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Bioqumica Clnica

Prof. Ronaldo Costa

Lipdios:Compostos solveis em solventes orgnicos e


insolveis em gua. Classificao de lipdios importantes clinicamente

Derivados esteris steres do glicerol Colesterol e seus steres Triglicerdios Hormnios esterides Fosfoglicerdios cidos biliares Derivados da esfingnosina Vitamina D Esfingomielina cidos graxos Glicoesfingolipdios Cadeia curta (2 a 4 C) Terpenos Cadeia mdia (6 a 10 C) Vitamina A Cadeia longa (12 a 26 C) Vitamina E Prostaglandinas Vitamina K

Vamos lembrar... Funes:


Fonte primria de energia, quando armazenado no tecido adiposo. Isolantes trmico e eltricos Constituintes da membrana celular e de muitas estruturas celulares. Transporte trans-membrana e, na corrente sangunea na forma de lipoprotenas.

Lipoprotenas: estrutura e funo


Responsveis pelo transporte dos lipdios no Plasma
Estrutura bsica:
ncleo apolar: Triglicrdes + steres de colesterol

Fosfolipdio Colesterol no esterificado Apoliprotena superfcie polar

Lipoprotenas: estrutura e funo


Quilomcrons - Maiores e menos densas, ricas em triglicerdeos, de origem intestinal. VLDL - Densidade muito baixa, origem heptica; LDL - Densidade baixa, ricas em colesterol IDL - Densidade intermediria HDL - Densidade alta, mais pobre em col. Lp(a) Densidade mdia a mais alta, rica em fosfolpide.

Quilomicrons
Sintetizado no intestino

delgado Secretado no sistema linftico e subsequentemente atinge a circulao. Transporta lipidios da dieta 98% lipidio, tamanho grande, baixa densidade Apo B-48

Receptor de ligao

Apo C-II AtivadorL ipoproteina lipase

Apo E Resto de receptor ligao

VLDL
Very Low Density

Lipoprotein (VLDL)
Sintetizado no fgado Transport endgeno

triglicrides 90% lipdio, 10% proteina Apo B-100

Receptor ligao

Apo C-II LPL ativador Apo E Resto de receptor ligao

LDL
Low Density

Lipoprotein (LDL)
Sintetizado do IDL Transporte Colesterol

78% lipdio, 58%

colesterol & CE Apo B-100

Receptor ligao

IDL
Intermediate Density Lipoprotein (IDL)
Sintetizado do VLDL durante a degradao do VLDL Transporte de Triglicrides e precursor para LDL Apo B-100 Receptor Apo C-II LPL ativador Apo E Receptor ligao

HDL
High Density Lipoprotein

(HDL)
Sintetizado no fgado e intestino Reserva de apoproteinas Transporte reverso de colesterol 52% proteina, 48% lipid, 35% C &

CE Apo A

Activates lecitina-cholesterol aciltransferase (LCAT) Ativado LPL Resto de receptor ligao

Apo C

Apo E

Apoprotena Lp (a)
uma glicoprotena enorme, homloga ao plasminognio, sintetizada pelo fgado. No plasma, forma uma ligao covalente com a apo B100 das LDL, gerando uma nova lipoprotena, a Lp (a).

Apoliprotenas
So uma famlia complexa de polipeptdio que determinam o destino metablico dos lipdios no plasma e sua captao pelos tecidos. Ativam e inibem enzimas envolvidas no metabolismo das lipoprotenas. Diviso: ApoA; ApoB; ApoC; ApoE;

Apoprotenas da srie A As apo A-I, A-II e A-IV so encontradas na HDL. A-I A-II so sintetizadas no fgado A-IV forma-se apenas no intestino A-I corresponde a 80% de toda a protena das HDL e essencial para a integridade dessas partculas. Apo A-I ativa a LCAT (que esterifica colesterol)

Apoliprotenas da srie B Est presente no plasma em duas formas: apoB100 apoB48 ApoB100 componente protico das LDL -quilomcrons reconhecidas por receptores especficos tecidos perifricos.

Apoprotenas da srie C

Esta famlia de trs protenas (apoCI, apoCII, apoCIII) sintetizada no fgado e esto em todas as lipoprotenas menos LDL. A apo CII ativa a lipoprotena lipase (LPL), que digere (hidrolisa) os triglicerdeos (gordura) em quilomcrons eVLDL.

