Você está na página 1de 44

Apoptose

Apoptose, voc disse? por isso que eu no estou me sentindo muito bem...

Unidade Curricular de Biologia Celular UNIFESP Campus Diadema

Definio de morte celular programada


Morte celular programada (PCD) ou apoptose um mecanismo importante de remoo de clulas: que no so mais necessrias que esto em excesso (neurnios durante o desenvolvimento) infectadas por vrus transformadas (cncer) com danos ao seu material gentico

Tem fundamental importncia no desenvolvimento embrionrio e na homeostase de tecidos em organismos adultos.


Caracteriza-se pela ativao de um mecanismo de suicdio celular morfologicamente diferente do processo de necrose. Ocorre em todos organismos multicelulares. H indcios de ocorrncia de uma verso simplificada de morte celular programada tambm em leveduras, Leishmania,Trypanosoma e Plasmodium falciparum

Apoptose e Desenvolvimento
Muitas outras estruturas so perdidas durante o desenvolvimento num processo de remodelagem do organismo: Em humanos, a estrutura que d origem ao tero (duto de Mllerian) perdida no homem. Por outro lado, a estrutura que d origem ao rgos reprodutores masculinos (duto de Wolffian) perdida na mulher. No desenvolvimento embrionrio inicial de vertebrados ocorre a formao de tbulos prnefrticos que do origem aos rins de peixes e anfbios, que so perdidos em mamferos. No desenvolvimento do sistema nervoso central, metade dos neurnios e clulas da glia que surgem so destinados a morrer por apoptose. Apenas neurnios que estabeleceram conexes sinpticas, tornando-se capazes de receber fatores de crescimento, sobrevivem.

Histrico
1858: O patologista alemo Rudolf Virchow descreveu as mudanas progressivas que ocorrem nos tecidos logo aps a morte e foi o primeiro a descrever dois tipos diferentes de morte celular. Chamou o fenmeno de necrobiose. 1951: A. Glucksmann foi o primeiro a observar morte celular durante o desenvolvimento embrionrio. 1972: John Kerr, Andrew Wyllie e A.R. Currie: generalizao da idia que a morte celular programada consiste de um processo ordenado. Foram os primeiros a se dar conta das implicaes do processo de morte celular programada em biologia celular e em doenas. Surgimento do termo apoptose.

1976: John E. Sulston e H. Robert Horvitz deram incio aos estudos genticos da apoptose utilizando o nemtoda Caernohabditis elegans como modelo (previamente descrito por Sydney Brenner). Demonstraram que aproximadamente 13% das clulas somticas no embrio deste organismo morrem logo depois de seu aparecimento. 1986: H. Robert Horvitz identificou os dois primeiros genes relacionados apoptose, Ced-3 e Ced-4, respectivamente Apaf-1 e caspase-3 em mamferos.

Histrico
Prmio Nobel de Medicina, 2002: por suas descobertas relativas regulao gentica do desenvolvimento de rgos e da morte celular programada Sydney Brenner The Molecular Sciences Institute Berkeley, CA, USA

H. Robert Horvitz Massachusetts Institute of Technology (MIT) Cambridge, MA, USA

John E. Sulston The Wellcome Trust Sanger Institute Cambridge, United Kingdom

Viso Geral da Apoptose


1 fase - Induo: via receptor ou danos ao DNA, p.e. 2 fase - Resposta intracelular : sinalizao celular 3 fase - Fase efetora: Alteraes morfolgicas e bioqumicas caractersticas

Apoptose x Necrose
Apoptose Processo ativo
Murchamento da clula Condensao da cromatina Clivagem internucleossmica do DNA (fragmentos de 180 kDa) Alteraes mitocondriais, queda do potencial transmembrnico Membrana plasmtica intacta Fagocitose dos restos celulares (corpos apoptticos) Ausncia de resposta inflamatria

Necrose
Processo passivo Inchamento da clula Clivagem aleatria do DNA Ruptura da membrana plasmtica Resposta inflamatria

Apoptose

Necrose

Indutores de Apoptose
Mediados por receptores
CD95L/FasL, TNF

Agentes qumicos
Estaurosporina, etoposdeo, curcumina

Agentes que causam danos ao DNA


Radiao ionizante, radiao UV, quimioterpicos contra cncer

Outros: retirada de fatores de


crescimento, perforina/granzima B, espcies reativas de oxignio (EROs)

Controle do processo de apoptose

Papel da protena p53 em apoptose


p53, atravs dos pontos de checagem de danos ao DNA, induz a parada do ciclo celular para reparo do DNA lesado. Isto se d pela estabilizao de p53 que tem seus nveis dramaticamente aumentados aps danos ao DNA. Se os danos ao DNA so muito extensos e os mecanismos de reparo no podem revertlos, p53 sinaliza para induo de apoptose.
OF APOPTOTIC GENES

Esta sinalizao ocorre, na maior parte dos casos, devido ativao transcricional pelo p53 de protenas envolvidas em apoptose, como Bax, Fas, Killer/DR5 e APAF-1 (fator de ativao de protease apopttica), entre outros.

Papel da protena p53 em apoptose

Radiao UV

Dano reparado (Clula sobrevive)

Dano excessivo

Apoptose

Cncer

Principais protenas efetoras na apoptose: caspases


Proteases expressas como precursores inativas (pro-caspases) que so ativadas por clivagem auto-cataltica ou por outras proteases.

Clivam protenas aps resduos de cido asprtico.


