BIOTECNOLOGAS APLICADAS A LA REPRODUCCIN DE ESPECIES ACUCOLAS

Produccin directa de progenies monosexo va reversin sexual del sexo fisiolgico (andrgenos y estrgenos)
Integrantes : Gomez Valeria Guerrero Karolina Moya Gabriel

INTRODUCCION

El cultivo de truchas o tructicultura se ha venido presentando como una opcin productiva en el sector agropecuario, con muy buenas ventajas para su implementacin y desarrollo debido a diversos factores como la cantidad y calidad de las aguas en las regiones andinas. La trucha arcoris (O. mykiss) representa una importante fuente de protena de origen animal, su cultivo puede fortalecer la seguridad alimentaria de las comunidades pobres y aisladas del pas. Igualmente presenta una buena demanda en los principales mercados nacionales, ya que es apreciada por su sabor y valor nutricional. La trucha arcoris O. mykiss siempre ha contado con una buena demanda tanto a nivel nacional como regional, por lo que su comercializacin esta garantizada Por lo tanto, es necesario desarrollar tecnologas con el fin de optimizar la produccin y suplir esta necesidad del mercado. Una de ellas es contar con poblaciones de animales solo hembras bajo un manejo hormonal. El tratamiento consiste en aplicar una hormona masculina para que los individuos genotpicamente hembras se conviertan en machos funcionales (neomachos = produccin de semen), que puedan ser utilizados como reproductores para cruzarlos con hembras normales, y producir una poblacin de solo hembras.

OBJETIVOS:
Conocer cul es el mtodo ms adecuado para producir reversin de sexo tomando en cuenta sus ventajas y desventajas. Conocer algunos parmetros importantes para la reversin sexual como las hormonas que se van a utilizar, la dosis, la duracin del tratamiento, la edad, el peso y la talla.

REVERSION SEXUAL

Es una tcnica de control sexual directa en la cual se hace masculinizacin o feminizacin por tratamientos con andrgenos o estrgenos durante el desarrollo temprano de los peces de produccin En especies donde la hembra es cromosmicamente homogamtica (hembras: XX / machos: XY), se puede utilizar una tcnica donde en una primera etapa se realiza la masculinizacin de hembras genotpicas (XX), provenientes de un lote de peces de ambos sexos (XX y XY) generando as un lote de hembras revertidas a machos (neomachos), los cuales forman testculos y producen semen, pero no poseen conductos espermticos y por esto las gnadas deben ser removidas quirrgicamente, cuando maduren para obtener el esperma Luego se realiza la fertilizacin de una ova normal (X) con el esperma producido por los neomachos, la cual lleva solamente el cromosoma (X) y todo esto llevar a una descendencia todo hembra (XX) genotpica y fenotpicamente.

REVERSIN HORMONAL DEL SEXO FISIOLGICO.

Bsicamente existen dos formas para la administracin de las hormonas: por inmersin o por ingestin. La segunda es la ms practicada, incorporando la hormona en la dieta normal, con la cual los peces son alimentados por un perodo dado. Las variables a considerar son la naturalezade la hormona, concentracin en la dieta, lapso de tiempo del suministro y el momento del inicio del tratamiento. Para producir lotes todo macho (masculinizacin) se emplea hormonas (andrgenos), tales como, testosterona, 11 ketotestosterona y androstenediona, de origen natural. Entre los sintticos, el ms usado es 17 metiltestosterona.

La hormona se incluye en el alimento disuelto en etanol absoluto, el que se evapora posteriormente. El rango de concentracin se ha determinado por ensayo y error; pero la tendencia es usar la menor concentracin que permita tener un porcentaje apropiado de reversin.
En trucha arco iris, los mejores resultados se obtienen al iniciar el tratamiento con la primera alimentacin. Con relacin al tiempo de suministro, los mejores resultados se obtienen entre los 60 y 90 das. Tiempos superiores a 120 das producen porcentajes elevados de esterilidad, lo que tambin se produce al aumentar la concentracin de la hormona (Daz et al., 2005).

En peces tambin es factible la feminizacin mediante el tratamiento hormonal con estrgenos, produciendo lotes todo hembra.
Estos tratamientos son menos eficaces en revertir los machos a hembras y por lo tanto se necesitan dosis ms elevadas para producir buenas tasas de reversin. Otra diferencia importante con la masculinizacin es que los tratamientos orales deben ser acompaados de inmersin en soluciones de estrgenos. El estrgeno ms usado es el 17 estradiol, que es de fcil obtencin y gran estabilidad qumica. Este es incluido en el alimento en una solucin de etanol absoluto (Yamamoto, 1953).

