INTRODUO Piruvato Quinase catalisa a converso de fosfoenolpiruvato e ADP em piruvato e ATP.

A enzima, que aparece em todas as clulas vivas, a chave para a rota do metabolismo de carboidratos. A deficincia de Piruvato Quinase, apenas provoca alteraes nas hemcias, porque essas clulas no so capazes de compensar a enzima defeituosa. Portanto, a deficincia desta enzima uma das principais causas da anemia hemoltica que pode causar a morte dos pacientes. 1. Os Eritrcitos Os eritrcitos, tambm designados por glbulos vermelhos, so o tipo de clulas sanguneas mais abundantes e so, nos vertebrados, o principal meio de transporte de oxignio dos pulmes at aos tecidos celulares. Nos mamferos, so clulas bicncavas e anucleadas (no possuindo, como tal, DNA) no apresentando tambm mais nenhuma organela (nem mesmo mitocndrias, sendo que produzem energia atravs da fermentao ou da gliclise seguida da produo de cido lctico). Os eritrcitos consistem maioritariamente em hemoglobina, uma molcula complexa que contm grupos heme (que conferem a estas clulas a sua cor avermelhada), cujos tomos de ferro se ligam temporariamente a molculas de oxignio, nos pulmes, e os liberam nos diversos tecidos do corpo. A hemoglobina transporta tambm CO2 proveniente dos tecidos. A membrana dos eritrcitos apresenta uma estrutura semelhante de outras membranas celulares. uma estrutura altamente organizada, constituda por uma bicamada fosfolipdica, onde se encontram vrios tipos de protenas transmembranares, como as glicoprotenas, em particular a glicoforina, e as protenas transportadoras. Como em outras membranas celulares, as partes hidrofbicas apontam para o centro, onde se associam ao colesterol no esterificado, e as extremidades polares das molculas fosfolipdicas atuam sobre a protena que as cobre. Em particular, na parte externa da membrana existe uma camada complementar rica em mucopolissacridos, e na face intracelular existe uma malha fibrilar proteica, hexagonal, responsvel pela sustentao e pela flexibilidade da membrana. A membrana dos glbulos vermelhos permevel a diversas substncias lipossolveis, a pequenas molculas, gua e a nions. Por outro lado,

 impermevel s protenas do plasma e, como seria de esperar, hemoglobina (cuja sada se traduz numa grave leso membranar). Para manter as condies essenciais para o seu funcionamento, o glbulo vermelho tem que evitar que se d a oxidao de determinados constituintes (como o ferro e a globina), por meio de vrios sistemas redutores, e a hiper-hidratao, evitada atravs das bombas de sdio-potssio. Como j foi referido, o metabolismo nos eritrcitos est dependente do constante fornecimento de glicose do plasma sanguneo. Esta entra no eritrcito, por difuso facilitada, atravs de um transportador especfico de glicose, a uma velocidade 50 000 vezes superior quela que se verificaria se este processo no fosse catalisado. O transportador de glicose, denominado GLUT1, uma protena membranar, especfica para a D-glicose, constituda por 12 segmentos hidrofbicos. Apesar de no se conhecer na ntegra a estrutura desta protena, supe-se que seja capaz de estabelecer ligaes de hidrognio com a glicose, medida que esta se desloca atravs do canal transmembranar. Os eritrcitos contm ainda outro sistema de difuso facilitada um mecanismo de trocas aninicas que essencial ao transporte de CO2 proveniente dos tecidos. Este entra no eritrcito onde convertido em bicarbonato (HCO3) pela enzima anidrase carbnica. Este regressa ento ao plasma para ser transportado at aos pulmes. Uma vez que o HCO 3- consideravelmente mais solvel no plasma do que do que o CO2, a capacidade do sangue de transportar dixido de carbono bastante aumentada. Nos pulmes, o bicarbonato reentra nos eritrcitos onde convertido em CO2, que posteriormente libertado nos pulmes e finalmente exalado. 2. Anemia Hemoltica Anemia hemoltica uma anemia devido hemlise, a quebra anormal de hemcias nos vasos sanguneos (hemlise intravascular) ou em outro lugar do corpo (extravascular). Ela possui diversas causas, podendo ser inofensiva ou at mesmo ameaar a vida. A classificao geral da anemia hemoltica a de sua origem se adquirida ou idioptica. O tratamento depende da causa e natureza da quebra das hemcias. A Anemia Hemoltica pode ser congnita ou adquirida.

Congnita Anormalidades da membrana Hemoglobinopatias Deficincia enzimtica

Adquirida Induzida por anticorpos (auto-imune) Reao transfusional Fragmentao mecnica

3. A Piruvato Quinase Em bioqumica, uma cinase ou quinase, um tipo de enzima que transfere grupos fosfatos de molculas doadoras de alta energia (como o ATP) para molculas-alvo especficas (substratos). Todas as cinases necessitam de um on
metlico divalente como o Mg2+ ou o Mn2+ para transferir o grupo fosfato, e o processo,

onde estas enzimas atuam, tem o nome de fosforilao.

