METODOS DIRECTOS

MAR TEST:
Se basa en la presencia de partculas (glbulos rojos o partculas de ltex) cubiertas con anticuerpos incompletos, generalmente isotipo IgG, que mezclados con espermatozoides sin lavar y con el agregado de antiinmunoglobulina humana, en exceso, produce aglutinados. Se cuentan como positivos los espermatozoides mviles que presentan partculas pegadas en su superficie.
Valores de referencia: Negativo: 10% de espermatozoides adheridos

Dudoso: 10-50% de espermatozoides adheridos Positivo: 50% de espermatozoides adheridos

INMUNOBEADS:
Presenta partculas de acrilamida cubiertas con antiglobulinas humana de clase especifica (IgG, IgA, IgM) que se pueden unir a los espermatozoides (lavados

previamente) en caso de presentar anticuerpos de superficie.

Brinda informacin, tambin, sobre la localizacin de los mismos (cabeza, cola, punta de cola). Es una tcnica que requiere de tiempo y es ms laboriosa y de mayor costo que la anterior, pero brinda mayor informacin.

Valores de referencia: Negativo: espermatozoides con perlas adheridas 20% Clnicamente significativa: espermatozoides con perlas adheridas 50%

METODOS INDIRECTOS
Se utilizan para casos en los que no es posible obtener suficientes

espermatozoides mviles de una muestra de semen o bien para fluidos como suero o moco cervical.

TEST DE AGLUTINACION EN GELATINA (GAT): Determina la presencia de anticuerpos en forma macroscpica. Es un test de floculacin que utiliza a los espermatozoides como antgeno. Se realizan diluciones y la aparicin de flculos indica positividad.
Valores de referencia: Positivo: aglutinacin en la dilucin o mayor

 TEST DE AGLUTINACION EN BANDEJA (TAT): Es un mtodo de microaglutinacin. Utiliza como antgeno

espermatozoides mviles obtenidos a travs de un swim-up. Se determina microscpicamente la relacin entre espermatozoides aglutinados y libres y el tipo de aglutinacin (cabeza-cabeza, cola-cola, etc.). Se testean simultneamente distintas diluciones de la muestra y controles.

Valores de referencia:

Negativo: no se observa espermatozoides mviles aglutinados Positivo +: menos de 10% de espermatozoides mviles aglutinados Positivo ++: 10-90% de espermatozoides mviles aglutinados Positivo+++: mayor de 90% de espermatozoides mviles aglutinados
Se informa la ltima dilucin en la cual dio positivo

 TEST DE INMOVILIZACION (SIT):

Determina la presencia de anticuerpos dependientes de complemento

a travs de la utilizacin de espermatozoides de dador y una fuente exgena de complemento, calculando el porcentaje de inmovilizacin respecto a una muestra control.

Valores de referencia:

 ELISA y RIA:
Son tcnicas desarrolladas con el fin de estandarizar los resultados,

pero que an no han acumulado suficiente informacin como para ser usadas de rutina. Utilizan antgenos en fase slida (espermatozoides fijados con glutaraldehdo).
La limitacin que presentan estas metodologas reside en que slo la

utilizacin de espermatozoides vivos permite reproducibilidad para valorar anticuerpos antiespermticos y su correlacin con la fertilidad.

 INMUNOBEAD TEST INDIRECTO

Mtodo: Inmunobeads Anti IgG, IgA e IgM.
Muestra: Suero. Referencia clnica: Tiene el mismo principio de test directo pero se

deben usar espermatozoides de dador normal para detectar las inmunoglobulinas del suero del paciente.

La inmunofluorescencia (IFT).

Permite identificar el tipo de inmunoglobulina y la

localizacin de las zonas antignicas en el espermatozoide