METODOLOGIA

(Se evaluaron dos tcnicas de reversin sexual mediante la hormona 17-metil testosterona)

Tratamiento 1: Reversin sexual por suministro de la hormona en el alimento.

Al momento de la absorcin del saco vitelino y a partir de la apertura de la boca del alevino, aproximadamente 15 das posteclosin, se inici el suministro de alimento concentrado durante 60 das, el cual contena un 45% de protena. Preparacin del alimento concentrado: La dosis empleada fue de 0.5 mg/Kg de alimento, disuelta en 57 ml de alcohol etlico al 97% y luego vertida en 100 ml de aceite de cocina. La mezcla fue distribuida sobre una capa fina del alimento y se homogeniz

Tratamiento 2: Reversin sexual por inmersin.

Se realizaron tres inmersiones en una solucin de 1 mg de hormona diluida en 5 ml de alcohol etlico/L de agua (En cada inmersin se utilizaron 2 litros de agua): La primera inmersin se hizo al momento de la recepcin de las ovas durante la aclimatacin, con aproximadamente 15 das post-fertilizacin. La segunda se realiz en el momento de la eclosin al cuarto da despus de la recepcin cuando se encontraron ms del 80% de las ovas eclosionadas. La tercera se llev acabo a 3 das despus de la ltima inmersin, cuando ya eran larvas.

DIAGRAMA DE FLUJO DE TECNICAS UTILIZADAS

Tratamiento 1 : REVERSIN SEXUAL POR SUMINISTRO DE LA HORMONA EN EL ALIMENTO

HORMONA 17METIL TESTOSTERONA 0.5 MG

1 KG DE ALIMENTO

57 ML DE ALCOHOL ETLICO AL 97%

HOMOGENIZAR

VERTER EN EL ALIMENTO

100 ML DE ACEITE DE COCINA

SUMINISTRAR durante 60 DIAS

15 DAS POSTECLOSIN

Tratamiento 2:

REVERSIN SEXUAL POR INMERSIN.

1 mg de HORMONA 17-METIL TESTOSTERONA en 5 ml de alcohol etlico/L de agua

PRIMERA INMERSION Recepcin de las ovas durante la aclimatacin (15 das post-fertilizacin)

SEGUNDA INMERSION 4 DIA S DESPUES DE LA RECEPCION( 80% de las ovas eclosionadas)

TERCERA INMERSION 3 das despus de la ltima inmersin (larva)

Tratamiento Control:

Este lote estuvo bajo las condiciones de cultivo estndar para trucha arcoiris (O. mykiss), por lo tanto, no fue sometido a ningn tratamiento hormonal con el fin de realizar una comparacin del desarrollo gonadal y en peso y talla con aquellos animales sometidos a los tratamientos hormonales. Se trabaj con tres replicas por tratamiento, cada replica con 200 ovas. Se asumi un porcentaje de mortalidad hasta la etapa de juveniles del 25%

GRFICOS TABLAS DE LA APLICACIN DE LA TCNICA

En la tabla 2 se presenta la cantidad de animales observados y el porcentaje de cada sexo, identificados a travs de la tcnica de squash. En el Control se observaron los resultados esperados al obtener solo hembras (100%) en el total de los animales muestreados. En el tratamiento hormonal se observaron animales revertidos de forma parcial (intersexo) (11.5% para ambos tratamiento) o totalmente (machos) (28.85% y 11.36% en Alimento e Inmersin, respectivamente) (Ver anexo1-5). Se observ un mayor efecto de la hormona en el tratamiento Alimento que en el de Inmersin.

En las figuras 3 y 4 se observan los resultados de la estadstica descriptiva para los pesos y las tallas en los diferentes tratamientos. En ambos, la media aritmtica siempre present un valor en aumento con varianza variable y un coeficiente de Variacin para las tallas con un rango entre 8 y 14, sugiriendo una homogeneidad en los datos. No as para los pesos que presentaron una mayor variacin.

