FISIOLOGA BACTERIANA

DR. DENNIS LPEZ VACA COCHABAMBA-BOLIVIA

sumario
Nutricin 2. Factores Ambientales 3. Metabolismo bacteriano 4. Mtodos de cultivo
1.

NUTRICIN

Las bacterias necesitan elementos

para la sntesis biolgica:

Carbono, nitrgeno, azufre, fsforo, minerales. Factores ambientales para el crecimiento.

FUENTES DE CARBONO.- CO2 reducido por H2O. AUTTROFOS: No necesitan nutrientes orgnicos para su desarrollo QUIMIOLITTROFOS: Usan sustratos inorgnicos como: H+ y tiosulfatos para reducir el CO2 fuente de carbono. HETERTROFOS: Necesitan carbono orgnico para metabolismo.

FUENTES DE NITRGENO: N2 forma parte de protenas, cidos nucleicos y otros = 5% del peso seco de una bacteria tpica. Amoniaco (NH3) difunde por conductos transmembrana. Capacidad de asimilar N2 reducido = fijacin de nitrgeno. Captan N2 de aminocidos por desaminacin = amonificacin.

 Nitratos

Nitritos por asimilacin y reduccin. Por ejemplo algunas bacterias (Nitrobacter) convierten Nitrato a N2 gaseoso por desnitrificacin.

FUENTES DE AZUFRE: El azufre es componente importante de muchas estructuras y coenzimas bacterianas. El azufre en su forma elemental no puede utilizarse por plantas o animales, algunos auttrofos pueden oxidarlo a sulfato (SO4). La mayora de los microorganismos puede usar sulfato al reducirlo a cido sulfhdrico (H2S), pero para algunos de ellos es txico.

FUENTES DE FSFORO: El fosfato(PO4) es necesario como componente del ATP, cidos nuclicos y coenzimas como NAD, NADP y flavinas, adems de lpidos (fosfolpidos, lpido A), paredes celulares (cido teicoico). El fosfato se asimila como fosfato inorgnico libre (Pi)

FUENTES DE MINERALES: Minerales necesarios para funcin de las enzimas. Magnesio(Mg++) = coenzimas de citocromos, integridad de ribosomas Hierro (Fe++) = derivados de porfirinas, coenzimas Potasio (K+) = funcin e integridad de ribosomas Calcio (Ca++) = paredes celulares Sodio (Na+) = Desarrollo de microroganismos. Se obtienen del agua corriente o en contaminantes del cultivo

FACTORES AMBIENTALES PARA EL CRECIMIENTO

Unos son: COMPUESTOS ORGNICOS para el desarrollo de la clula, pero que no se autosintetizan. Otros: CONDICIONES para las NECESIDADES DE CRECIMIENTO. Las bacterias pueden crecer en lquidos (nutrientes agregados) o en slidos agar = polisacrido de algas marinas.

FACTORES AMBIENTALES PARA EL CRECIMIENTO

1. NUTRIENTES: Debe existir lo siguiente:

Donadores de aceptores de H+ Carbono = 1g/L Nitrgeno = 1g/L Azufre, fsforo = 50mg/L Minerales (oligoelementos) = 0.1 1 mg/L Aminocidos, purinas, pirimidinas = 50 mg/L Vitaminas = 0.1 1 mg/L

2. PH: Microorganismos tienen un PH ptimo muy

estrecho.

Neutrolfilos: 6.0 8.0 Ph Acidfilos: 3.0 Ph Alcalfilos o basolfilos : 10.5 Ph

3. TEMPERATURA: Las bacterias varan

ampliamente en sus intervalos ideales de temperatura.

Psicrfilos = 15 20c Mesfilos = 30 37c (la mayora) Termfilos = 50 60c Hipertermfilos = 100c a ms Golpe de calor = Al aumentar T se sintetizan protenas que estabilizan a protenas celulares. Choque de enfriamiento = Lisis celular, por ej: E. Coli muere 90% Pero si el enfriamiento es gradual y lento solo se inactivan, no mueren.

4. OXIGENACIN O AIREACIN: Oxgeno entra

a cultivo por presin, difcil su difusin, sale del cultivo por agentes reductores o sellado al vaco.

AEROBIOS: Usan el O2 como aceptor de H+, Productos del metabolismo = H2O2(perxido) + (Fe++) = Hidroxilo (OH) Catalasa y superoxido dismutasa catalizan reaccin = dao molecular y dao del DNA ANAEROBIOS FACULTATIVOS: ANAEROBIOS OBLIGADOS: Sustrato diferente al O2 como aceptor de H+.

5. CONCENTRACIN DE SALES Y FUERZA

INICA DEL MEDIO: La mayor parte de las bacterias son capaces de tolerar amplias variaciones de presin osmtica y concentracin de sales. Halfilos:Los que requieren concentraciones elevadas de sal. Osmfilos: Los que requieren presiones osmticas elevadas.

METABOLISMO BACTERIANO
ENERGA METABLICA: Motor para el metabolismo bacteriano. Fermentacin: Fosforilacin del sustrato en ATP Respiracin: Anloga al acoplamiento de pendientes para descargar una batera Reduccin qumica por transportadores de electrones = fuerza motriz protnica a travs de membrana. Fotosntesis: Similar a respiracin, pero en que se crea el reductor y el oxidante por fotoqumicos = energa luminosa absorvida por pigmentos de membrana.

MEDIOS DE CULTIVO
Existen por lo menos 2000 medios de cultivo

distintos para poder cultivar bacterias. Los podemos dividir, segn su consistencia, en:
1. 2. 3.

Lquidos Semilquidos Slidos

MEDIOS DE CULTIVO
Segn su funcin, en: 1. No selectivos 2. Selectivos Enriquecidos

simples (carbn vegetal=B.Pertussis) Altamente enriquecidos (caldos = Cerebrocorazn), biolgicos (embrin de pollo) Diferenciales : inhiben el crecimiento de muchas bacterias, solo permiten desarrollo de un gnero espcie

MEDIOS DE CULTIVO
Para su desarrollo en los medios de cultivo, las

bacterias necesitan elementos como: Carbono, nitrgeno, azufre, fsforo, minerales.

Adems de: Factores ambientales para el

crecimiento. (ya desarrollados).

MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS DE CULTIVO MS USADOS: 1. Agar sangre: Elaborado con 5% de sangre de carnero, en l proliferan: Aerobios y anaerobios facultativos 2. Agar chocolate: Contiene sangre calentada, con suplementos o sin ellos, en l proliferan: Neisseria y haemophilus que no lo hacen en agar sangre.

3. Agar Mac Conkey (EMB = Eosin-Methylene blue):

Es el 3 tipo de medio que se usa con frecuencia en el trabajo diario de laboratorio. Es selectivo para bacilos Gramnegativos entricos.
4. Otros..