Universidad San Sebastin Facultad de Ciencias de la Salud Tecnologa Mdica

Cintica Enzimtica

TM. Paulina Fernndez Garcs Lunes 30 de Marzo

Relaciones Termodinmicas importantes:

1 Ley de la termodinmica: La energa total del universo y su entorno es constante (la energa se conserva).
Esta ley no permite determinar si una reaccin ocurre espontneamente.

E = EB - EA = Q - W
Q: calor absorbido
EA: Energa al principio del proceso EB: Energa al final del proceso W: Trabajo realizado por el sistema.

Tambin existe un grado de desorden en el sistema, o un grado de azar denominado S o entropa y por lo tanto es necesario una segunda ley.

2 Ley de la termodinmica: Un proceso ocurre espontneamente si aumenta la suma de las entropas del sistema y de su entorno.

sistema

entorno

)>0

para un proceso espontneo.

Esta ley otorga un criterio de espontaneidad de la ecuacin, pero se requiere conocer adems el cambio de las entropas del entorno y del sistema. Entonces, sabemos que: 1. Ocurre una reaccin 2. El proceso es espontneo o no 3. Y en funcin de eso saber cuanto vara su disminuye) S (si aumenta o

Puesto que los cambios de entropa son difciles de medir. Se utiliza una funcin termodinmicamente distinta llamada energa libre o G (F en la antigedad) G combina la primera y segunda ley de la termodinmica en la ecuacin:

G=

H-T S

S: Cambio de energa libre de un sistema que sufre una transformacin a

presin (P) y temperatura (T) constantes.

H: Cambio de entalpa (contenido de calor) S: Cambio de entropa del sistema El cambio de entalpa (H) est dado por:

H=
Donde lo tanto

E+P V

V es pequeo para casi todas las reacciones bioqumicas y por H es aproximadamente igual a E

G=

E-T

G-

E=T S

Por lo tanto, G depender tanto del cambio de energa interna, como del cambio de entropa del sistema. El cambio de G de una reaccin, en contraste con E de una reaccin es importante para saber si ocurre espontneamente.

Por eso:
1. Una reaccin puede ocurrir espontneamente si G es negativo. G es 2. Un sistema est en equilibrio y no tiene lugar un cambio si cero.

3. Una reaccin no puede ocurrir espontneamente si G es positivo. Se requiere un aporte de energa libre para permitir tal reaccin.

G de una reaccin depende slo de la energa libre de los productos (el estado final) menos la de los reactantes (estado inicial)

G es independiente del cambio (o mecanismo molecular) de la transformacin.

G no proporciona informacin sobre la velocidad de la reaccin, sta depende de la energa libre de activacin. ( G** )

Las enzimas aceleran las reacciones estabilizando los estados de transicin. La transformacin de sustrato (S) a producto (P) ocurre a travs de un estado de transicin S+ + que posee mayor G que S o P S
Sustrato

S+ +
Estado de Transicin

P
Producto

Especie molecular que dura menos tiempo en la reaccin debido a que presenta mayor energa libre Al ser las enzimas un catalizador no pueden alterar el equilibrio de una reaccin qumica. Slo aceleran la consecucin del equilibrio pero no varan su posicin.

Existe lo que se denomina energa libre de activacin o G* * que es igual a la diferencia en energa libre entre el estado de transicin y el sustrato
* G* = GS+ + - GS

Las enzimas aceleran las reacciones disminuyendo la energa libre de activacin. La combinacin del sustrato con la enzima crea una nueva va de reaccin cuya energa del estado de transicin es menor en la reaccin en ausencia de enzima.

* G* S P

* G* S

P
Progreso de la reaccin (Con enzima)

Progreso de la reaccin (Sin enzima)

La primera etapa de la catlisis enzimtica es la formacin del complejo [ES]

Esto ha sido demostrado, debido a que a concentraciones constantes de enzima, la velocidad de reaccin aumenta con la concentracin del sustrato, hasta alcanzar una velocidad mxima. Las reacciones no catalizadas no muestran este efecto de saturacin.
Velocidad mxima (Vmax).

Velocidad de reaccin

A altas concentraciones de sustrato, los centros catalticos estn ocupados por l y por lo tanto la velocidad de la reaccin alcanza el mximo

[Sustrato]

Cintica Enzimtica
Modelo de Michaelis-Menten

El modelo de Michaelis-Menten, permite conocer la velocidad a la que se lleva a cabo una reaccin mediante la siguiente ecuacin:

V = Vmx [S] [S]KM

Esta ecuacin quiere decir que:

KM es una relacin de constantes de velocidad para una determinada reaccin.

- Cuando la concentracin del sustrato es mucho menor que la KM, la velocidad es directamente proporcional a la concentracin de sustrato

V = [S] Vmx KM
- Cuando la concentracin de sustrato es mucho mayor que la KM, la V= Vmx, la velocidad es mxima, independiente de la concentracin de sustrato

Cuando:

[S]=KM

entonces

V= Vmx 2

As, KM es aquella concentracin de sustrato a la cual la velocidad de la reaccin se hace la mitad de su valor mximo.

Variando la concentracin de sustrato se pueden medir Vmx y KM

La ecuacin de Michaelis-Menten puede transformarse en otra que representa grficamente resulta en una lnea recta. Esto se consigue tomando los valores inversos de los miembros de la ecuacin.

1 V

1 KM + = Vmx Vmx

1 [S]

Esta ecuacin puede ser graficada mediante la representacin de Lineweaver-Burk

El valor de la KM para una enzima depende de cada sustrato particular y tambin de las condiciones ambientales tales como T, pH, y fuerza inica.
Significados de la KM: 1. Concentracin del sustrato a la cual la mitad de los centros activos estn ocupados. 2. KM se relaciona con la constante de velocidad de las etapas individuales de la ecuacin:
k1 k3

k2

ES

E + P

Nmero de Recambio (kcat)

(Velocidad del proceso cataltico)

El nmero de recambio constituye una medida directa de la produccin cataltica de producto en condiciones ptimas (enzima saturada). Tambin se puede interpretar como el nmero de molculas de sustrato recambiadas por molculas de enzima por segundo. Cuando relacionamos Kcat /KM obtenemos una medida adecuada de la eficacia enzimtica.

Universidad San Sebastin Facultad de Ciencias de la Salud Tecnologa Mdica

Cintica Enzimtica

TM. Paulina Fernndez Garcs Lunes 30 de Marzo