Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Ribosoma
Longitud promedio de 75 a 80 nt. Se sintetizan por la ARNpolimerasa III Precursor ms largo (pre ARNt) Modificaciones de bases. (10%) Eliminacin del extremo 5 Eliminacin de intrn catalizado por protenas, no por ARN Regin especfica (anticodn) que se une a l ARNm (codn)
La aminoacil ARNt sintetasa reconoce a su aminoacil-ARNt especfico a travs de extensas interacciones entre la enzima y varias partes del ARNt: Tallo aceptor Tallo D bucle anticodn La enzima tambin reconoce al aminocido correcto y excluye a los aminoacidos incorrectos
Aminoacil-tRNA sintetasas
Reconocimiento del tARNt: puntos de contacto entre tRNA y sitio activo de protena (15 sitios, muchas veces incluye anticodon)
Ribosomas 4 sitios de binding mRNA-binding site A site (aminoacyl) P site (peptidyl) E site (exit)
40S subunit
Terminacin
y Reciclado
Iniciacin citoplasmtica Estrategias diferentes para interaccin mRNA-RNAr Traduccin Cap-dependiente (Scanning) Traduccin Cap-independiente (IREs) 13 factores diferentes
En la Iniciacin
Hay factores proteicos que segn la etapa en que participen se llaman IF, EF y RF (con e delante si son eucariotas). Participan tres factores: - IF1 e IF3: estabilizan la subunidad pequea separada de la grande.
Los mensajeros de procariotas tienen el codon de iniciacin AUG (con menor frecuencia GUG y ms raramente UUG) y corriente abajo tienen una secuencia (Shine-Dalgarno) muy conservada rica en purina complementaria de la secuencia del RNA de la subunidad pequea (16S).
Secuencia Shine- Dalgarno (Procariotas) 5'--UAAGGAGG(5-10 bases)AUG mRNA 3'--AUUCCUCC........ 16S rRNA
5'--ACCAUGG- mRNA
3. Unin de la subunidad 50S. Hidrlisis de GTP unido a IF2 y liberacin de IF2-GDP del complejo.
IF2:
Permite que el primer aminoacil-tRNA se una al sitio P, asociado a IF2 que ha de estar en forma activa (uniendo un nucletido GTP) y es esencial. Es el nico aminoacil-tRNA que se une cuando slo est la subunidad pequea. La metionina est formilada en el a -amino (formilmetionina). Cuando se une la subunidad grande se disocian todos los factores proteicos. IF1 e IF3 salen pero IF2 ha de hidrolizar el GTP para salir.
En la mayora de casos, en eucariotas, la traduccin depende de Cap y ocurre por un mecanismo de Scanning
El modelo de escaneo fue propuesto por Marilyn Kozak (1978) - Reconocimiento m7G-cap en extremo 5 - Unin de subunidad 40s
El capuchn del extremo 5 es reconocido por eIF-4E, que forma un complejo con eIF-4A y eIF4G. eIF-4G se une a la protena de unin a poli A Estos factores de iniciacin de la traduccin, asociados a los extremos 5y 3del ARNm dirigen a ste hacia la subunidad ribosmica 40S.
4.
5.
La hidrlisis del GTP unido a eIF-2 producida por eIF-, provoca la liberacin de los factores de iniciacin, incluso eIF-2 unido a GDP.
La subunidad 60S se une a la subunidad 40S para formar el complejo de iniciacin 80S, inicindose la traduccin.
La elongacin es similar en procariotas y eucariotas Hay tres factores de elongacin: EF-Tu eEF-1a EF-Ts eEF-1bg EF-G eEF-2
Enlongacin
Participan factores de enlongacin unidos a GTP, que guan al aminoacil tRNA hacia el ribosoma (eEF1a y GTP estn unidos al segundo aminoacil tRNA). El ribosoma selecciona el segundo aminoacil tRNA mediante el centro decodificador ubicado en la subunidad pequea del ribosoma.
Enlongacin
Una vez que se libera eEF1a, el ribosoma (la subunidad mayor) cataliza la formacin del enlace peptdico. La translocacin est mediada por eEF2 y la hidrlisis de GTP. El ribosoma se desplaza tres nucletidos sobre el ARNm.
La enlongacin requiere de eEF1a unido a GTP. eEF-1bg participa en el proceso de regeneracin de eEF1a unido a GTP.
