Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
PRUEBAS DE LABORATORIO
Mtodos Directos:
PRUEBAS DE LABORATORIO
Mtodos
Indirectos:
Diagnstico de VIH
Se usan dos niveles de prueba serolgicas: Pruebas de Tamizaje: Ensayos inmunoenzimticos Test de aglutinacin Test de deteccin rpida Tienen alta sensibilidad. La posibilidad de tener falsos negativos es bajo.
Uni-Gold Recombigen
OraQuick Advance
Reveal G2
PRUEBAS DE ELISA:
Primera Generacin: Los antgenos utilizados provienen del lisado viral de un cultivo Segunda Generacin: Los antgenos corresponden a protenas recombinantes o Pptidos sintticos. Tercera Generacin: Pptidos recombinantes sintticos de VIH-1, 2, 0. Cuarta Generacin: Se adicion el p24.
6
Continuacin 7
Pruebas de confirmacin: Tienen alta especificidad Western Blot Inmunofluorescencia Indirecta. Radioinmunoprecipitacin
PUEDEN SER UTILIZADAS PARA DISMINUIR LA POSIBILIDAD DE OBTENER RESULTADOS FALSO POSITIVO.
Western Blot
inmunoenzimtico Detecta anticuerpos contra protenas especficas del VIH 1 Interpretacin: visual Muestras: suero y plasma Volumen: 20 l Tiempo: 3.5 hrs Sensibilidad: 100% Especificidad: 100%
8
Gen Protena env Precursora de la envoltura Glucoprotena externa Glucoproteina transmembrana gag Precursora del core Precursora del core Protena principal Protena de la matriz pol Transcriptasa inversa Transcriptasa inversa Endonucleasa
gp120
p24
Versatilidad
y existencia de diferentes principios inmunolgicos as como en las muestras biolgicas que se pueden utilizar. No necesitan un laboratorio muy sofisticado para utilizarlas. La realizacin y la interpretacin de los resultados obtenidos es fcil. Los resultados preliminares se obtienen en poco tiempo, y cuando se combinan los resultados definitivos los podemos obtener en menos de una hora Personal a nivel tcnico las puede realizar con la debida capacitacin y supervisin de un profesional con experiencia.
ambiente. Se optimiza el uso de los recursos y el tiempo comparado con el ELISA. Los resultados obtenidos son igual de confiables que los resultados del ELISA y con menos limitaciones tcnicas. Algunas requieren poca inversin econmica.
puede a veces ser mayor. Presencia de falsos positivos por lo que necesitan confirmacin de los resultados obtenidos. El periodo de ventana es mas largo por lo que podemos tener resultados falso negativo comparado con el ELISA de cuarta generacin.
Relativas al suero:
Vacunaciones, Enf. Virales, I Renal, Cirrosis, Enfermedades hemato -oncolgicas, alcoholismo, embarazo, etc.
Periodo de ventana Tratamiento con inmunosupresores Procesos malignos Trasplante de mdula sea Disfunciones de las Clulas B Factores reumatoides Prdida de estabilidad de los reactivos Reactivos que detectan principalmente p24 Pobre respuesta inmune
El objetivo de hacer la prueba. Sensibilidad y especificidad de la prueba. Prevalencia de la infeccin de VIH en la poblacin que ser tamizada con las pruebas.
de anticuerpos contra VIH son: Tamizaje de donadores de sangre u rganos. Para fines epidemiolgicos Diagnstico de personas infectadas.
persona infectada y una que no est infectada. Pruebas alta mente sensibles disminuyen la posibilidad de obtener resultados falsos negativo. Las pruebas altamente especficas disminuyen la posibilidad de tener resultados falsos positivo. La mejor eleccin depender del objetivo de hacer la pruebas. Los estndares mnimos son: Sensibilidad >99%
Resultados De la prueba
c+d
Sensibilidad = a / (a + c) VPP = a / (a + b)
Especificidad = d / (b + d) VPN = d/ (c + d)
Pruebas de Tamizaje
Sensibilidad
Pruebas de Confirmacin
Especificidad
poblacin total La prevalencia puede variar de poblacin a poblacin o en un hospital de servicio a servicio. A > prevalencia > VPP y < VPN A < prevalencia < VPN y > VPP
21
prueba:
Es suficientemente sensible Que tan rpido tendremos el resultado Necesitamos equipo muy complejo para hacer la prueba Que nivel de especializacion tiene que tener la persona que realiza las pruebas Ayudar nuestro trabajo a disminuir el riesgo de trasmisin materno fetal
prueba Registro adecuado de resultados en libro de trabajo. A quin le doy el resultado, al medico, a la paciente. Tengo otras pruebas para confirmar resultados positivos.
Principio: Anlisis
Inmunocromatogrfico Prueba de 3ra. generacin Interpretacin:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) Volumen de muestra:10l Tiempo:20 minutos Sensibilidad: 100.0% Especificidad: 99.4%
Experiencias
29
Performance of a Rapid Immunochromatographic Screening Test for Detection of Antibodies to Human Immunodeficiency Virus Type 1 (HIV-1) and HIV-2: Experience at a Tertiary Care Hospital in South India
Theophilus-Sunder Vijayakumar, Shoba David, Kavitha Selvaraj, Thiruppavai Viswanathan, Rajesh Kannangai, and Gopalan Sridharan*
Department of Clinical Virology, Christian Medical College, Vellore, Tamil Nadu PIN 632004, India *Corresponding author. Mailing address: Department of Clinical Virology, Christian Medical College, Vellore 632 004, Tamil Nadu, India. Phone: 91-416-2282312. Fax: 91 (416) 2232035. E-mail: g_sridharan/at/yahoo.com . Received March 16, 2005; Revised May 9, 2005; Accepted May 16, 2005.
Oraquick Instanscreen Determine
30
Principio: Anlisis
Inmunocromatogrfico Interpretacin:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre (EDTA) Volumen de muestra:50l Tiempo:30-35 minutos Sensibilidad: 99.6% Especificidad: 99.4%
31
Principio: Ensayo
Immunocomb II Caractersticas:
inmunoenzimtico Indirecto. Interpretacin:Visual Muestras: suero y plasma Volumen:50l Tiempo: 60 minutos Sensibilidad: 100% Especificidad: 99.4% No necesita equipo automatizado
32
ORAQUICK Caractersticas
Principio: Anlisis
Inmunocromatogrfico Interpretacin:Visual Muestras: Suero, plasma y sangre completa y fludo oral. Tiempo:30-35 minutos Sensibilidad: 99.6% Especificidad: 99.4%
33
34
Uso de bata Uso de guantes
Recomendaciones de bioseguridad
35
sangre. NO TRANSPORTAR MUESTRAS EN GUANTES. Descarte adecuado de desechos (agujas, jeringas y tubos)
Recomendacin: OMS
Todas las pruebas de anticuerpos dan resultados Positivos. Un resultado positivo con pruebas de anticuerpos no siempre indica infeccin por VIH. El diagnostico se establece con mtodos directos de diagnstico y sospecha clnica. Se debe dar seguimiento con pruebas de anticuerpos hasta los 18 meses
Tomar en consideracin cargas virales > 30,000 Y no se deben tomar decisiones medicas con una sola determinacin de CV
Verdaderos Positivos = 10 Falsos positivos = 4 Valor predictivo positivo = 100/104 = 96% Para una prevalencia de VIH del 0.4%:
Verdaderos Positivos = 4 Falsos positivos = 4
40