Apolipoprotenas da srie E sintetizada no fgado, neurnios, glia e macrfagos; Ocorre em todas as lipoprotenas, com exceo da LDL; incorporada ao HDL e transferida, na circulao, para os quilomcrons e VLDL. a principal apoprotena envolvida na captao heptica dos quilomcrons Liga-se aos receptores apo B nos tecidos.

Prostaglandinas(PG)
Derivado de c. Graxos(ariquidonato) Produzido em quase todos os tecidos.

Aes em respostas fisiolgicas: Presso arterial(msculo

liso ; Induo do parto( msculo uterino); Motilidade Intestinal; Brocoespasmo; Aumenta a coagulao (plaquetas); Aumenta a permeabilidade capilar; Secreo do cido Gstrico(Estomago); Inibe a liplise do triglicrides(tecido adiposo)

Fosfolpides
So formados por glicolipidios e colesterol(menbrana celular). So anfipticos- formados pela conjugao de 2 tipos de c. Graxos e 1 de Glicerol-fosforilado. Resduos resultam em lecitinas e cefalinas Esfingomielina- nico que no deriva do glicerol, e sim de um amino-alcool Esfingosina

Glicolipidios
So acares contendo lipdios esfingosina e acar ligado ao grupo lcool. Molcula total ceramidas galactosilceramida glucosilceramida
Complexos- gangliosdeos(menbranas da clulas do crebro e do SNC).- sintetizadas de ceramidas. membrana glicosfingolpide- Papel no reconhecimento da clula e tipos sanguneos.

Metabolismo
Exgena

Endgena
Transporte Intra celular Transporte Reverso de Colesterol

Enzimas Chaves no Metabolismo das Lipoproteinas

Lipoproteina lipase (LPL): hdrlise de particulas ricas em triglicrides

Lecitina:colesterol aciltransferase (LCAT): participa na remoo do excesso de colesterol das clulas perifricas

Lipoprotein Lipase (LPL)


Endothelial Cell LPL
apoC-II
apoA-I cholesterol

Fatty Acids and Glycerol


Lipolytic products

TG

CM VLDL

phospholipid

apoE

Excess Surface Material

CM

Energy

apoE

VLDL
Remnant

LDL

HDL assembly muscle

Liver Bile acids

TG = triglyceride

Lecithin:Cholesterol Acyl Transferase (LCAT)

LCAT: Disk to sphere transformation Free cholesterol Cholesteryl ester


Mature HDL Nascent HDL
apoA-I

LCAT

CE

Phospholipid plus cholesterol

Cholesteryl ester (CE) Cholesterol Phospholipid ApoA-I

Cholesteryl ester (CE) plus lysophospholipid

Reverse Cholesterol Transport (RCT)

O processo pelo qual o excesso de colesterol nas periferias da clulas, especialmente clulas espumantes macrfagos, retorrnada para o fgado por degradao e excreo.
RCT envolve apoA-I, ABCA1 and LCAT to bem com receptores no fgado para absoro do excesso de colesterol.

Reverse Cholesterol Transport


Delivery of peripheral tissue cholesterol to the liver for catabolism Requires HDL, apoA-I and LCAT

Peripheral Cell UC
Macrophage/ Foam cell

diffusion

HDL

HDL UC
LCAT

ABCA1

UC PL LCAT

Nascent HDL

HDL CE CE

CE
apoA-I SR-B1

UC = unesterified cholesterol CE = esterified cholesterol PL = phospholipid LDLr = LDL receptor

TG
VLDL or LDL apoB

CE LDLr

Liver
Chol

Bile acids

Bile to gut

Digesto e metabolismo das gorduras da dieta

Lipoproteina Nomenclatura e Composio

QM
Maior apoB Proteina Maior Lipidio TG

VLDL

IDL

LDL

HDL

apoB

apoB

apoB

apoA-I

TG

CE

CE

CE

Xantomas Tendinosos

Xantomas Planos

Arco Corneal

Chaves Receptoras no metabolismo das Lipoproteinas

LDL receptor: catabolismo oda LDL, apo B ligante

ABCA1 transportador: transporta excesso de colesterol das clulas apoA-I ligante receptor de varredura A1 (SR-A1): absoro do oxidado e modificado LDL por macrfagos SR-B1 receptor:seletiv a absoro do excess o de colesterol do HDL, apoA-I ligante

COLESTEROL

ESTERIDE: Lipdios de cadeia complexa formados partir de colesterol.

4 anis de carbono (17 C)

IMPORTNCIA: Servem como base para sntese de hormnios (ex: sexuais-testosterona), precursor de vitamina d e importante componente da membrana plasmtica.