Atuam em cascata, ou seja, uma caspase, aps ativada, ativa outras. Dividem-se em caspases iniciadoras (caspases 8 e 9), e efetoras (caspase, 3, 6 e 7)

Protenas alvo de degradao por caspases


Complexos ciclinas-Cdk parada do ciclo celular. Laminas desestruturao da membrana nuclear. Actina membrana comea a sofrer invaginaes. ICAD (inibidor da nuclease CAD, DNAse ativada por caspase) fragmentao do DNA.

Protenas que regulam a apoptose


Famlia Bcl-2: protenas citoslicas ou localizadas na membrana mitocondrial. Dividem-se em pr-apoptticas (Bax, Bad, Bid) e antiapoptticas (Bcl-2, Bcl-XL). IAPs: inibidores de apoptose que impedem a ativao ou inativam caspases.

Vias extrnseca e intrnseca para a induo de apoptose

Protenas da famlia Bcl-2 controlam a translocao do citocromo-c

Bax formam homo-dmeros na presena de sinais apoptticos. Estes homodmeros promovem a abertura de um canal que controla a translocao de citocromo c do espao intramembrana da mitocondria.

citoplasma

Espao intramembrana

Bcl-2 interfere com a funo de Bax formando heterodmeros com Bax. Isso leva ao fechamento do canal e inibio da translocao de citocromo c.

Translocao do citocromo c inicia a cascata das caspases cascade

No citosol, citocromo c se liga a Apaf-1 para formar o apoptosome O apoptosome recruta procaspase 9 que induz a ativao da caspase 9

Apaf-1

Cyt. c

Caspase 9 ativa ento as caspases executoras 3, 6, 7


Procaspase 9

Caspase 9

Apoptosome
Procaspase 3

Caspase 3

BAD

Bcl-2

Apoptose Apaf-1 Pr-Caspase-9


Caspases executoras

ligante Receptores de morte Protenas adaptadoras Caspase 8

Caspase 3 Lamin, ativao de CAD, Degradao da actina, Molculas de adeso, etc

procaspase 3

caspase 3

Vias extrnsicas e intrnsicas convergem para as caspases executoras


ligante Receptores de morte FADD/DISC Caspase 8, Caspase 3 Lamin, CAD,actina, Molculas de adeso, etc Sinais apoptticos intrnsicos

Protenas Pro-apoptoticas
Translocao do Citochrome c Apoptosome (Apaf-1/cit.c) Caspase 9

Apoptose e Doenas - Cncer


O cncer resulta de um processo desordenado de proliferao celular. o resultado de mutaes em oncogenes ou genes supressores de tumor que resultam num descontrole no ciclo celular ou na induo de apoptose nestas clulas. O gene supressor de tumor p53 se encontra mutado em mais da metade dos tumores humanos. Mutaes neste gene podem impedir o processo de reparo de mutaes no DNA, alm de comprometer o processo de apoptose. Alguns tipos de cncer podem apresentar nveis aumentados de protenas anti-apoptticas como Bcl-2.

Apoptose e Doenas - Autoimunidade


Doenas autoimunes so devidas a falhas no sistema imune que fazem com que clulas do prprio organismo sejam reconhecidas como estranhas e sejam destrudas por desencadeamento de apoptose. Diabetes dependente de insulina (diabetes tipo I) uma doena crnica, caracterizada pela deficincia devida destruio das clulas b do pncreas, responsveis pela produo de insulina. A destruio das clulas produtoras de insulina deve-se uma srie de fatores como induo de apoptose por linfcitos T citotxicos. Lupus eritomatoso sistmico Doena crnica multisistmica. As principais manifestaes clnicas so erupes na pele, artrite e comprometimento renal. Podem ocorrer tambm complicaes pulmonares e do sistema nervoso central. Autoanticorpos contra DNA dupla-fita e anticorpos contra ribonucleoprotenas e histonas so encontrados no sangue de indivduos afetados.

Apoptose e Doenas - Doenas Neurodegenerativas


Alzheimer, Parkinson e Esclerose Lateral Amiotrfica (ALS) Uma srie de indcios implicam o processo de apoptose como responsvel pela perda de neurnios caracterstica destas doenas. Na ALS, mutaes no gene da enzima superxido dismutase esto associadas com a perda da capacidade de detoxificao de espcies reativas de oxignio, por parte dos neurnios motores, com conseqente aumento da susceptibilidade apoptose. Esclerose Mltipla Um processo inflamatrio crnico que causa perda de mielina destruio das clulas produtoras de mielina (oligodendrcitos) no sistema nervoso central, com conseqente perda de funo neuronal. Um dos mecanismos envolvidos a apoptose dos oligondrcitos mediada por linfcitos T citotxicos, astrcitos e macrfagos.

Modulao de apoptose no tratamento de doenas


Uma srie de estratgias esto em estudo para a utilizao teraputica da induo de apoptose no tratamento de doenas. Terapia gnica com p53 reativao do controle do ciclo celular e induo de apoptose em tumores com p53 mutante. Quimioterpicos contra o cncer atuam induzindo apoptose nas clulas tumorais por danos ao DNA. Alm disso, a ativao de receptores de morte celular ou a ativao direta de caspases, tm sido estudadas em culturas de clulas e em animais com o intuito de induzir apoptose em clulas tumorais. Por outro lado, a inibio de caspases uma estratgia promissora em doenas autominunes.

Induo de apoptose no tratamento da obesidade


Kolonin MG, Saha PK, Chan L, Pasqualini R, Arap W. Nature Medicine, maio 2004. Induo de apoptose dirigida para a vasculatura do tecido adiposo branco em camundongos obesos resultou em rpida perda de peso sem efeitos colaterais aparentes. Os camundongos perderam 30 % do peso em 4 semanas de injees dirias de um peptdeo que induz apoptose nestes vasos sangneos.