SEDIMENTACION CON LA FUERZA GRAVITATORIA (g)

La velocidad de sedimentacin de una

partcula puede obtenerse igualando el producto de su velocidad u por el factor o coeficiente de friccin f o la resistencia opuesta por el medio a la partcula (que si se supone esfrica viene dado por f =pnr ) a la fuerza de la gravedad que actu sobre la partcula (supuesta esfrica)

A partir de esta ecuacion:

Como puede verse , la velocidad de sedimentacin es directamente proporcional a la segunda potencia de su radio e inversamente proporcional a la viscosidad del medio.

SEDIMENTACION CON FUERZA DE LA GRAVEDAD

Tambin depende del termino en el que sucede la sedimentacin, por ejemplo una diferencia seria cuando tenemos una emulsin de agua y aceite , las partculas en vez de sedimentar ascienden a la superficie ( lo inverso de la sedimentacin esto es formacin de crema )

SEDIMENTACION CON LA FUERZA CENTRIFUGA (G)

Se desarrollo un mtodo con fuerza gravitatoria y aos despus se implemento un mtodo con el empleo de aceleraciones, se diseo una ultracentrfuga para altas aceleraciones y efectu mediciones de sedimentacin y de equilibrio de sedimentos, dando as a la qumica de los sistemas dispersos una poderosa herramienta para investigar dispersiones coloidales y macromoleculares .

La aceleracin por un campo centrifugo (G) viene dada por:

G= w2x

donde w es la velocidad angular y x distancia desde el centro de rotacin.

la

En nuestro estudio de la difusin no hemos tomado en cuenta los efectos de campo externos sobre el sistema y hemos supuesto que todas las partculas estn uniformemente distribuidas en el estado de equilibrio. Eso no es del todo correcto, pues las partculas coloidales tienen tamaos suficiente para que la fuerza de la gravedad, o de otro campo gravitatorio, tienda a de postrarlas en el fondo de recipiente que contiene la dispersin..

En caso de moleculas gaseosas, los nmeros de moleculas, n en la parte superior y n en la inferior de una columna de gas de altura h.

Siendo g la constante gravitatoria y M el peso molecular del gas.

En el caso de sistemas coloidales, pondramos la masa de la partcula , m , y si la partcula es esfrica, por la ecuacin:

Donde g es la densidad de la partcula,, g , la del medio de dispersin y r el radio de partcula, tendernos:

Es evidente que cuanto mayor sea m tanto mayor ser la razn n/n o tanto mayor la diferencia de concentraciones en los niveles de una columna dada de dispersin coloidal.

Consiste en..
Un importante conjunto de poderosos mtodos (velocidad y equilibrio de sedimentacin) para la determinacin del tamao, la forma global aproximada, y el grado de homogeneidad de protenas y otras macromolculas biolgicas en disolucin.

Estos mtodos estn especialmente adaptados para la deteccin y la caracterizacin cuantitativa (estequiometra, afinidad, reversibilidad) de las interacciones que dan lugar a la formacin de complejos macromoleculares, que incluyen interacciones protenaprotena, DNA- protena y receptor- ligando [Lebowitz et al. (2002) Protein Sci. 11:20672079; Minton (2000) Exp. Mol. Med. 32:1-5; Rivas et al. (1999) Methods 19:194-212].

Descripcin
Ultracentrifuga de sobremesa, modelo OPTIMA MAX, marca Beckman Coulter, puede generar hasta 130.000 rpm. con un valor mximo de 1.019.000 g, puede albergar volmenes de muestra por tubo desde 0,2 a 8 ml.

Equipada con rotores

Rotor de ngulo fijo de titanio tipo MLA-80. Velocidad mxima

80.000 rpm. Fuerza mxima 444.000 g. Capacidad mxima 64 ml. en 8 tubos de 8 ml. Factor K de 29. Completo, con todos los accesorios necesarios para su uso. Rotor basculante de Aluminio/Titanio tipo TLS-55. Velocidad mxima 55.000 rpm. Fuerza mxima 259.000 g. Capacidad mxima 8,8 ml. en 4 tubos de 2,2 ml. Factor K de 50. Completo, con todos los accesorios necesarios para su uso. Rotor de ngulo fijo de titanio tipo TLA-110. Velocidad mxima 110.000 rpm. Fuerza mxima 657.000 g. Capacidad mxima 40,8 ml. en 8 tubos de 5,1 ml. Completo, con todos los accesorios necesarios para su uso. - Kit Selladora de Tubos (comprobar los accesorios y ver si coincide la referencia).

