Barra = 200m. Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

738 A) Catuca enxertado

DIAS, F. P. et al. B) Topzio enxertado

C) Apoat auto-enxertado

D) Topzio auto-enxertado

E) Catuca auto-enxertado

Figura 2 Sees transversais de caules de cafeeiro enxertados e auto-enxertados, aos 30 dias; seta = parnquima (calo) preenchendo espaos. Barra = 200m.

Figura 3 Seo transversal do caule de cafeeiro, cultivar Catuca Amarelo enxertada em Apoat aos 30 dias, mostrando preenchimento dos espaos por calo parenquimatoso (c) e a reconstituio do xilema (x). Barra = 200m. Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

Estudo anatmico de cafeeiros enxertados Luna et al. (2002), estudando a histologia de microenxertia em espcies de cactus (Opuntia spp.), descreveram a ocorrncia de calos a partir de clulas parenquimatosas das regies da enxertia. Aos 28 dias aps a enxertia, todos os espaos j estavam preenchidos e os novos tecidos vasculares j estavam restaurados. Resultados semelhantes so observados nas Figuras 3 e 4, em que nas cultivares Catuca e Topzio enxertadas, e principalmente em Apoat auto-enxertada, aos 30 dias aps a enxertia, j se verifica o preenchimento dos espaos vazios e o incio de formao dos tecidos vasculares. Na Figura 4, so mostradas as sees transversais de caules das plantas enxertadas, aos 60 e 90 dias aps a enxertia (DAE). Observa-se que o tecido vascular do porta-enxerto que no fica em contato com o da copa desenvolve-se mais lentamente (seta). Tambm na Figura 4, cultivar Topzio, 60 DAE, observase uma melhor juno dos tecidos vasculares das duas plantas.

739

Na Figura 5 (A e B), observa-se que a juno ocorreu de forma desorganizada, onde os tecidos vasculares das plantas no coincidiram. provvel que este fato possa influenciar no desenvolvimento normal da planta, pois, um atraso na reconstituio dos tecidos vasculares pode afetar outros fatores, como a translocao de gua e nutrientes do porta-enxerto para o enxerto e de fotoassimilados da copa para o porta-enxerto. Na prtica, no momento da enxertia, no existe preocupao com o posicionamento dos caules das duas plantas, nem com a juno dos tecidos vasculares na base da enxertia, sendo esse o principal local onde ocorre a unio. Isso ocorre, talvez, porque a porcentagem de pegamento elevada (prxima a 100%) semelhante obtida por Souza et al. (2002). Tambm na Figura 5, observa-se a formao de razes adventcias a partir da copa. Essas observaes so semelhantes s descritas por Jesus (2003), que estudou a propagao vegetativa de cafeeiros por meio do enraizamento de estacas.

A) Topzio enxertado 60 DAE

A) Topzio enxertado 90 DAE

C) Catuca enxertado 60 DAE

C) Catuca enxertado 90 DAE

Figura 4 Sees transversais de caules de cafeeiro enxertados, 60 e 90 dias aps a enxertia (DAE), e o tecido vascular do porta-enxerto pouco desenvolvido (seta). Barra = 200 m. Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

740

DIAS, F. P. et al. em contato com o substrato. O contato do substrato com a regio da enxertia induz a formao de razes adventcias, sendo que a copa comporta-se como uma estaca colocada para enraizar. Na Figura 6, observa-se uma muda de cafeeiro cultivar Topzio, enxertada em porta-enxerto Apoat, com razes adventcias bem desenvolvidas, formadas a partir da parte enxertada (copa).

Souza et al. (2002) comentam que os cortes do caule do porta-enxerto muito prximos do colo podem ocasionar a emisso de razes do enxerto. Nesse experimento, a formao de razes adventcias foi observada tanto nas mudas enxertadas quanto nas auto-enxertadas, independentemente da cultivar, tendo esta caracterstica, aparentemente, sido influenciada, principalmente, pela proximidade da regio da enxertia ao colo do porta-enxerto,

A) Topzio auto-enxertada 60 DAE

B) Apoat auto-enxertada 30 DAE

Figura 5 Seo transversal do caule das cultivares Topzio e Apoat, auto-enxertadas, onde os tecidos vasculares da copa no coincidiram com os do porta-enxerto, e a formao de razes adventcias da copa (r). Barra = 200m.

Figura 6 Muda de cafeeiro cultivar Topzio, enxertada em porta-enxerto Apoat, com razes adventcias formadas a partir da copa (r) e a zona da enxertia (z). Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

Estudo anatmico de cafeeiros enxertados Essa caracterstica indesejvel no caso do cafeeiro, uma vez que se busca, com a enxertia, um sistema radicular resistente aos fitonematides e, dessa forma, uma parte do mesmo seria susceptvel. Na Figura 7 observa-se uma juno das duas partes aos 90 dias aps a enxertia, coincidindo os tecidos vasculares do enxerto com o do porta-enxerto. Nota-se a grande quantidade de tecidos vasculares j formados em especial de xilema (em vermelho). Uma amostra do que ocorre ao longo da regio da enxertia pode ser vista na Figura 8, que mostra os cortes longitudinais das plantas enxertadas aos 30 e 60 dias aps a enxertia. Nota-se que, aos 30 dias aps a enxertia, ainda existem muitos espaos vazios na regio da enxertia (setas), que diminuem consideravelmente aos 60 dias aps a enxertia. Pode-se observar que a primeira parte da enxertia a iniciar a produo de tecidos, unindo as plantas, localizase na base. Portanto, no momento da enxertia, importante que o pice da cunha da copa seja encaixado at o final do corte realizado no porta-enxerto, obtendo um maior contato dos tecidos na regio basal do enxerto, aumentando, com isso, a probabilidade de sucesso do enxerto. Aparentemente, a enxertia de C. arabica sobre Apoat IAC 2258 (C. canephora) no apresenta sinais evidentes de incompatibilidade de reconstituio e formao de tecidos. As seqncias dos eventos estruturais que ocorrem durante o pegamento do enxerto, de foram geral, so semelhantes s descritas por Hartmann et al. (2002).

