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Estudo da expresso de genes diferenciais da interao Musa spp.

X Mycosphaerella musicola
Vincius Jos dos Santos1, Israel de Jesus Sampaio Filho2, Aparecida Gomes Araujo3, Claudia Fortes Ferreira4, Edson Perito Amorim5
1Estudante de Engenharia Florestal, Universidade Federal do Recncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA, Viniciusnts@hotmail.com, Bolsista IC 2Estudante de Engenharia Florestal, Universidade Federal do Recncavo da Bahia, Cruz das Almas, BA, israelmdt@yahoo.com.br, Bolsista IC 3Estudante de Empresa de Desenvolvimento Agropecurio, Sergipe xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 4Pesquisador, Embrapa Mandioca e Fruticultura Tropical, Cruz das Almas, BA, claudiaf@cnpmf.embrapa.br, Orientador 5Pesquisador, Embrapa Mandioca e Fruticultura Tropical, Cruz das Almas, BA, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

INTRODUO
A cultura da bananeira considerada uma importante fonte de alimento e de renda para muitas famlias, sendo a maior parte produzida por pequenos produtores. O Brasil o quarto maior produtor de banana no mundo com produo de aproximadamente 7 milhes de toneladas em 2009. Vrios fatores afetam a cultura da bananeira, como por exemplo, a Sigatoka amarela, causada pelo fungo Mycosphaerella musicola Leach. O fungo causa necrose foliar que consequentemente reduz a rea fotossinttica da planta podendo levar morte da mesma. A mudana de posio quanto ao grau de importncia, entre a Sigatoka-amarela e a Sigatoka-negra, est em curso, mas no caso brasileiro, na prtica, isso ainda no ocorreu. A Sigatoka-amarela continua sendo de grande importncia nas regies de bananicultura mais competitivas no pas. A doena encontra-se dispersa em todo o territrio nacional, causando grandes perdas cultura. Portanto, o principal objetivo do presente trabalho foi inocular plantas de bananeira resistente (Caipira) e suscetvel (Grande Naine) Sigatoka amarela com o intuito de analisar, em etapa posterior, os genes diferencialmente expressos.

RESULTADOS E DISCUSSO

MATERIAL E MTODOS
Foi preparado uma suspenso de esporos na concentrao de 4 x 10 4 condios/mL e a mesma aplicada na face inferior de folhas de plantas de cada variedade de bananeira, Caipira (resistentes) e Grande Naine (suscetvel), somando um total de 10 plantas para cada variedade. As plantas ento foram mantidas em telado sob irrigao e amostras das folhas (5 x 5 cm) foram coletadas nos tempos 0, 24h, 48h, 72h, 5, 10 15, 20, 30 , 40 , 50 e 60 dias aps a inoculao, juntamente com seus respectivos controles (folhas borrifadas com gua esterilizada).

Figura 2. A) Corte de 5 cm da parte central da folha de bananeira (Caipira) inoculada com suspenso do inoculo; B) embalo em papel alumnio e identificao; C) Amostra coletada, embalada e armazenada em gelo antes de ser levada ao ultrafreezer -80 C.

O RNA das amostras ser extrado utilizando-se o kit da Ambion (Rnaqueous kit) e as mesmas enviadas Helixxa para a construo de 8 bibliotecas: 1) dos tempos iniciais (0, 24, 48 e 72h), 2); tempo intermedirio (5, 10 e 15 dias, 3); tempo final (20 e 30 dias), e seus respectivos controles (Caipira e Grande Naine), utilizando-se a tcnica de RNASeq.

CONCLUSES
Os dados obtidos sero analisados e espera-se obter informaes relevantes sobre a relao de genes sendo diferencialmente expressos; onde os mesmos sero validados via qRT_PCR.

Figura 1. A) Plantas de bananeira em casa-de-vegetao: As plantas apresentamse com aproximadamente 3 meses de idade. B) Inoculao da folha abaxial da bananeira com suspenso do inoculo de M. musicola na concentrao de 1,4 x 104 esporos/mL.