Terminacin
Uno de los tres codones (UAA, UAG, UGA) se colocan en el sitio A.
ARNt
eRF1 humano
anti-codon loop
termina la traduccin
eRF1
El inicio de la traduccin dependiente del extremo 5 es estimulado por la protena de unin a poli A (Pabp1p), que interacciona con eIF4G. Esta interaccin circulariza al ARNm y facilita la formacin del complejo de iniciacin. Este mecanismo asegura que solo el ARNm intacto sea traducido.
POLISOMA
POLISOMA
AUG
m7Gppp
orf
Regulacin de la traduccin
Unin de protenas represoras que bloquean la traduccin. Ejemplo: regulacin de la sntesis de ferritina (protena que almacena hierro como reserva y protege a la clula contra la toxicidad del Fe libre.
Regulacin de la traduccin
La misma protena que regula la traduccin del ARNm de la ferritina, controla la degradacin del ARNm de la transferrina.
La misma protena que regula la traduccin del ARNm de la ferritina, controla la degradacin del ARNm de la transferrina.
Regulacin de la traduccin
Unin de protenas represoras que bloquean la traduccin mediante la unin a secuencias reguladoras del extremo 3. Estas protenas son responsables de la localizacin del ARNm en regiones especficas de la clula.
Regulacin de la traduccin
Modelo del control de la poliadenilacin citoplasmtica e inicio de la traduccin.
En ovocitos inmaduros, la protena de unin al elemento de poliadenilacin citoplasmtico rico en U., reprime la traduccin de los ARNm
Cuando se produce la maduracin, se activa una proteina quinasa que fosforila a CPEB, liberando al represor. El alargamiento de la cola poli A permite la unin a sta de la protena de unin a poli A citoplasmtica.
ARN reguladores
La interferencia por ARN fue descubierta por primera vez en C. elegans en 1998, cuando Andrew Fire, Craig Mello y col. Encontraron que la infeccin de ARN de doble cadena inhiba la expresin de un gen con una secuencia de ARNm complementaria
ARN reguladores
Regulacin de la traduccin por micro ARN
Los miRNA desempean un importante papel en la regulacin gnica , tanto durante el desarrollo embrionario temprano, desarrollo del sistema nervioso, musculatura, corazn. Se ha demostrado que muchos miRNA regulan la proliferacin y supervivencia de la clula
ARN reguladores
Un miRNA se genera a partir de un precursor (pre-ARNmi) que fue transcripto por la RNA pol II. El precursor puede codificar para ms de un miARN. Drosha se une al RNA de doble cadena y lo corta en la base del tallo, liberando un premiARN de 60 a 70 nuclotidos. ste es transportado hacia el citoplasma. En el citoplasma, Dicer se une al pre-miRNA y lo recorta, dando lugar al miRNA. Por ltimo, los miARN dirigen al complejo RISC hacia un ARN homlogo para inducir su degradacin (complementariedad perfecta) o la inhibicin de la traduccin, desadenilacin y degradacin del ARNm (complementariedad imperfecta)
ARN reguladores
Otro mecanismo de regulacin de la traduccin en clulas eucariotas es mediente la modulacin, por fosforilaciones, de la actividad de factores de iniciacin como eIF2 y eIF4e.
Algunos ARNm eucariotas poseen sitios internos para el ingreso de los ribosomas internal ribosome entry site (IRES); stos estn alejados del extremo 5que contiene el cap. En estos casos es posible que la traduccin ocurra sin el mecanismo de scanning. Esta estrategia es aprovechada por algunos virus, ya que tienen ARNm policistrnicos Traduccin cap-independiente (1988-Picornavirus)
Protenas que participan en el inicio de la traduccin Picornavirus clivan el extremo Nterminal de eIF4G, impidiendo la interaccin con eIF4E. eIF4G sigue siendo funcional para la iniciacin ya que interacciona con eIF3 y probablemente mediante la interaccin de una protena de unin a IRES. La unin de Pab1p produce la circularizacin del ARNm - proteje al ARN de la degradacin - Selecciona ARNm intactos. - Los ribosomas pueden realizar mltiples ciclos de traduccin sin disociarse.
Modificaciones postraduccionales
Plegamiento de protenas Procesamiento de protenas Escisin de protenas Glicosilacin Anclaje delpidos
N-miristoilacin Prenilacn Palmitoilacin
Fosforilacin Ubiquitinacin