Controle Biolgico do Mofo Branco com Uso deTrichoderma

Leonardo Minar Brana leonardo.brauna@nativaagricola.com.br

Introduo
O desenvolvimento de uma agricultura mais amigvel com o ambiente, a resistncia dos patgenos aos pesticidas qumicos e o alto custo desses produtos tem promovido a busca de agentes microbianos para o controle de enfermidades em cultivos comerciais.

Universidades; Orgos de pesquisa governamentais; Companhias privadas; Pequenas companhias e agricultores privados Trabalhando no desenvolvimento de produtos microbianos para o controle de fitopatgenos, pragas e plantas daninhas.

Base para o sucesso do controle Fitossanitrio

Tringulo de doena
Cultivar; Raiz; Vigor e aparncia

Etiologia: Epidemiologia; Sintomatologia

Solo, UR, T, Nutrio

Tetraedro de doena

Controle de doenas
Qumico:

Preocupao com o meio ambiente; Danos a sade humana; Atua na seleo dos patgenos resistentes; Surto de doenas secundrias; Diminuio dos micro-organismos benficos; Efeito sobre plantas no alvo e contaminao da produo
Grigolleti, 2000

 Biolgico: Controle biolgico de doenas de plantas pode ser definido como sendo a reduo da soma de inculo ou das atividades determinantes da doena provocada por um patgeno realizada por um ou mais organismos que no o homem.

Cook & Baker 1983

 Existem duas formas de Controle Biolgico

1. Manejo para favorecer os organismos antagnicos nativos; 2. Introduo macia de micro-organismos selecionados

Seleo de Micro-organismos para Controle Biolgico

Eficincia; Segurana; Produo em quantidade suficiente e baixo custo; Organismo geneticamente estvel; Tolerncia a tratamentos qumicos.

Sucesso no biocontrole
1.Escolha do agente antagonista;

2.Conhecimento do sistema onde encontra o patgeno;

3.Observar o complexo solo ambiente.

 Limitaes impostas aos produtos biolgicos:

a) Sensibilidade ao ambiente;
b) Extrema especificidade;

c) Problemas de formulao;
d) Tempo de aplicao; e) Persistncia do efeito.

Trichoderma Person
Fase assexuada do gnero Hypocrea (Ascomycota); Organismo abundante no solo, material vegetal e madeira em decomposio;

Gneros de organismos mais estudados no controle biolgico;

Bettiol e Ghini, 1995; Fortes et al., 2007

 Muitos so produtores de antibiticos com aplicao no controle biolgico por diferentes mecanismos; Biofungicidas para diversos fungos fitopatognicos; Promotores de crescimento; Produo de cido Indolactico (AIA); Solubilizao de fosfato; Endofticos;
Adams, 1990; Harman, 2000; Gravel et al., 2007

 Aplicao do fungo aumento da rea foliar, de razes e altura da planta; Reduo do tempo para germinao das sementes e no florescimento; Planta mais desenvolvidas, melhor desempenho na obteno de gua e nutrientes pelas razes;

Mello, 2008

Testemunha CEN 802 CEN 807 CEN 808 CEN 809

Principais espcies de Trichoderma.

*T. hamatum, *T. viride, T. auroviride, *T. harzianum, *T. koningii, T. pseudokoningii, T. longibrachiatum, * T. polysporum, T. glaucum, * T. stromaticum, * T. asperellum

(*) So espcies utilizadas nos programas de controle biolgico de fitopatgenos.

Trichoderma harzianum

Trichoderma asperellum

Trichoderma koningii

Trichoderma viride

Trichoderma spirale

Trichoderma polysporum

Clamidsporos de Trichoderma sp. visualizados ao microscpio de luz.

Mecanismos de ao no controle de fitopatgenos

Micoparasitismo;
Antibiose;

Competio;
Induo de mecanismos de defesa da planta.
Van Driesche e Bellows, 1996

Micoparasitismo
Ao direta contra um fungo que compreende um complexo processo que envolve eventos sequenciais, incluindo reconhecimento, ataque e a subsequente penetrao, seguida de morte do hospedeiro (patgeno).

Bentez et al., 2004

1. Quimiotropismo reconhecimento; 2. Contato fsico;

3. Liberao de enzimas contra o patgeno;

4. Miclio cresce, enrola-se na hifa hospedeira, podendo ou no penetr-la.

- Hifa suscetvel (do patgeno): apresentas-se com inmeros vacolos, colapsa e desintegra. - Micoparasita cresce no contedo da hifa hospedeira. - Parasita miclio e tambm estruturas de resistncia de diversos fungos.

Parasitismo de Trichoderma sobre hifas de Sclerotium rolfsii observado ao MEVA.

 Penetrao da hifa do Trichoderma no esclerdio de S. sclerotiorum

Antibiose
Envolvimento de compostos de baixo peso molecular na inibio de outros fungos como os causadores de doenas de plantas. Compostos txicos volteis e no volteis que atuam na supresso da colonizao do organismo atingido.
Bentez et al., 2004

- Papel de antibitico no controle da doena permanece obscuro.

- Vrios antibiticos foram identificados em Trichoderma, sendo alguns volteis (etileno, aldedo, acetona etc).

- Alguns antibiticos: Trichodermin, Viridina, Ciclosporina, Penicilina e outros.

Metablitos produzidos por Trichoderma

Inibio do crescimento de colnias de Sclerotium rolfsii por filtrado de cultura Trichoderma sp.

Inibio do crescimento de Sclerotinia sclerotiorum por filtrado de cultura de Trichoderma sp.

