Facultad de Ciencias Qumicas

Curso de Microbiologa Diagnstica

Enero 2010

CONTROL DE CALIDAD EN LABORATORIOS

M.A. MA. OLGA GONZLEZ RANGEL Enero 2010

Control de calidad
La organizacin Mundial de la Salud (OMS) estimula la participacin de los laboratorios centrales de salud pblica en por lo menos tres valoraciones al ao mediante encuestas de control de calidad externas. Los laboratorios nacionales centrales (laboratorios de referencia) deben trabajar para estandarizar los procedimientos de los laboratorios locales, regionales y los de ellos mismos, de manera que las observaciones puedan ser interpretadas de la misma manera en todos los lugares.

CONTROL DE CALIDAD
El control de calidad es la parte fundamental cualquier laboratorio de anlisis clnicos, ya que son reglas las cuales nos va a decir que pruebas estamos haciendo bien y cuales no. El control de calidad se basa bsicamente en:

Estructura y Equipo

Recoleccin de la muestra
Control de los medios y reactivos que se utilizan. Trabajo

Reporte de Resultados.
Control de calidad externo

NORMAS QUE RIGEN EL FUNCIONAMIENTO DEL LABORATORIO CLNICO.

NOM 166 SSA1 1997. Organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos.

NOM - 168 SSA1 1998. Del expediente clnico.

NOM - 178 SSA1 1998. Establece los requisitos mnimos de infraestructura y equipamiento de establecimientos para la atencin mdica de pacientes ambulatorios. NOM 087 ECOL SSA1 2002. Manejo de residuos peligrosos biolgicos infecciosos.

ESTRUCTURA Y EQUIPO

Construccin adecuada Mobiliario adecuado Aislamiento total de otras reas Microscopios Incubadoras Material microbiolgico (Cepas, reactivos, cultivos)

Extintores

RECOLECCION DE LA MUESTRA

RECOLECCION DE LA MUESTRA
La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso

Evitar la contaminacin con microorganismos saprofitos del rea.

Utilizar la tcnica apropiada y los instrumentos adecuados para su obtencin. En el caso de investigar microorganismos anaerbicos, la biopsia y el aspirado con aguja, son las muestras de eleccin. Coleccione un apropiado volumen de muestra. Identificar correctamente cada muestra. Coloque la muestra en un receptculo adecuado para su transporte, evitar derrame del espcimen y mantener las medidas de bioseguridad apropiadas.

PRIORIDAD DE LAS MUESTRAS

MUESTRAS URGENTES Sangre. LCR. ( Su estudio tiene Prioridad sobre cualquier otra muestra o trabajo ). Aspirado Transtraqueal Lquido pericardico. Lquido amnitico. Tracto respiratorio inferior. Muestras quirrgicas de la sala de CIC. Lquido articular ( Artritis sptica ).

Biopsia de Pulmn

MUESTRAS DE RUTINA Boca. Lquido pleural. Quemaduras.

Ocular.
Orina. Genitales Muestras quirrgicas. Lquido peritoneal.

MUESTRAS SELECTIVAS

Lquido asctico.
Bilis. Lquido articular ( No artritis ). Lquidos intravenosos. Genitales Odo. Nasofarngeo. Rectal

Ulceras, vesculas.
Piel. Post Mortem.

CONTROL DE CALIDAD DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

Control de calidad
El control de calidad incluye la seleccin correcta de los reactivos, la preparacin de los medios de acuerdo con las formulaciones aprobadas o con las instrucciones especficas del fabricante y el uso de las cepas de referencia bien caracterizadas para controlar el medio preparado.

Control de calidad de medios de cultivo

Consideraciones para el control de calidad de los medios Esterilidad Habilidad para soportar el crecimiento de los organismo (s) especficos. Habilidad para producir reacciones bioqumicas de manera apropiada.

