UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS QUMICA DE ALIMENTOS TOXICOLOGA DE ALIMENTOS LABORAORIO N5 CUANTIFICACIN DE UN TXICO VOLATIL

(CIANURO DE HIDRGENO )EN GLUCSIDOS CIANOGNICOS DOCENTE: ALIX EUGENIA DALLOS BEZ. I. OBJETIVO Determinar la cantidad de cianuro de hidrgeno liberado a partir de glucsidos cianognicos presentes en muestras de plantas y semillas que forman parte de la dieta de humanos y animales y relacionar la concentracin con su potencial toxicolgico. II. INTRODUCCIN Los glucsidos cianognicos son compuestos que producen cido cianhdrico ( HCN ) por tratamiento cido o mediante hidrlisis enzimtica. Estn presentes tanto en el reino animal como vegetal en donde se encuentran ampliamente distribuidos. Se han identificado en aproximadamente 2.000 especies de plantas superiores pertenecientes a 110 familias distintas de angiospermas gimnospermas o helechos ( Poulton, 1983; Deshpande y Sathe, 1991). Las familias ms importantes por su capacidad cianognica son las siguientes: Rosaceae (150 especies , Leguminosae ( 125 ), Graminae ( 100 ), Araceae ( 50 ), Compositae ( 50 ), Euphorbiacedae (50), y Passifloraceae ( 30 ). Algunos de estos glucsidos estn constituidos por alfa-hidroxinitrilos (aglucn), unidos a travs de un enlace beta a un carbohidrato, que puede ser un monosacrido o un disacrido. Al hidrolizar estos compuestos, se obtiene, entre otros productos, cido cianhdrico. Dicho proceso requiere de la presencia de la enzima alfa-glucosidasa, que rompe el enlace glucosdico, y de la enzima hidroxinitriliasa, que libera el cido cianhdrico. Estas enzimas se encuentran presentes en la misma planta y actan sobre los glucsidos, cuando la planta sufre ruptura de tejidos debido a daos mecnicos. La importancia de estos compuestos desde el punto de vista toxicolgico radica en que se encuentran presentes en diferentes concentraciones, en vegetales que forman parte de la dieta de humanos y animales. Los estudios realizados en algunos alimentos, han permitido detectar glucsidos cianognicos tales como: Faseolina, Amigdalina, durrina y linamarina. Entre los alimentos que los contienen se encuentran leguminosas, varios tipos de frjol, tubrculos como la casava, cereales como el sorgo y semillas de algunas frutas cmo limn, lima manzana, pera, cereza, durazno, albaricoque y ciruela. III. FUNDAMENTO

Se emplear la reaccin sensible y especfica de Guignard, la cual es ampliamente utilizada en pruebas cualitativas para la deteccin de HCN como de glucsidos cianognicos; sin embargo con el uso de una curva estndar de cianuro alcalino, se podra realizar dicha prueba en forma cuantitativa, expresndose como base en cido cianhdrico liberado. IV. MATERIAL: Tubos de ensayo con tapn, Cajas Petri.

Tubos de ensayo con tapn Cajas Petri Papel de filtro cualitativo (filtracin rpida) 2X10 cm. Tijeras, pinzas de diseccin y regla o escuadra graduada. Erlenmeyer de 250 ml. Mortero con pistilo. Navaja. Pipeta de 2 ml. Probeta de 50 ml. Matraces de 10 ml. Celdas de 1 cm de dimetro. EPP. Hielo. MUESTRAS; Semillas de durazno, manzana roja, ciruela pasa, sorgo, lima, almendra, germen de soya. REACTIVOS: cido clorhdrico concentrado, cido pcrico, carbonato de sodio, cloroformo, cianuro de potasio y agua destilada. EQUIPO : Espectrofotmetro o fotocolormetro, balanza analtica y estufa o incubadora. IV.b. PRECAUCIN: ALTAMENTE TXICO, PREPARAR Y MANEJAR CON GUANTES (SOLUCIN ESTNDAR II ). IV.c. SEGURIDAD: A pesar de que la concentracin utilizada de KCN es de aproximadamente 0,24 mg/ml, y esta concentracin est por debajo de la DL50 en ratones, no deber descuidar las medidas de seguridad para su trabajo. IVd. MANEJO DE RESIDUOS: Los residuos de las soluciones que contiene KCN no debern ser tiradas al drenaja directamente, recolectarlas en frascos y etiquetarlas. IV.e. TRATAMIENTO DE RESIDUOS DE SOLUCIONES QUE CONTIENE KCN: Colocarlas en hielo y adicionar lentamente una solucin de hipoclorito de sodio, dejarlas reposar por 24 horas y posteriormente se pueden desechar por el sifn lavando con abundante agua de chorro. IV. DESARROLLO DEL MTODO Trabaje tres muestras de semillas o plantas segn la lista mencionada. V.a.PREPARACIN DE LA TIRA REACTIVA: Cortar papel filtro en tiras exactamente de 2X10 (preparar una tira por muestra)