MODELO RATO

E DOENA AlZHEIMER

MI Cincias Farmacuticas Disciplina de Farmacologia II

Llia Leonardo

Novembro de 2011

MODELO RATO E DOENA ALZHEIMER

Doena Alzheimer (DA): mais comum forma de demncia entre os idosos Mais vulgar das doenas neurodegenerativas Os modelos de ratos trangnicos so ideais para estudar o Alzheimer familiar com ligao gentica 5% de todo o Alzheimer 95% restantes sem causa conhecida necessrio outro modelo

DOENA DE ALZHEIMER

Radicais livres nos estados de envelhecimento: desequilbrio entre a produo de espcies reactivas de oxignio e as defesas antioxidantes

Enzimas heme-oxigenase e superxido-dismutase encontradas nos neurnios dos doentes

COX 2 aumentada em reas do crebro envolvidas com a memria

COX 2 est relacionada com o depsito de protena betaamilide o que intensifica as suspeitas da sua participao em processos neurodegenerativos
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CYCLOOXYGENASE INHIBITORS: A NOVEL DIRECTION FOR ALZHEIMERS MANAGEMENT

Manish Nivsarkar, Aryamitra Banerjee,
Harish Padh
Pharmacological Reports, 2008, 60, 692-698

Stress Oxidativ o

Mecanism o base na

DA

Agentes que previne m dano oxidativ o

Eficcia no
tratament o da DA

PL activ a COX2

COX-2 tem um papel importante na neurodegenera o na DA

OBJECTIVO DO ESTUDO

Examinar o efeito de diferentes inibidores

da COX no stress oxidativo induzido pelo

alumnio num modelo de rato in vivo

ANIMAIS

Ratos Sprague Dawley (n=72) de ambos os sexos; peso mdio 209,17 7,66 g

Quartos com temp controlada (27C 1C) e humidade relativa 605%

Dietas certificadas para roedores

QUMICOS

AlCl3 Rofecoxib Flurbiprofeno e ibuprofeno

TRATAMENTO
1. Grupo controlo soro fisiolgico usado como veculo para todas as drogas, como para o alumnio 2. Grupo controlo da doena cloreto de alumnio 4,2mg/Kg diariamente durante 28 dias 3.Grupo teste 1 rofecoxib 2x/dia)/ibuprofeno (100mg/Kg) (0,83 mg/Kg)/flurbiprofeno (0,83mg/Kg

4.Grupo teste 2 - cloreto de alumnio (4,2 mg/Kg) + rofecoxib (0,83 mg/Kg)/flurbiprofeno (0,83mg/Kg 2x/dia)/ibuprofeno 100mg/Kg

6 animais/grupo eutanaziados ao 29 dia; foi removido o crebro intacto

e dividido em 2 hemisfrios (peroxidao lipdica e actividade da peroxido dismutase)
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PEROXIDAO LIPDICA

Reaco MDA:TBA, Ohkawa et all Quantidade de MDA formada na camada orgnica medida a 532 nm

ACTIVIDADE SOD

Homogeneizado tecido cerebral + 1 ml de Triton X 0,1% 100 (v/v) durante 20 min a 4C

Centrifugado a 1500 rpm a 4C 3 min Sobrenadante usado para determinao da actividade da superxido dismutase pelo mtodo de Marklund and Marklund

Clculos efectuados por grama de peso fresco

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NVEIS DE SUPERXIDO DISMUTASE CIRCULANTE

29 dia tratamento o sangue dos ratos foi colhido por puno

cardaca

Centrifugado a 4000 rpm 7 min a 4C; plasma separado e armazenado a -70C at ser analisado para a actividade SOD

Os restantes GV foram sujeitos extraco da SOD

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EXTRACO SOD DOS GV

GV lavados com soro fisiolgico 0,9% e diludos com gua

bidestilada para hemlise

1 ml lcool etlico e 0,6 ml clorofrmio para separar a hemoglobina

Tubos agitados e centrifugados; camada lcool-etanol aspirada e

diluda com 0,7 ml gua bidestilada

Actividade da SOD foi medida na camada hidro-alcoolica

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RESULTADOS

Animais

Diferenas significativas no peso corporal, consumo de comida, aparncia fsica

Tratamento

Alumnio significativamente os nveis de malonaldedo (MDA) significativo nos nveis MDA nos animais tratados com alumnio + rofecoxib Actividade SOD semelhante em todos os grupos (sem alteraes significativas)
O tratamento com rofecoxib serviu como um potente agente de reduo de radicais livres no crebro dos ratos

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RESULTADOS

Tratamento

MDA sem alteraes nos animais tratados com flurbiprofeno ou quando co-administrado com alumnio

SOD no grupo alumnio + flurbiprofeno relativamente ao grupo alumnio

Tratamento

com ibuprofeno falhou na proteco contra a peroxidao lipdica e no interferiu com a actividade da SOD Nveis de SOD circulante no diferiram entre qualquer dos grupos experimentais

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DISCUSSO
COX-2 pode desempenhar um papel importante no stress oxidativo da DA que pode ser controlada usando inibidores selectivos da COX-2 como o rofecoxib

Flurbiprofeno pode no ter um papel directo reduzindo os radicais oxi no crebro durante a DA mas, em vez disso, exerce o seu efeito atravs de uma interaco com o sistema anti-oxidante

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MODELO ANIMAL

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MODELO ANIMAL

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MODELO ANIMAL

Antioxidant es

Radicais livres

Caracterstica da DA
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MODELO ANIMAL
Anti-Inflamatrios No- Esterides (AINEs)

Inibidor da sntese de prostaglandinas

Inibidor selectivo da COX-2

Inibidor no especfico da COX-2

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MODELO ANIMAL
AINEs Mecanismo de Aco
Fosfolpidos de membrana
Fosfolipase A2

Ciclooxigenases
COX-1 - constitutiva COX-2 - induzida

cido Araquidnico

Prostaglandinas

Prostaciclina

Tomboxano
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MODELO ANIMAL

Ciclooxigenases
COX-1 - constitutiva COX-2 - induzida

Doena de Alzheimer
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FIM

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