COLESTEROL
MOLCULA INSOLVEL (APOLAR):
PRODUZIDA PELO PRPRIO ORGANISMO (**ENDGENO-FGADO = 70%) ou INGERIDO (EXGENO = 30%) VAI PARA O SANGUE

se liga a molcula carreadora lipoproteca


LDL: LOW-DENSITY LIPOPROTEIN
(lipoprotena de BAIXA densidade)

HDL: HIGH-DENSITY LIPOPROTEIN


(lipoprotena de ALTA densidade)

VLDL: VERYHIGH-DENSITY LIPOPROTEIN


(lipoprotena de MUITA ALTA densidade)

Origem do Colesterol circulante


O colesterol circulante se origina predominantemente de trs fontes:
1. Sntese perifrica: intestino, msculo, pele e glndulas endcrinas (ovario e suprarrenais)

2. Sntese heptica: a partir do mevalonato atravs da enzima reductase dahidroximetil glutaril CoA.
3. Absoro intestinal: Ao redor da metade do colesterol do intestino absorvido, somente a tera parte do colesterol intestinal procede da dieta. O colesterol contido na bilis e o secretado nas clulas epiteliais do intestino delgado, representam a maiora do colesterol absorvido e que contribui na formao dos quilomicrons.

LDL- COLESTEROL: mau colesterol


LIPOPROTENA QUE CARREGA O COLESTEROL DO FGADO E INTESTINO

CLULAS DO CORPO
PROBLEMA:

DEFEITO gentico(1:500 pessoas nos pases


N DE RECEPTORES DE MEMBRANA

ocidentais apresentam uma mutao no gene do receptor de Ldl)

LDL NO SANGUE

ATEROSCLEROSE

ATEROSCLEROSE (Doena arterial crnica):

depsitos de gordura e fibras no lmen dos vasos. (atualmente: processo inflamatrio da parede da artria)
ENRIJECIMENTO E ENTUPIMENTO DOS VASOS.

INFARTO DO MIOCRDIO
ATEROMA

Obstruo arteriosclertica parcial ou total das artrias coronarianas resultando em uma limitao do suprimento do oxignio ao corao frente ao aumento da demanda.

HDL- COLESTEROL: bom colesterol


CARREGA COLESTEROL DAS CLULAS

FGADO: METABOLIZADO OU EXCRETADO

pode remover o colesterol da ateroma dentro da artria, e transport-lo de volta ao fgado.

Qumico
Determinao

Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico

Metodologia : Colorimtrico- Enzimtico de Trinder Finalidade :Mtodo para determinao do Colesterol. Teste
enzimtico colorimtrico somente para uso in vitro.

Princpio:

Os steres de colesterol so hidrolizados pela colesterol esterase (COE) a colesterol livre + cidos graxos.O colesterol livre oxidado pela colesterol (COD) a colesterol 3 ona + peroxido de hidrognio.Na presena da Peroxidase (POD) reage com a 4 Aminoantipirina e Fenol, formando um cromgeno vermelho cereja cuja intensidade de cor proporcional concentrao de Colesterol.

Amostra: Soro obtido livre de hemlise ou plasma


colhido com heparina. O Colesterol estvel no plasma ou no soro por 7 dias entre 2 e 8 C, e at 5 dias entre 15 e 30 C. Procedimento: Rotular 3 tubos: B, P e T. Colocar 1,0 ml do Reagente Enzimtico nos tubos B, P e T. Colocar 0,01ml da Amostra no tubo T e 0,01ml do Padro no tubo P. Misturar bem e colocar em banho-maria 37 C por 10 minutos.Ler a absorbncia da Amostra e do Padro em 500 nm,acertando o zero com o Branco. A cor estvel por 30 minutos.

Clculos:
Colesterol (mg/dL) = Absorbncia da Amostra x 200 Absorbncia do Padro

Fator de calibrao = Concentrao do Padro (200 mg/dL) Absorbncia do Padro mg/dL = Absorbncia da Amostra x Fator de calibrao

Valor de Referncia:
Desejvel ............................................... < 200mg/dL Aceitvel ................................................ 200 239mg_/dL Elevado .................................................. > 240mg/dL

Linearidade: A reao linear at 500 mg/dL. Para


amostras com valores acima de 500 mg/dL, ou densidade ptica maior que 0,8, diluir a amostra com cloreto de sdio 0,85%, repetir a dosagem e multiplicar o resultado pelo fator de diluio. O valor encontrado deve ficar entre 150 e 300mg/dL

Influncias Analticas: Postura sentada entre 15 e


30minutos. Torniquete at 1 minuto. Aps 2min. Aumento de 5%, Aps 5min. Aumento de 15%. Anticoagulantes: citrato, EDTA, oxalato, do resultados falso negativos.

