ALCANCES DEL PROYECTO GENOMA HUMANO

su impacto en la medicina contempornea.

Patricia Arancibia, Ph.D. Depto. de Ciencias Bsicas. UBB-Chilln.

MAPA DEL GENOMA HUMANO.

El genoma es...

El conjunto completo de genes de un organismo, donde se guarda toda la informacin genetica.

El cuerpo humano contiene 50 billones de clulas

Cada clula posee un ncleo. Cada ncleo posee una molcula de ADN.

El ADN est organizado en 23 pares cromosmicos.

Cada par cromosmico est constitudo por una copia de ADN materna y otra copia de ADN paterna..

Los genes son secuencias de ADN.

Estas secuencias, de longitud variable, contienen las instrucciones para fabricar protenas, los ladrillos de la vida.

GEN: SECUENCIA DE TRES BASES.

ADENINA

CITOSINA

GUANINA

TIMINA

ATG CTA AAA AGT TTT ATA AAA

GRUPOS DE TRES BASES = UN AMINOCIDO. UNA SECUENCIA DE AMINOCIDOS ES UNA PROTENA. SI LA SECUENCIA EST MAL ESCRITA, LA PROTENA NO SE FABRICA O SE FABRICA DEFECTUOSA.

Human Genome Project (HGP)

1990-2003. Identificar 80,000 genes ADN humano. Determinar sus secuencias. Hacer Bases de Datos. Desarrollar herramientas de anlisis. Resolver temas ticos, legales y sociales.

Nmero de Genes localizados.

Previo al comienzo del Proyecto: 5000 genes. En 1996 el consorcio haba localizado 16.000 genes, en 1998 la cifra aument a 30.261 genes. Se estima que el nmero de genes humanos es de 60000 a 80000.

N de genes mapeados entre 1972-1998.

35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000 0

98 1 705 9 80 13 179021 25

N de Genes

Mapeo del genoma completo

Mapeo Gentico (Linkage) Mapeo Fsico (orden de fragmentos de ADN) Secuenciar ADN

Herramientas de la revolucin. Ingenieria Genetica.

ADN recombinante Terapia genica. Organismos transgenicos. Lineas de organismos geneticamente identicos.

ADN recombinante.

Segmentos de genes de diversas fuentes se recombinan in vitro y se transfieren a celulas, donde el ADN pueda expresarse.

Bacteria

Clula con gen de inters.

ADN recombinante

Clulas se clonan y se eligen para su aplicacin posterior.

PLASMIDOS CON ADN RECOMBINANTE

Bibliotecas Genmicas

Biblioteca de plasmidos

Es el set completo de miles de clones plsmidos recombinantes, cada uno con una copia de un segmento particular del genoma inicial. Vectores: Plsmidos, bacteriofagos.

Cmo se hacen los clones de ADN.

5 3 3 5
Secuencia deseada.

Calor para separar hebras. 3

3
Se enfra, ADN polimerasa alarga 3.

EL mtodo de PCR o Polymerase Chain Reaction clona ADN enteramente in vitro. Se necesita ADN polimerasa, nucleotidos, y primers.Se aplica calor y en 5 min. Se dobla la cantidad de ADN.

Anlisis del genoma

Anlisis de las secuencias de ADN. Estudiar la expresin gentica. Determinar la funcin gentica.

Ensayo de microarray deADN para expresin gnica.

Tejido A 1.mARN se aisla. Hibridizacin: cADN en microarray. 2. cADN fluorescente.

Un punto = un gen del organismo.

Un punto fluorescente = un gen expresado en el tejido A.

Determinar la funcin gnica

Mutagnesis in vitro: tcnica que introduce cambios especficos en la secuencia de un gen clonado. La mutacin puede alterar o destruir la funcin del producto proteico.

Productos de la tecnologa de ADN recombinante.

Insulina Activador Plasminognico proteico de tejidos. Factores coagulantes puros Hormona de crecimiento

Aplicaciones prcticas de la tecnologa ADN.

Huellas ADN en electroforesis casocriminal. Sangre acusado.

Sangre ropa acusado.

Sangre vctima

Diagnosis de enfermedades. Terapia Gnica Humana. Productos farmaceticos. Criminalstica. Ambiente. Agricultura.

Aplicaciones

Se aislan copias del gen y se transfieren a otros organismos: Para crear plantas con resistencia a pestes. Para alterar bacterias y limpiar desechos txicos.