A Piruvato Quinase (EC: 2.7.1.40) uma enzima envolvida na gliclise. Catalisa a transferncia de um grupo fosfato do fosfoenolpiruvato (PEP) para ADP, produzindo uma molcula de piruvato e uma molcula de ATP (Fig 1).

Fig.1 Reao catalizada pela Piruvato Quinase

Uma protena-cinase catalisa a reao de adio desse grupamento fosfato e essa reao unidirecional, com o ATP sendo quebrado para produzir a energia necessria para a reao.

As clulas contm vrias protenas-cinases cada uma sendo responsvel por agir em um determinado grupo ou uma determinada protena. 4. Deficiencia de Piruvato Quinase e Anemia Hemoltica Os glbulos vermelhos so clulas sanguneas que alm de transportar oxignio dos pulmes para os tecidos, realizada tambm outras funes importantes e, portanto, contm vrias catablitos e enzimas. Embora os eritrcitos maduros no tenham ncleo, mitocndrias, ou retculo endoplasmtico e, portanto, no podem sintetizar protenas, glicognio, lipdios, ou realizar a fosforilao oxidativa, estes mesmo ausentes de organelas, so capazes de metabolizar a glicose e outros monossacardeos para obteno de energia. Conseqentemente, o metabolismo, muito reduzido, limitado a gliclise, via das pentoses fosfato, ciclo 2,3bisfosfoglicerato, reaes redox para desintoxicao substncias oxidantes e certos aspectos do metabolismo de nucleotdeos (Fig.2). Estas vias e as reaes so precisamente aqueles necessrios para manter necessidades metablicas durante a sua vida e sintetizar ATP celular e NADPH. A Gliclise comea com a adio de monossacardeos a clula, a glicose-6-fosfato formada isomerizada a frutose-6fosfato, por isomerase fosfohexosa, iniciando a seqncia de reaes caractersticas da gliclise para a formao de lactato como um produto final. O Controle da gliclise no eritrcito exercido atravs da ao de vrios metablitos sobre as trs enzimas que catalisam reaes irreversveis. O mais importante efeito da concentrao de ATP que, ao ultrapassar certos nveis, inibe a atividade da fosfofrutoquinase e piruvato quinase. Na via glicoltica de eritrcitos existe um desvio a nivel de 1,3 bisfosfoglicerato, a partir desta substncia, por ao, da bisfosfoglicerato mutase, se produz 2,3-bisfosfoglicerato. A enzima 3fosfoglicerato exigida como cofactor inibida pelo prprio produto da reao, 2,3bisfosfoglicerato. O 2,3-bisfosfoglicerato desempenha um papel essencial na regulao da afinidade da hemoglobina pelo oxignio nos tecidos

Fig. 2 Vias metablicas dos eritrcitos

Anemias hemolticas so causadas por diversas alteraes nos eritrcitos, muitas das quais so hereditrios. As clulas que apresentam fragilidade se quebram ao passar pelos capilares. s vezes, o nmero de eritrcitos formados so normais ou mesmo superiores, mas sua vida to curta que desencadeia uma anemia grave. Entre as anemias hemoltica mais frequentes encontra-se as enzimopatias eritrciarias, que se desenvolvem devido a deficincia em algumas das enzimas do metabolismo intermedirio dos eritrcitos, normalmente metabolismo da glicose. Os eritrcitos durante toda a sua vida faz cerca de meio milho de ciclos, eles exigem um fornecimento contnuo de equivalentes de ATP e redox, para amanter sua estrutura bicncava, as concentraes intracelulares catinicos, o

perfeito funcionamento da membrana e manter o estado reduzido dos ons ferro da hemoglobina.

Fig 3 Esquema das necessidades energticas do eritrcito

Consequncias da deficincia da Piruvato Quinase:

Diminuio drstica na produo de ATP; Aumento da concentrao de PEP; Aumento da concentrao de todos os metabolitos da rota, Altas concentraes da 2,3-bisfosfoglicerato causam efeitos deletrios, Agravante da anemia hemoltica em indivduos PK deficintes,

particilarmente da 2,3 bisfofoglicerato e 3-fosfoglicerato; inibindo outras enzimas que limitam o fluxo metablico da via glicoltica principalmente em perodos de infeco ou estresse metablico.

5. Tratamentos A deficincia de piruvato quinase a segunda causa mais comum de anemia hemoltica (perdendo apenas para a deficincia da glicose-6-fosfatodesidrogenase). O tratamento pode envolver desde a remoo cirrgica do bao, administrao de corticosteride como a prednisona ou drogas imunossupressoras como a ciclosporina e ciclofosfamida. A forma mais grave da doena requer transfuses regulares de eritrcitos.

Referencias PERTIERRA, A. G. CRUZ, J.M.; Deficiencias en piruvato quinasa y anemias hemolticas. Anal. Real Acad. Nal. Farm. , Madri, 2003, p. 103-144 Bioquimica ilustrada leningue