Rotor de ngulo fijo de titanio tipo MLA-80

Tubo

Accesorios
requeridos Velocidad mx/

Dimensiones/volum en

RCF/k Factor
Descripcin Descripcin

16 x 58 mm / 8 ml

Quick-Seal polyallomer

Noryl floating spacer

80 000 rpm/ 444 000 x g 29 80 000 rpm/

16 x 64 mm / 6.5 ml

Thickwall polycarbonate

ninguno

418 000 x g 19

Rotor basculante de Aluminio/Titanio tipo TLS-55

Tubo Dimensiones/vol umen 11 x 34 mm/2.2 ml Accesorios requeridos Descripcin Descripcin 55 000 rpm/ ninguno 259 000 x g 50 55 000 rpm/ ninguno 259 000 x g Velocidad mx/

RCF/k Factor

Thinwall polyallomer

11 x 34 mm/1.4 ml

Thickwall polyallomer

50 55 000 rpm/
Delrin adapter 249 000 x g 23

7 x 20 mm/230 l

Thickwall polycarbonate

Rotor de ngulo fijo de titanio tipo TLA-110

Tubo Accesorios requeridos Velocidad mx/ RCF/k Factor Dimensiones/volumen Descripcin Descripcin 110 000 rpm/ Delrin floating spacer 657 000 x g 13 110 000 rpm/ 13 x 48 mm/4.7 ml OptiSeal, bell-top Ultem spacer 657 000 x g 12 Thickwall polycarbonate 110 000 rpm/ ninguno 657 000 x g

13 x 51 mm/5.1 ml

Quick-Seal polyallomer, bell top

13 x 56 mm/3.2 ml

15
70 000 rpm/ Delrin adapter 206 000 x g 19

11 x 39 mm/1.5 ml

Microfuge, polyallomer (capped)

Utilidad Separacin gravimtrica

Aplicaciones

de muestras en general. Fraccionamiento celular, separacin de fases.

Biologa molecular y celular, fisiologa animal y vegetal, ciencias qumicas, ecologa, gentica y microbiologa

Un factor que afecta la sedimentacin de las partculas es la viscosidad del medio. En 1856 Stokes propuso que la fuerza friccional, F, que acta en una partcula esfrica de radio rp es relacionada a la viscosidad, h, por la siguiente ecuacin: F= 6 p h rp dr/dt Donde dr/dt es la velocidad de la partcula. La fuerza que experimenta una partcula no est slodeterminada por la fuerza gravitacional, g, sino tambin, por los efectos de flotacin

que reflejan las diferencias en la densidad del medio dm y de la partcula dp, por lo que tenemos:

(dm - dp) V g = 6 p h rp dr/dt V= volumen de la partcula

Puntualizando en las ecuaciones de Stokes, si una partcula esfrica se sedimenta en un campo gravitacional, la fuerza que causa que se sedimente en un fluido es igual a la masa efectiva de la partcula multiplicada por la aceleracin de la gravedad. Masa efectiva es: La masa de la partcula MENOS la masa del fluido desplazado por sta.

p: Fuerza que causa el asentamiento. pf: es la densidad del fluido g: Es la aceleracin debida a la gravedad.

r: radio de la partcula.
w: velocidad angular. x: distancia desde el centro de la rotacin.

En la sedimentacin centrfuga surge una complicacin debido a que la velocidad de la partcula depende no slo del tamao de sta, como en la sedimentacin gravitacional, sino tambin de su posicin radial.

Como lo muestra la siguiente ecuacin

La velocidad de la partcula se incrementa al aumentar la distancia radial ra desde el eje de rotacin. Debido a esto, la concentracin de partculas por debajo de la zona de medicin disminuye de forma exponencial con el tiempo de sedimentacin. A esto se le llama con frecuencia efecto de dilucin radial.