PREPARACION DE MEDIOS
Los medios de cultivo deshidratados deben almacenarse siempre en lugares frescos, a temperatura ambiente protegidos contra la humedad y la luz. Se debe mantener un registro de cada frasco de medio de cultivo deshidratado, con el nombre del producto, nombre y nmero telefnico de la casa proveedora, nmero de control del frasco, fecha de recibo, fecha de expiracin, nmero de lote y fecha en que se abri el frasco. El eficacia de un medio deshidratado, depende en gran medida del procedimiento empleado en la rehidratacin. El almacenamiento a 4C es el mejor para la mayora de los medios

Los medios deben mantenerse preferiblemente en sitios oscuros, ya que la luz puede afectar algunos de sus componentes.

FALLAS EN LA PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

Valor de pH incorrecto Turbidez o precipitacin Gel blando Crecimiento bacteriano pobre

MEDIOS PREPARADOS
Los medios deben mantenerse preferiblemente en sitios oscuros, ya que la luz puede afectar algunos de sus componentes. Para evitar la desecacin se aconseja que se guarden en bolsas plsticas bien cerradas. Los platos Petri almacenados as, deben mantenerse con el fondo hacia arriba. Cada lote preparado de medio de cultivo se prueba antes de su uso rutinario, por eficiencia o calidad, mediante la inoculacin de microorganismos cuyo comportamiento conocemos, tanto para reacciones positivas como negativas. Puede utilizarse para ello cepas bacterianas domsticas o cepas control comerciales ( ATCC ). Rotular todos los medios preparados, tanto en platos Petri como en tubos, indicando adems, la fecha de preparacin y expiracin

EVALUACION DE LA EFICIENCIA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO PREPARADOS

MEDIO DE CULTIVO . TSI TSI TSI SIM SIM Citrato de Simmons Citrato de Simmons Caldo de urea Caldo de urea Agar sangre Agar sangre Agar sangre McConkey McConkey McConkey ORGANISMO CONTROL E. coli Shigella flexnerii Pseudomona aeruginosa Proteus mirabilis K. pneumoniae K.pneumoniae E. coli Proteus mirabilis E. coli Estreptococo Grupo B S. pneumoniae K.pneumoniae E. coli Proteus sp Estafilococos REACCION ESPERADA cido/cido alcalino/cido alcalino/alcalino movilidad positiva movilidad negativa color azul. Crece color verde. No crece. Rojo-Morado. Positivo. color Naranja. Negativo. Crece. Beta hemlisis. Crece. Alfa hemlisis. Crece. No hemoltico. Crece. Colonias moradas. Crece. Colonias claras. No crece.

CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS

.

Un elemento fundamental en el trabajo diario del laboratorio, lo constituyen los reactivos, tanto comerciales como de preparacin domstica, que son utilizados en la caracterizacin de microorganismos. Correr controles diarios con las bacterias tipo y seguir estrictamente las indicaciones en cuanto almacenamiento de los reactivos, metodologa de la prueba y tiempo de lectura.

CONTROL DE CALIDAD DE LOS TINTES .

La clasificacin correcta de las bacterias de acuerdo a las reacciones bioqumicas, dependen de la pureza, reactividad y estabilidad de los reactivos. El control de calidad de stos tintes debe realizarse primero con cada nuevo lote preparado Se realiza un control cada semana para mantener un grado de seguridad apropiado en su uso.

CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS .

Estos sistemas actan algunos con solo la muestra del paciente y otros requieren de la cepa aislada o detectan sus metabolitos. Estos sistemas se han convertido en un arma imprescindible para el microbilogo y en muchos casos dan confianza en la seguridad del diagnstico y en otras se utilizan en la deteccin de microorganismos difciles de cultivar. En forma general stos kit deben ser probados cada vez que se recibe un nuevo lote y cada vez que se utilicen, se le deben correr sus controles positivo y negativo que vienen con cada kit.