Interferncias:
cido Ascrbico (mesmo em pequenas concentraes),-falsos diminuidos repousar amostra por 90 minutos.

Hemoglobina acima de 180 mg/dL


Bilirrubina acima de 5 mg/dL. falso diminudo

Reagentes:
Reagente Enzimtico - Tampo (pH 7,0) 75 mmol/L, Fenol 24 mmol/L, 4- Aminoantipirina0,5 mmol/L, Colesterol Oxidase < 300 U/L, Lipoprotena Lipase > 500 U/L, Peroxidase > 300 U/L, Azida Sdica 14,6 mmol/L,. Reagente N 2 - Padro - conservar entre 2 e 8 C. Contm: Colesterol 200,0 mg/dL,

Significado Clnico: Aumentado


no diabetes, sndrome nefrtica, cirrose biliar, no hipotiroidismo e nas hiperlipoproteinemias tipo IIa, IIb e III.
nvel elevados do Colesterol LDL (Colesterol ligado a lipoprotenas (LP) de baixa densidade) relacionam-se intimamente doenas coronarianas isqumicas (DCI). Ao contrrio, a elevao do Colesterol HDL (Colesterol ligado a lipoprotenas de alta densidade)representa um fator de proteo contra a DCI. Hipertenso, tabagismo,

Obesidade so outras causas responsveis pela arteroscleroses e DCI.

Significado Clnico: Diminudo


doenas que acometem o parnquima heptico (Hepatite virtica, Hepatite Txica),
ocasionalmente nas infeces agudas (pneumonia,

febre tifide), hipertiroidismo, anemias, desnutrio.

Dislipidemias
Hipercolesterolemia isolada Hipertrigliceridemia isolada Classificao Laboratorial Hiperlipidemia Mista
Elevao isolada do CT, geralmente aumento do LDL-C

Elevao isolada dos TG, por aumento do VLDL e/ou QM


Valores aumentados de CT e TG c/ ou s/ aumento de LDL ou TG

HDL-C Baixo

Dislipidemias primrias
Classificao Etiolgica Dislipidemias Secundrias

Causas genticas

Apresenta causa secundria


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ALIMENTOS RICOS EM COLESTEROL


- Carnes gordas; - Bacon, toucinho; - Gema de ovo; - Produtos embutidos (salsicha, lingia); - Leite integral; - Queijos amarelos, como queijo prato, queijo mussarela, parmeso; - Manteiga, banha, creme de leite; - Frutos do mar como camaro, lagosta, lagostim, siri, caranguejo; - Alimentos fritos; - Doces.

TIPOS DE GORDURA
GORDURAS SATURADAS (VILS): comum nos ANIMAIS (porco, carnes bovinas, leite, manteiga, dend).

Cadeia de carbonos ligados a hidrognios. Sem dupla ligao (cada C se liga a 2H).

Associadas a doenas do corao ( LDL)


* O corpo necessita de gorduras para que o corpo absorva as vitaminas A, D, E e K (lipossolveis) .

GORDURAS INSATURADAS:

TIPOS DE GORDURA
comum nos VEGETAIS (leos vegetais) e nos peixes.

MONOINSATURADAS Cadeia de carbono com uma dupla ligao (azeite de oliva). POLIINSATURADAS Cadeia de carbono com mais de uma dupla ligao (girassol, canola)

No associadas a doenas do corao. (aumentam HDL no sangue e reduzem o LDL)

SATURADA

INSATURADA POLIINSATURADA

GORDURA TRANS (biscoitos, salgadinhos, frituras ,

margarina, fast-food...) : - gorduras insaturadas que sofreram HIDROGENAO


(natural ou industrial). Motivo (indstria): - alimentos mais saborosos; - prolonga o prazo de validade; - melhora a consistncia.

Associadas a doenas cardacas ( LDL no sangue e HDL)

COMO DIMINUIR O COLESTEROL NO SANGUE ?