TERAPIA GNICA

Encontrar el gen roto. Encontrar una copia sana del gen que falta y transplantarlo en las clulas afectadas.

Cmo colocar los genes en las celulas que los necesitan?

Se utilizan vectores: Retrovirus. Adenovirus. Injeccin directa en liposomas.

Terapia Gnica: Los

pacientes ms pequeos.

SCID (Severe Combined Inmunodeficiency) Una forma de SCID es la deficiencia de ADA (adenosin deaminasa). Terapia: Leucocitos con genes ADA.

Ingeniera Gentica

Animales transgnicos cerdos que producen protenas humanas que inhiben la respuesta inmune (ideal para transplantes)

Ingeniera Gentica

Plantas transgnicas Tomates que maduran sin llegar a la pudricin. Plantas resistentes a pestes.

Organismos transgnicos

huevo fertilizado

microinjectar gen de inters en el proncleo masculino

EMBRIN

Organismos transgnicos
Introducir varios embriones en ratn.

Nacimiento

Ratn transgnico

Otras tecnologas

Transferencia de ncleos. Duplicidad de clulas en sus primeros estados de desarrollo.

CLONES?

Transferencia de ncleos
1 clula mamaria

2
Ovocito

ncleo
Ovocito enucleado

Ovocito de 2 con ncleo de clula mamaria de 1.

Individuo idntico a 1

La transferencia de ncleos...

Permiti saber que la diferenciacin celular no modifica la informacin gentica. (Wilmut et al 1997)

Algunos (de los 30.000) genes localizados hasta hoy.

Cncer al clon (2) Hiperactividad (3) Alzheimer (19)

Genes ligados al sexo: SCID Enf. de Lorenzo (ADL) Retinitis pigmentosa.

Huntington (4) Sndrome Williams (7) Anemia de Fanconi (16) Fibrosis cstica (7)

Cncer a la piel (9) Hemocromatosis (6) Epilepsia mioclonus progresiva (21)

CROMOSOMA X

DMD Defecto del gen Distrofina causa distrofia muscular de Duchenne, una enfermedad degenerativa fatal del tejido muscular. ATP7A Enfermedad de Menke. FMR1Sndrome del X frgil. Enfermedad mental. ALD Adrenoleucodistrofia o Enfermedad de Lorenzo.

CROMOSOMA Y

SRY Factor determinante de la formacin testicular.

Noticias del genoma

8 de mayo : 85% del genoma humano se encuentra secuenciado. 13 de abril: secuencia entera del bacilo de la lepra ha sido determinado (Stewart Cole del Institut Pasteur y el Sanger Centre, UK). Ser comparado con el bacilode la tuberculosis ya secuenciado por los mismos grupos.

Noticias del genoma

24 de marzo: se public en Science el genoma completo de la mosca de la fruta Drosophyla melanogaster. 14 de marzo: Welcome trust anunci que las secuencias obtenidas en el P. G. H. sean del dominio pblico para todo investigador,de tal forma que su conocimiento pueda ser utilizado para investigar en terapias mdicas.

LA NUEVA TECNOLOGA NOS PERMITE MEJORAR LO QUE LA NATURALEZA HA HECHO:

EUGENESIA

DUDAS

SI FUERA POSIBLE, A USTED LE GUSTARA HACERSE UN TEST GENTICO QUE LE DIJERA LAS ENFERMEDADES QUE SUFRIRA EN SU VIDA?

Deseara saber si su hijo por nacer tiene defectos genticos?

BIOLOGIA Y ETICA MODERNA

Deberan los cientficos patentar la vida? Los beneficios contrapesan los riesgos? Quin decide la utilizacin de rganos para donarlos?

Otras preguntas

Reemplazar genes defectuosos para sanar no es controversial, pero...introducir genes en gente saludable para ser ms inteligente o transformarla en atleta, ser tico?

PERO:CUAN LEJOS DEBEREMOS AVANZAR?

Entonces...

El entendimiento de los conceptos biolgicos est cambiando el planeta y sus habitantes. Esperanza de un mundo mejor?

ETICA

Algunas aplicaciones parecen claramente no ticas (armas biolgicas). ...y muchas preguntas no tiene una respuesta clara.

Iceberg Biotico

Un pblico informado es la mejor proteccin contra aplicaciones no ticas o abusos del conocimiento biolgico.