CONTROL DE CALIDAD DE LA PRUEBA DE SENSIBILIDAD . Las metas de un programa de control de calidad van destinadas a monitorear:

La precisin y exactitud del procedimiento de la prueba de susceptibilidad El comportamiento de los reactivos utilizados en la prueba La actuacin de las personas que llevan a cabo las pruebas y sus resultados. Los discos deben ser almacenados a un temperatura entre 20 y +8C.

verificar el estado de los discos de sensibilidad, utilizando cepas control ATCC.

EL ESTANDAR McFARLAND . La densidad de la turbidez del Estndar McFarland deber ser verificada utilizando un espectrofotmetro con direccin de luz de 1 cm y cubetas adecuadas para determinar absorbancia. Para realizar el control de un estndar McFarland de 0.5 , la absorbancia deber leer entre 0.08 a 0.10 a una longitud de onda de 625 nm.

Estos tubos debern guardarse a temperatura ambiente en un lugar fresco y oscuro. Antes de ser usados, los patrones debern agitarse para una adecuada homogenizacin. Mensualmente los patrones son descartados y vueltos a preparar, o en su defecto se debe comprobar su densidad.

METODOS DE CONSERVACION DE CEPAS BACTERIANAS .

Los mtodos de conservacin de las cepas estndar de control de calidad, deben asegurar que las mismas mantengan sus caractersticas tpicas y que puedan ser reproducidas despus. El medio utilizado para su conservacin debe mantener un mnimo de mutaciones. Cultivos Stock, (Ultra congelamiento, Liofilizacin) Semistock (congelador convencional) Cultivos de trabajo diario.

Control de calidad de equipos y materiales de trabajo

Incubadoras
Controlar cada da la temperatura Si es incubadora de CO2 medir el nivel de gas diariamente Poner la muestra en una posicin segura Limpiarlas mensualmente Reportar si esta fallando Tener una bitcora donde se lleve un registro del funcionamiento

AUTOCLAVES
Checar temperatura, presin, nivel de agua, vlvula. Limpiarlas Utilizar indicadores de esterilidad Tener una bitcora donde se lleve un registro del funcionamiento

REFRIGERADORES
Control diario de temperatura No abrir con frecuencia el refrigerador Tener una bitcora donde se lleve un registro del funcionamiento

MICROSCOPIOS
Limpieza de aceite en objetivos, condensador, etc. Poner cobertura contra el polvo Tener una bitcora donde se lleve un registro del funcionamiento

Supervisin del personal

El personal es el factor ms importante en la calidad del trabajo en el laboratorio de microbiologa. Este personal debe tener una dedicacin y actitud positiva hacia el trabajo, capacidad acadmica, actualizacin constante y contar con los elementos indispensables para su labor.

Evaluacin del personal

La competencia del personal de microbiologa, debe ser certificada por la revisin de su hoja de trabajo, la interpretacin de muestras desconocidas , su habilidad tcnica y exmenes escritos anuales. Se debe llevar un registro profesional acerca de su evaluacin acadmica, reporte sobre su capacidad de trabajo, asistencia a programas de educacin continuada, responsabilidad, asistencia, trabajos de investigacin, charlas, conferencias y su evaluacin profesional anual. Todo nuevo empleado que se adicione a la plantilla de la seccin, debe ser documentado, evaluado y certificado, incluyendo las fases pre-analticas, analticas y post-analticas de funcionamiento del laboratorio.

Control de calidad externo:

Es recomendable que los laboratorios de microbiologa puedan participar en programas de evaluacin externa. Estos programas miden la capacidad del laboratorio para evaluar una muestra desconocida y llegar a un resultado seguro. Los mismos consisten en la identificacin de muestras o microorganismos desconocidos en los cuales se debe informar del resultado de la identificacin, pruebas utilizadas para el diagnstico etiolgico y sensibilidad a los antibiticos.

Quin es responsable de la calidad? No es slo quien define el nivel de calidad esperado por los clientes. Es una responsabilidad compartida de todos los trabajadores