Biologia Molecular

TRANSCRIO E TRADUO DE PROTENAS

email: fabianak@ufpel.edu.br

FABIANA SEIXAS

ABORDAGENS...
1. Replicao do DNA

2. Clula Eucaritica X Clula Procaritica 3. Transcrio; 4. Traduo.

Replicao
DNA
Trasncrio Reversa

DNA
Transcrio RNA Traduo Protena

Transcrio
o processo pelo qual uma molcula de RNA sintetizada a partir da informao contida na sequncia de nucleotdeos de uma molcula de DNA de fita dupla

A Transcrio representa a diversidade e a complexidade da expresso dos genes contidos em um determinado genoma

principalmente na transcrio que a clula exerce o controle da expresso gnica

DOGMA

Clula Eucaritica

Clula Procaritica

PROCARIOTO X EUCARIOTO

RNA

-Fita Simples;
-A,U,C,G; - Ribose

Estrutura do RNA
mRNA 1 a 5 % do RNA total rRNA 75 % do RNA total tRNA 10 a 15 % do total

tRNA

hnRNA RNA heterogneo nuclear snRNA RNA pequeno nuclear

rRNA

FASES DA TRANSCRIO

INCIO quando ocorre seqncia especfica no DNA;

reconhecimento

de

ALONGAMENTO quando os ribonucleotdeos so sucessivamente incorporados; TERMINAO quando seqncias no DNA so reconhecidas e a sntese interrompida.

RNA POLIMERASE

Fator (sigma)

Core

Haloenzima

RNA POLIMERASE

Fator sigma

FATOR SIGMA

Estrutura de um Gene

Promotor
DNA

Regio Codificadora

Terminador

Ribossomo

RNA

PROTENA

ESTRUTURA DE UM GENE DE EUCARIOTO

DNA

Promotor

Regio Codificadora

Stio de PoliA

hnRNA RNA

Intron
AAAAAAAAAA

Exon
mRNA
AAAAAAAAAA

CARACTERISTICAS DE UM PROMOTOR DE E. coli

-35 -10 +1 TTGACA ...TATAATATCGATTTAGATCCCATGAT

Regio 10: T A T A A T Regio 35: T T G A C A

As duas regies so separadas por 171 nucleotdeos O primeiro nucleotdeo (+1) geralmente uma purina (A ou G)

PROMOTORES DE GENES BACTERIANOS

-10

9 nucleotdeos

TRANSCRIO

FUNES DA RNA POLIMERASE

Reconhecer o promotor; Desnaturar o DNA expondo a seqncia a ser copiada; Manter as fitas de DNA separadas na regio da sntese; Manter o hbrido DNA:RNA estvel; Renaturar o DNA na regio imediatamente posterior sntese; Terminar a sntese do RNA.

TRANSCRIO

TRANSCRIO

TRANSCRIO

TRMINO DA TRANSCRIO

Independente da protena rho () (90% dos casos)

Dependente da protena rho ()
5 CCCAGCCCGCCTAAGCGGGCTTTTTTTTGAC 3
3 GGGTCGGGCGGATTCGCCCGAAAAAAACTG 5

Pareamento A-U

ENZIMAS DE RESTRIO

RNA MENSAGEIRO ANTISENSE

DNA fita codificadora DNA fita molde RNA transcrito

Animao replicao/transcrio

Cdigo Gentico e Sintese de Protenas

CDIGO GENTICO

a relao entre a seqncia de bases no DNA e a seqncia de aminocidos na protena

CDIGO GENTICO
UUU UUC UUA UUG
CUU CUC CUA CUG AUU AUC AUA AUG GUU GUC GUA GUG

Phe Phe Leu Leu

Leu Leu Leu Leu Ile Ile Ile Met Val Val Val Val

UCU UCC UCA UCG

CCU CCC CCA CCG ACU ACC ACA ACG GCU GCC GCA GCG

Ser Ser Ser Ser

Pro Pro Pro Pro Thr Thr Thr Thr Ala Ala Ala Ala

UAU Tyr UAC Tyr UAA stop UAG stop

CAU His CAC His CAA Gln CAG Gln AAU AAC AAA AAG Asn Asn Lys Lys

UGU UGC UGA UGG

CGU CGC CGA CGG AGU AGC AGA AGG GGU GGC GGA GGG

Cys Cys stop Trp

Arg Arg Arg Arg Ser Ser Arg Arg Gly Gly Gly Gly

GAU Asp GAC Asp GAA Glu GAG Glu

CDIGO GENTICO Caractersticas

Pareamento cdon:anticdon;
Degenerao um mesmo aminocido pode ser codificado por vrios cdons diferentes; No ambigidade cada cdon corresponde a somente um aminocido;

Universalidade o cdigo gentico o mesmo nos mais diversos organismos (exceo: protozorios ciliados e mitocondiras); Utilizao preferencial de cdons (codon usage).