Competio
Capacidade de mobilizar e absorver prontamente os nutrientes sua volta e de utilizar diferentes fontes nutricionais; Rpida multiplicao e colonizao da rizosfera; Resistncia a vrios compostos txicos
Chet et al., 1997; Bentez et al., 2004

Antagonismo de Trichoderma Sobre Sclerotinia sclerotiorum em cultura pareada.

Induo de mecanismos de defesa da planta

A planta, pr-induzida aos mecanismos de defesa pelo agente de controle biolgico, responde agresso por patgenos por meio da produo de fitoalexinas, lignina adicional das clulas e compostos fenlicos.

Horsfall e Cowling, 1980; Barley, 1985; Van Driesche e Bellows, 1996

Ao indireta
Promoo do crescimento (solubilizao de nutrientes, produo de hormnios vegetais e vitaminas)

Figura 02 Produo de AIA pelos os isolados de Trichoderma spp. a 535 nm de absorbncia.

Reao colorimtrica p/produo de siderforos por isolado de Trichoderma sp. (meio CAS-Blue Agar)

Testemunha CEN 802 CEN 807 CEN 808 CEN 809

Largo espectro de ao do Trichoderma contra diversos patgenos de plantas

Sucessos no controle biolgico por fungos

 Verticillium dahliae (Corder e Melo, 1998); Venturia (Hjeljord et al., 2001); Cylindrocladium (Santos et al., 2001);

Meloidogyne javanica ( Sharon et al., 2001).

Aplicao prtica dos antagonistas

Inoculao de substratos com Trichoderma em camas de cultivos

Mudas de melo na Costa Rica

Aplicao prtica dos antagonistas em:

Ornamentais

No substrato em Gerbera sp

Ensaio em Feijo - Piv

Trichoderma - Feijo

Principais micro-organismos em estudo e aplicao em vrios pases

Trichoderma spp.

Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) De Bary

Importncia econmica, perdas de 100% Ampla gama de hospedeiros (cerca de 75 famlias)] Plantio intensivo de culturas hospedeiras > densidade > severidade. Doenas: -Mofo branco, -Podrido da haste de canola, -Murcha de girassol, -Murcha de alcachofra

Distribuio Climtica

 Epidemiologia: Manchas que evoluem para um miclio branco e denso; Temperatura ( 20 C) e umidade alta no solo.

 Infecta tecido em senescncia (flores); Leses encharcadas nas folhas, hastes, flores e frutos; Miclio cotonoso

 Miclio cotonoso forma o esclerdio.

Aparecimento e germinao de esclerdios;

 A transmisso por semente pode ocorrer tanto atravs de miclio dormente (interno) quanto esclercios misturados s sementes.

Algodo

Batata

Feijo

Girassol

Soja

Tomate

Plantas Daninhas
Cordo de So Francisco (Leonotis nepetaefolia) Mentruz (Lepidium virginiculum)

S. Sclerotiorum
mofo branco

S. Sclerotiorum mofo branco

Trichoderma sp. X Sclerotinia sclerotiorum

Brana, 2004

 Inibio dos esclerdios de S. sclerotiorum por Trichoderma

 Penetrao da hifa do Trichoderma no esclerdio de S. sclerotiorum

Parasitismo de Trichoderma sobre hifas de Sclerotinia sclerotiorum observado ao MEVA.

Tratamento de semente

Primeira e Terceira folha trifoliolada

Aplicao de Trichoderma - Feijo

Tratamento de semente

Segunda e Terceira folha trifoliolada

Aplicao de Trichoderma - Soja

S. Sclerotiorum X Trichoderma spp - Soja

Trich.

SS

Trich. + SS

Teste Abs

S. Sclerotiorum X Trichoderma spp - Feijo

Teste

Trich. + S.S.

S.S.

Trich.

Testemunha

S. sclerotiorum

CEN 808 + S. sclerotiorum

CEN 808

S. sclerotiorum

CEN 802 + S. sclerotiorum

CEN 807 + S. sclerotiorum

CEN 808 + S. sclerotiorum

CEN 809 + S. sclerotiorum

Trichoderma spp. X Sclerotium cepivorum

Trichoderma spp. X Mycena citricolor (Anamorfo: Decapitatus)

Trichoderma X Rhizoctonia

Rhizoctonia

Trichoderma

Trichoderma x Fusarium solani

 Arthrobotrys spp. Fungo capturador de nematoides

S. rolfsii

Sintomas causados por Slerotium rolfsii em plantas de feijo.

Trich. + SR

SR

Trich.

Produtos a base de Trichoderma sp. existentes no mercado brasileiro

Lista de produtos comercialmente a venda nos EUA

Bactrias Agrobacterium radiobacter Bacillus spp.: Galltrol Nogall Companion HiStick N/T Kodiak Serenade YieldShield Deny Intercept BioJect Spot-Less Bio-save BlightBan Cedomon Actinovate* Mycostop

Burkholderia cepacia Pseudomonas spp.

Streptomyces spp.

*Registro pendente.
**Registrado primeiramente como promotor de crescimento, mas recentemente determinou efeito como agroqumico.

Alguns produtos comerciais no exterior

- BioFungus (Blgica)

- Trichodex, Trichoderma 2000 e Root Pro (Israel)

- Binab-T (Sucia) - RooTShield S (Estados Unidos) - Supersivit (Dinamarca e Repblica Tcheca) - Trichoject,Trichopel e Trichoseal (Nova Zelndia) - TUSAL (Espanha) - Trieco (India)

Resultados do uso de antagonistas

Antagonistas de qualidade

Plantas saudveis

Resultados do uso de antagonistas

Satisfao do agricultor Proteo da sade do agricultor e consumidor Conservao do meio ambiente

OBRIGADO PELA ATENO!!!