DIETA (baixa eficcia): Substituio de cidos graxos saturados por cidos graxos poliinsaturados. So mais rapidamente metabolizados no fgado, diminuindo a concentrao de colesterol plasmtico. EXERCCIOS FSICOS (baixa eficcia): Impacto pequeno devido queima de calorias. Reduz em at 20 % o nvel de triglicrides em pessoas com altas taxas do mesmo.

MEDICAMENTOS: estatinas reduzem em no mximo 20% o colesterol ruim. Rendem 4 bilhes de dlares ao ano s no Estados Unidos.
FATORES GENTICOS QUESTO COMPLEXA
DIVERSOS FATORES DE RISCO

GORDURAS X CARBOIDRATOS
Triglicrides e do LDL

TRIGLICRIDES
Estrutura do triglicerdeo:
3 molculas de cidos graxos + 1 molcula de glicerol

TRIGLICRIDES
risco de arterosclerose e doenas cardiovasculares

excesso de lcool

O aumento do nvel de triglicrides:


disfuno renal crnica ou o excesso de determinados medicamentos (ex., diurticos, tiazida)

pode indicar patologias como diabetes

Qumico
Determinao

Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico

Metodologia:
Colorimtrica (Reao de Trinder)

Finalidade : Sistema enzimtico Para determinao dos


triglicrides Por reao de Ponto Final em amostras de Sangue.

Princpio:

Triglicrides ....Lipase /Lipoprotica Glicerol e c. Graxos. Glicerol... Glicerol -Quinase Glicerol-3-Fosfato Glicerol-3-Fosfato ....Oxidase - Peroxidase - Cromgeno Cereja

Amostra:
Soro obtido livre de hemlise (para evitar resultados falsamente elevados) ou plasma colhido com EDTA ou heparina. O analito estvel durante 3 dias entre 2 e 8C e 30 dias a 10C negativos.O sangue deve ser colhido aps um jejum de 12 a 14 horas. As amostras lipmicas devem ser previamente diludas com Cloreto de Sdio a 0,85%, na proporo 1:2.

Interferncias:

Procedimento:
Rotular 3 tubos: B, P e T. Colocar 1,0 ml do Reagente Enzimtico nos tubos B, P e T. Colocar 0,01ml da Amostra no tubo T e 0,01ml do Padro no tubo P. Misturar bem e colocar em banho-maria 37 C por 10 minutos.Ler a absorbncia da Amostra e do Padro em 505 nm,acertando o zero com o Branco. A cor estvel por 30 minutos.

Valor de Referncia:
Desejvel ............................................... < 150 Alto ......................................................... 150 a 199 Elevado .................................................. 200 a 499 Muito elevado.......................................... > 500

Crianas: < 10 anos Desejavel: 100 Elevado: > 100

entre 10 e 19 anos 130 > 130

Linearidade:
A reao linear at 1100 mg/dL. Amostras com valores acima diluir a amostra com Cloreto de sdio 0,85%, repetir a dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.

Influncias Analticas:
Dieta, Consumo de lcool, Peso Corporal, Exerccio Fsico. Heparina ativa lipoprotena lipase - falso diminudo Obter amostra com paciente sentado Torniquete at 1 minuto

Reagentes:
Padro - conservar entre 2 e 8 C. Contm: Triglicrides 100,0 mg/dL (1,13 mmol/L), cido Benzico20,47 mmol/L; Reagente Enzimtico 1 - conservar entre 2 e 8C. Tampo Pipes pH 7,0 (100 mmol/L), Cloreto de Magnsio 15 mmol/L, 4-cloro fenol 5 mmol/L, Lipase Lipoprotica 2500 U/L, Glicerol quinase > 1500 U/L, Peroxidase > 1000 U/L, Colato de sdio 2,7g/L; Reagente Enzimtico 2 - conservar entre 2 e 8 C. Contm: 4-Aminoantipirina 0,9 mmol/L, ATP 1,5 mmol/L, Azida Sdica 15,38 mmol/L, Glicerol-3Fosfato Oxidase > 4000 U/L, Genapol 1,8g/L.

Clculos:
Triglicrides ( mg/dL ) = Absorbncia da amostra x 200 Absorbncia do padro Fator de calibrao = Concentrao do padro ( 200 mg/dL ) Absorbncia do padro

Triglicrides mg/dL = Abs. da amostra x Fator de calibrao

Significado Clnico: Aumentado


Tm grande importncia na classificao e fenotipagem das hiperlipoproteinemias. Nas vrias patologias em que ocorre hiperlipidemia, os Triglicrides somente no se encontram elevados no Tipo IIa.
No diabetes, doenas cardiovasculares, pancreatite, sndrome nefrtica, uremia, hipotireoidismo, alcoolismo crnico, gravidez e mieloma mltiplo. Estrgenos, corticoesterides, Bbloqueadores, diurticos tiazdicos e retinides. Em processos de triagem, a dosagem dos Triglicrides, Colesterol, a prova de refrigerao srica e outros parmetros

podem fornecer dados consistentes classificao e fenotipagem das hiperlipoproteinemias.