CDIGO GENTICO

TRADUO

Consiste na transformao da mensagem contida no RNAm, via RNAt, na sequncia de aminocidos que constituem a protena.

Intervenientes:
RNAm RNAt Ribossomas (RNAr) Aminocidos Sistemas enzimticos

ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS

Procariotos
Subunidade 30S (rRNA 16S, 21 protenas) Subunidade 50S (rRNA 23S e 5S, 31 protenas)
Total 70S

Eucariotos
Subunidade 40S (rRNA 18S) Subunidade 60S (rRNA 28S, 5,8S e 5S)
Total 80S

ESTRUTURA DOS RIBOSSOMOS

Ribossomos

tRNA
-Estrutura secundria com grampos e alas formando um trevo -Alto nmero de bases modificadas depois da sua transcrio

tRNA

tRNA

Existem 61 cdons e 40 tRNAs. Como resolvida a questo dos 21 cdons restantes?

Trasncrio

Traduo

Etapas da traduo

A sntese proteica ocorre em 3 etapas sucessivas:

1. Iniciao
2. Alongamento 3. Finalizao

RIBOSSOMAS
Stio de ligao do ribossomo e cdon de iniciao

5 ...AGGAGGxxxxxxxAUG...3

RBS ou Seqncia Shine-Dalgarno

(raramente GUG ou UUG)

Cdon de iniciao

Incio da traduo

AminoaciltRNAsintetase

Aminoacil- tRNA Met-tRNA

INICIAO

INICIAO

ALONGAMENTO

Traduo

ALONGAMENTO

Traduo

TERMINAO

Antimicrobianos
Substncia produzida por um organismo ou obtida sinteticamente que, em solues diludas, destri as bactrias e outros microrganismos ou inibe o seu desenvolvimento.
ANTIBITICOS

Classificao dos Antimicrobianos

Com base no mecanismos de ao:
1. Parede bacteriana: inibio da sntese da parede; 2. Membrana celular: alterao da permeabilidade seletiva 3. Ribossomos: alterao na sntese ou interrupo da sntese protica; 4. DNA e RNA: inibio da sntese do material gentico; 5. Metablitos: inibio da sntese de metablitos essenciais.

Agentes Antimicrobianos

Agentes Antimicrobianos
1. Inibio da Sntese de Parede Celular - Impedem a sntese completa da Peptideoglicana
- Atua em Clulas em crescimento

Penicilinas

Agentes Antimicrobianos
1- Inibio da Sntese de Parede Celular

Penicilinas

Agentes Antimicrobianos
2. Leso na Membrana Plasmtica
Ligao com fosfolipdeos

Alterao da Permeabilidade Ruptura da Membrana Polimixina B

3. Ribossomos (inibio da sntese de protenas)

Agentes Antimicrobianos
4. DNA e RNA: Inibio da replicao e transcrio

Rifampicina e Quinolonas

Podem interferir com DNA e RNA das clulas eucariticas

Agentes Antimicrobianos
5. Inibio da Sntese de Metablitos Essenciais
PABA (Ac. Paraminobenzico)
Enzima + antibitico Ac. Flico

Inibio Acidos Nucleicos Aminocidos

Sulfas

Antibiticos e Sntese Proteica

Antibitico
Estreptomicina Tetraciclina Cloranfenicol Eritromicina

Clulas-alvo
Procaritica Procaritica Procaritica Procaritica

Efeito
- Inibe a iniciao - Provoca erro na leitura do RNAm - Inibe a ligao do aminoacilRNAt ao stio A do ribossoma - Inibe a actividade da peptidil transferase - Liga-se subunidade 50S do ribossoma e inibe a translocao - Provoca a terminao prematura da cadeia, actuando como um anlogo do aminoacilRNAt - Inibe a actividade da peptidil transferase

Puromicina Cicloheximida

Procaritica e Eucaritica Eucaritica