741

Figura 8 Sees longitudinais do caule de Catuca Amarelo enxertados no porta-enxerto Apoat, 30 e 60 DAE, mostrando espaos vazios (setas) e a regio basal do enxerto (b). Barra = 200m. Novas pesquisas devem ser realizadas com o objetivo de determinar outros tipos de incompatibilidade que podem estar afetando o desenvolvimento das plantas enxertadas, tais como: anlises qumicas dos tecidos; caractersticas anatmicas da regio da enxertia, considerando a poca de semeadura e o local de sees dos tecidos; capacidade das plantas enxertadas de absorver, translocar e assimilar gua, nutrientes e fotoassimilados, e outros. importante conhecer esses fatores, para que, em um programa de melhoramento, o objetivo principal no seja apenas selecionar portaenxertos tolerantes aos fitonematides, mas que apresentem outras caractersticas como um sistema radicular mais vigoroso e que sejam compatveis com as plantas de C. arabica, recomendando, dessa forma, essa tcnica para reas infestadas ou no por fitonematides. CONCLUSO

Figura 7 Seo transversal do caule da cultivar Catuca Amarelo enxertada, mostrando a unio dos tecidos vasculares, 90 dias aps a enxertia. Barra = 200m. UFLA, Lavras, MG, 2006.

Considerando as cultivares e as caractersticas anatmicas avaliadas, conclui-se que: - no se constata sinais de incompatibilidade anatmica entre as cultivares avaliadas e o porta-enxerto Apoat IAC 2258. Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009

742 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

DIAS, F. P. et al. KRAUS; ARDUIN. Manual bsico de mtodos em morfologia vegetal. Seropdia: Edeir, 1997. 198 p. MENDES, J. E. T. A enxertia do cafeeiro I. So Paulo: Instituto Agronmico de Campinas, 1938. 18 p. (Boletim tcnico, 39). PAULETTO, D.; ALVES FILHO, F. de A.; KLUGE, R. A.; SANTOS FILHO, J. A. Efeito do porta-enxerto na qualidade do cacho da videira Nigara Rosada. Pesquisa Agropecuria Brasileira, Braslia, v. 36, n. 7, p. 935-939, jul. 2001. PINA, A.; ERREA, P. A review of new advances in mechanism of compatibility incompatibility. Scientia Horticulturae, Amsterdam, v. 106, n. 1, p. 1-11, Aug. 2005. SCATENA, V. L.; SCREMIN-DIAS, E. Parnquima, colnquima e esclernquima. In: APPEZATTO, D. A.; GLRIA, B.; GUERREIRO, S. M. C. (Eds.). Anatomia vegetal. Viosa: UFV, 2003. SHIMOYA, C.; GOMIDE, C. J.; FONTES, J. M. Estudo anatmico da enxertia em Citrus spp. Revista Ceres, Viosa, v. 15, n. 84, p. 95-105, jul./ago. 1968. SOUZA, C. A. S.; OLIVEIRA, A. L. de; GUIMARES, R. J.; DIAS, F. P.; MOURA, C. A. Produo de mudas de cafeeiro enxertados. Lavras: UFLA, 2002. No paginado.

ALVARENGA, A. A. de; ALVES, J. D.; DAVIDE, L. C.; PEREIRA, I. A. M. Instrumentao aplicada biologia. Lavras: UFLA/FAEPE, 2002. 96 p. DIAS, F. P.; MENDES, A. N. G.; VALLONE, H. S.; CARVALHO, A. M. DE; CARVALHO, S. P. DE. Desenvolvimento de cafeeiros enxertados APOAT IAC 2258 cultivados em recipiente de 250 litros. Cincia e Agrotecnologia, v.32, n.2, p.385-390, mar./abr., 2008. ESTRADA-LUNA, A. A.; LOPES-PERALTA, C.; CARDENAS-SORIANO, E. In vitro micrografting and histology of graft union formation of selected species of prickly pear cactus (Opuntia spp.). Scientia Horticultureae, Amsterdam, v. 92, n. 3/4, p. 317-327, Feb. 2002. HARTMANN, H. T.; KESTER, D. E.; DAVIES, F. T.; GENEVE, R. L. Plant propagation: principles and practices. 7. ed. Upper Sanddle River: Prentice Hall, 2002. 849 p. HOFFMANN, A.; CHALFUN, N. N. J.; ANTUNES, L. E. C.; RAMOS, J. D.; PASQUAL, M.; SILVA, C. R. de R. Propagao de plantas frutferas. Lavras: UFLA, 1996. 319 p. JESUS, A. M. S. Propagao vegetativa do cafeeiro (Coffea arabica L.). 2003. 173 p. Tese (Doutorado) Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2003.

Cinc. agrotec., Lavras, v. 33, n. 3, p. 735-742, maio/jun., 2009