HPLC

(HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY) Cromatografa liquida de alta calidad.

*el compuesto pasa por la columna cromatografca a travs de la fase estacionaria (normalmente, un cilindro con pequeas partculas redondeadas con ciertas caractersticas qumicas en su superficie) mediante el bombeo de lquido (fase mvil) a alta presin a travs de la columna. *La muestra a analizar es introducida en pequeas cantidades.

*La utilizacin de presin en este tipo de cromatografas incrementa la velocidad lineal de los compuestos dentro de la columna.
*Los disolventes ms utilizados son el agua, el metanol y el acetonitrilo.

Esta maquina tiene varias partes las cuales cumplen una funcin especifica en la cromatografa.

Depsitos para la fase mvil

Recipientes inertes. que suelen ser botellas de vidrio y tubos de tefln provistos de aditamentos indispensables para eliminar los gases disueltos y partculas que pudiera tener la fase mvil

Tipos de elucin
Elucin: Arrastrar mediante un lquido (o fluido) o solvente sustancias adheridas o absorbidas.
Elucin isocrtica: Separacin con disolvente de composicin constante. Elucin con gradiente: Se utilizan dos o tres disolventes de distinta polaridad y se vara la composicin de forma continua o mediante etapas escalonadas.

Bomba

Son necesarios para conseguir y regular la presin y velocidad de flujo de la fase mvil. Cuando la fase mvil es una mezcla de solventes, la bomba se programa para tomar los diferentes solventes en una proporcin determinada

Columnas analticas Acero inoxidable (hasta 10000 psi) 10-30 cm longitud 4-10mm dimetro interno

1-10m tamao de partcula

Pre columnas -Se colocan delante de la columna para eliminar la materia en suspensin y contaminantes del disolvente.-La composicin del relleno debe ser semejante a la columna analtica

Tipos de rellenos de la columna

Pelicular Bolas de vidrio o polmero, no porosas y esfricas Sobre su superficie se deposita una capa delgada y porosa de slice, almina o una resina de intercambio inico Se utilizan ampliamente en las pre columnas Partcula porosa Micro-partculas de slice

Respondern a una propiedad de la fase mvil Caractersticas deseadas: Sensibilidad adecuada Estabilidad y reproducibilidad buenas Respuesta lineal extendida a varios rdenes de Magnitud Tiempo de respuesta corto Respuesta rpida e independiente del caudal Manejo sencillo Respuesta selectiva a algunos analitos

Sistema para el tratamiento de datos

Es indispensable para registrar los cambios en alguna propiedad en funcin del tiempo. La representacin grfica de estos registros se llama crometograma. En estos registros aparece una serie de picos simtricos sobre el eje de los tiempos para la identificacin cuantitativa (rea bajo los picos) y cualitativa (posicin en el eje) de los componentes de una muestra.