En las figuras 3 y 4 se observan los resultados de la estadstica descriptiva para los pesos y las tallas en los diferentes tratamientos. En ambos, la media aritmtica siempre present un valor en aumento con varianza variable y un coeficiente de Variacin para las tallas con un rango entre 8 y 14, sugiriendo una homogeneidad en los datos. No as para los pesos que presentaron una mayor variacin.

ANLISIS: METODOLOGA Y RESULTADOS

La hormona 17 -metitestosterona, a las dosis utilizadas, produjo un efecto masculinizante tanto en el tratamiento Inmersin como en el de Alimento. La reversin fue baja en ambos, sin embargo se present una mayor reversin en el tratamiento Inmersin que en el de Alimento En ambos tratamientos se obtuvieron animales revertidos parcialmente (intersexo). Se presentaron menores valores en las variables de peso y talla en los animales tratados con hormonas respecto al control, debido a factores ambientales (tamao de la partcula de concentrado en el tratamiento alimento y densidades mayores por menor mortalidad en inmersin) que no fueron controlados. Es ms rentable producir neomachos a travs del uso de la hormona por el mtodo de inmersin en una solucin que contenga la hormona que la aplicacin de la misma en el alimento.

El costo beneficio se determin partiendo de que los costos fijos para todos los tratamientos fue exactamente el mismo (alimento, mano de obra, valor de ovas) y conociendo el precio por gramo de la hormona utilizada, el cual fue suministrado por la empresa Acuagranja LTDA. La hormona 17 metiltestosterona marca SHEBEN en una presentacin de 10gr cuesta $145.000 pesos colombianos esto equivale a $ 14.500 pesos 21 colombianos por gramo.

CONCLUSIONES :

Esta tcnica de reversin sexual no solo tiene implicaciones en el cultivo de organismos acucolas para el consumo humano como es el de la tilapia, sino que se podra usar como punto de partida para la introduccin de maricultivos monosexo de esta o de alguna otra especie del gnero, a su vez implementar mtodos o tcnicas que podran llegar a ser aplicables para el cultivo de organismos estrictamente marinos, ya sea para alimento o de ornato.

En peces tambin es factible la feminizacin mediante el tratamiento hormonal con estrgenos, produciendo lotes todo hembra. Estos tratamientos son menos eficaces en revertir los machos a hembras y por lo tanto se necesitan dosis ms elevadas para producir buenas tasas de reversin. Otra diferencia importante con la masculinizacin es que los tratamientos orales deben ser acompaados de inmersin en soluciones de estrgenos. El estrgeno ms usado es el 17 estradiol, que es de fcil obtencin y gran estabilidad qumica. Este es incluido en el alimento en una solucin

RECOMENDACIONES:

Se sugiere trabajar con truchas reproductoras sanas y fuertes para que soporten el estrs producido por el traslado y desove. Es importante mantener todas las condiciones aspticas y de bioseguridad durante todas las fases de reversin sexual para obtener mejores resultados. Se recomienda, poner mucha atencin en las proporciones de hormonas aplicada en los alimentos suministrados a los peces. Con relacin al tiempo de suministro, se recomienda realizar la reversin sexual entre los 60 y 90 das. Tiempos superiores a 120 das producen porcentajes elevados de esterilidad, lo que tambin se produce al aumentar la concentracin de la hormona

Bibliografia

Meja A Pablo, Romn A Mara, Porcentajes de reversin sexual en trucha arcoris (Oncorhynchus mykiss) para la obtencin de neomachos mediante la aplicacin de la hormona masculinizante 17 -metil testosterona por el mtodo de ingestin (larvas) e inmersin (ovas y larvas), documento en lnea, consultado en 2012-02-06, disponible desde internet en http://bdigital.ces.edu.co:8080/dspace/bitstream/123456789/5 14/1/Porcentajes% 20de%2 0reversion%20sexual%20en%20trucha.pdf Muoz Sevilla, Daysi Maribel (2008). Induccin de tripoloida mediante la estandarizacin del choque trmico en trucha arco iris (Oncorhynchus Mykiss) en el Centro de Investigaciones Acuicolas Ceniac, Provincia de Napo, cantn Quijos, parroquia Papallacta. Facultad de Ingeniera en Biotecnologa. ESPE. Sede Sangolqu, documento en lnea, consultado en 2012-02-06, disponible desde internet en http://repositorio.espe.edu.ec/bitstream/ 21000/668/1/TESPE-020342.pdf