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Luminescncia Molecular

Anlise Instrumental

Luminescncia Molecular

luminescncia fenmeno de emisso de radiao eletromagntica por um material fluorescncia luminescncia instantnea (cerca de 1 ns) da matria aps a excitao com a radiao UV ou visvel fosforescncia luminescncia retardada da matria aps excitao com energia de uma radiao UV ou visvel. quimiluminescncia luminescncia promovida por uma reao qumica.

Fluorescncia e a fosforescncia processo de excitao absoro de ftons (fotoluminescncia).

Luminescncia por molculas as bandas de fluorescncia (ou fosforescncia) ocorrem tipicamente em um l maior que a linha de ressonncia (deslocamento de Stokes).

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Luminescncia Molecular

A medida da intensidade de fotoluminescncia ou quimiluminescncia permite a determinao quantitativa de uma variedade de espcies orgnicas e inorgnicas importantes em concentraes muito baixas (traos).

Vantagens:

Limites de deteco - uma a trs ordens de grandeza menores que a absoro (ppb). Extensa faixa de concentrao linear significativamente maior que as encontradas em mtodos de absoro.

Desvantagens:

sensibilidade - efeitos de interferncia das matrizes das amostras - normalmente, as medies de luminescncia esto associadas com tcnicas de separao da cromatografia e da eletroforese. aplicao menos ampla maioria das espcies absorve radiao UV/Vis do que emite.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Velocidades de Absoro e emisso:

absoro de ftons ocorre instantaneamente (1014 a 10-15s).


emisso de fluorescncia ocorre em 10-9 a 10-5s. fosforescncia ocorre em10-4 a 10s ou mais (em virtude da transio de spin singlete-triplete diferente da transio singlete-singlete da fluorescncia).

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Estados excitados que produzem fluorescncia e fosforescncia

A velocidade mdia de uma transio triplete a singlete menor que a correspondente transio singlete a singlete. A emisso fosforescente requer tempos entre 10-4 e 10s ou superiores.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Processos de desativao
O caminho mais propcio para o estado fundamental aquele que minimiza o tempo de vida do estado excitado. Processos radiativos
Fluorescncia relevncia analtica Fosforescncia.

Processo no-radiativos
Relaxao vibracional (10-12 s)
Colises entre as molculas excitadas e as molculas do solvente eliminam excesso de energia, atingindo o menor nvel vibracional.

Converso interna
Processos intermoleculares pelos quais a molcula passa para um estado eletrnico de menor energia sem emisso de radiao.

Converso externa (extino por coliso)


A desativao de um estado eletrnico excitado envolve a transferncia de energia entre a molcula excitada e o solvente ou outros solutos. Condies que reduzem o nmero de colises (baixa temperatura e alta viscosidade) aumentam a emisso.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia

Fluorescncia - ocorre em sistemas qumicos gasosos, lquidos e slidos simples, bem como em sistemas complexos.
Fluorescncia de ressonncia: lemis = labs. Observada mais para espcies atmicas que moleculares.

Fluorescncia com deslocamento Stokes: lemis > labs. O fsico Irlands George Gabriel Stokes, verificou que o fton absorvido perdia energia por inmeras vibraes microscpicas.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia

Linhas horizontais grossas estados eletrnicos - estado fundamental: S0 (normalmente singlete) - excitados: S1 e S2 (singletes) e T1 (tripletes)

Linhas horizontais finas estados vibracionais


- associados ao estado fundamental: S0 - associados aos estados excitados: S1 e S2 e T2 Flechas verticais retas indicam processos associados a absoro ou emisso de radiao (fluorescncia ou fosforescncia) Flechas verticais sinuosas processos no-radiatvos (relaxao vibracional, converso interna, etc.) Anlise Instrumental

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Variveis que afetam fluorescncia e fosforescncia Tipos de transio *:
no ocorre, pois a absoro de radiao com max < 250 nm - desativao dos estados excitados por pr-dissociao ou dissociao; obs: 200nm 600kJ mol-1 (energia de ligao em muitas molculas orgnicas) n p* (maior eficincia quntica) : de corrente da absoro n p* com max > 250 nm tempo de transio 10-7 a 10-5 s p p*: proveniente da absoro p p* com max > 250 nm tempo de transio 10-9 a 10-7 s obs: entre as transies promotoras da fluorescncia prevalecer a que implicar um menor tempo de vida do estado excitado e/ou for menos energtica.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Variveis que afetam fluorescncia e fosforescncia Rendimento quntico ou eficincia quntica (F):
simplesmente a razo entre o nmero de molculas que sofrem fotoluminescncia e o nmero total de molculas excitadas.

Estrutura
Ainda que alguns compostos carbonlicos e alguns com estruturas de duplas ligaes altamente conjugadas fluoresam, a fluorescncia mais intensa e mais til encontrada em compostos com grupos aromticos com transies p p* de baixa energia.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia

Presume-se que nestes compostos (sobretudo os nitrogenados) a transio eletrnica n p* seja a de menor energia e que rapidamente se converte para um estado triplete suprimindo a fluorescncia

No apresentam fluorescncia

Entretanto, compostos heterocclicos condensados com anis benznicos exibem fluorescncia aumento da absortividade associada ao pico de absoro diminui a vida do estado eletrnico excitado singlete

Fluorescena

Apresentam fluorescncia
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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Efeito da substituio em anis aromticos por halognios efeito do tomo pesado aumenta a probabilidade de cruzamento intersistema para o estado triplete, diminuindo a eficincia quntica da fluorescncia. Iodobenzeno no exibe fluorescncia provvel pr-dissociao que deve ocorrer presena da ligao C I de fcil ruptura.

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Influncia da rigidez estrutural
Empiricamente observou-se que a rigidez da estrutura favorece a fluorescncia:

Baixa rigidez maior Kci Propicia um aumento da desativao no-radiativa Diminui a fluorescncia Maior rigidez promovida pelo CH2 menor Kci Aumenta a fluorescncia

F 0,2

F1

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Influncia do solvente, temperatura, pH e O2

T + colises intermoleculares diminuio da fotoluminescncia

converso externa

solventes viscosidade geram igual efeito (supresso colisional).

Efeitos de pH podem desfavorecer a fluorescncia O2 e outras espcies paramagnticas - fluorescncia, fosforescncia (cruzamento intersistemas) solventes contendo tomos pesados ou solutos contendo tais tomos em suas estruturas interaes spin-rbita cruzamento intersistemas desativao no-radiativa fluorescncia, fosforescncia.

Apresenta fluorescncia

No apresenta fluorescncia

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Influncia da concentrao do fluorforo

A potncia de emisso de fluorescncia F proporcional concentrao da espcie fluorescente, desde que em baixas concentraes (A < 0,05).

F = Kc
onde K um coeficiente de proporcionalidade que depende: - da absortividade (e) associada ao pico de absoro; - do rendimento quntico (F) da fluorescncia; - da potncia do feixe incidente (Po) da radiao excitadora; - do percurso ptico (b);

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Teoria da fluorescncia e fosforescncia
Desvios da linearidade

Altas concentraes (<0,05)

Auto-supresso (quenching)
Colises entre molculas excitadas provocam a transferncia de energia no-radiativa de um modo semelhante transferncia para molculas do solvente na converso externa.

Absoro secundria (inclui a auto-absoro)


Ocorre quando lemisso coincide com algum labsoro. O resultado a reabsoro da radiao por quaisquer molculas na soluo.

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