TRIGLICRIDES
risco de arterosclerose e doenas cardiovasculares

excesso de lcool

O aumento do nvel de triglicrides:


disfuno renal crnica ou o excesso de determinados medicamentos (ex., diurticos, tiazida)

pode indicar patologias como diabetes

HDL
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apoA-I

Surface Monolayer of Phospholipids and Free Cholesterol

apoA-II

Hydrophobic Core of Triglyceride and Cholesteryl Esters

Rye KA et al. Atherosclerosis 1999;145:227-238.

Qumico
Determinao

Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico

Metodologia : Colorimtrico

Finalidade :determinao da frao HDL do colesterol


presente no soro.

Princpio:
Os quilomcrons e as lipoprotenas de baixssima densidade (VLDL) e de baixa densidade (LDL) presentes na amostra, precipitam em presena de ons fosfotungstato e magnsio. Aps a centrifugao o sobrenadante contm as lipoprotenas de elevada densidade (HDL), cujo colesterol quantifica-se em espectrofotmetro.

col. esterase Colesterol esterificado + H2O---------------------> Colesterol + Ac. graxo col. oxidase Colesterol + O2 + H2O--------------------------> Colestenona + H2O2 peroxidase 2H2O2 + 4-Aminoantipirina + Fenol -------------> Quinoneimina + 4H2O

Reagntes:
Reagente Precipitante:cido Fosfotngstico 16 mmol/L, Cloreto de magnsio 3,5 mmol/L. Padro: Butanol 10% v/v; Triton X100 0,1% v/v; em concentrao equivalente 20 mg/dL de HDL colesterol.

Amostra: Soro ou Plasma(hepariana, ltio,


EDTA)

Procedimento:Precipitao
1. Pipetar em tubo de centrfuga amostra: 250 L
e Reagente precipitante 250 L 2. Agitar vigorosamente e deixar em repouso durante 10 minutos. 3. Centrifugar durante 10 minutos a 3.000 rpm para obter um sobrenadante lmpido. 4. Recolher com cuidado o sobrenadante. 5. Realizar a dosagem de colesterol HDL imediatamente.

1. Pipetar Reagente do Colesterol: 1,0 mL nos Tubos B,P e T. 2. gua destilada: 100l no tubo B 3. Padro: 100l no tubo P 4. Sobrenadante: 100l no tubo T 5. Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos a 37 C. 3. Medir a absorbncia (Ap) do Padro e (Aa) da Amostra frente ao Branco a 505 nm. A cor estvel durante 30 minutos.

Clculos:
HDL Colesterol (mg/dL) = Absorbncia da Amostra x Conc. Padro (mg/dL) (*) Absorbncia do Padro (*) 40 equivale ao valor do padro (20 mg/dL) corrigido de acordo com o fator de diluio (1:2) usado na precipitao. Fator = Concentrao Padro (mg/dL)(*) Absorbncia do Padro Colesterol HDL (mg/dL) = Absorbncia da amostra x Fator de Calibrao

Valor de Referncia:
Faixa Etria At 10 anos
De 10 a 19 anos

Valor (mg/dL) Interpretao > 40 Desejvel


> 35 Desejvel < 40 Baixo 41 a 59 Aceitvel > 60 Desejvel Diabticos > 45 Desejvel

Adultos

Linearidade: at

150 mg/dL. Para valores superiores, diluir a amostra com NaCl 150 mM (0,9%), realizar nova dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.

Influncias Analticas: Anticoagulantes Citrato e


Oxalato, no devem ser usados, pois produzem resultados falsamente diminudos. Amostras s devem ficar em T.A. por 14 horas.

Interferrncias: Hemlise, Ictercia


Hemoglobina > 150 mg/dL Bilirrubina > 10 mg/dL

Significado Clnico : Aumentados


exerce importante funo na retirada do colesterol dos tecidos e transporte at o fgado para ser metabolizado em cidos biliares (transporte reverso do colesterol correlao forte inversa entre os nveis de HDL colesterol e o risco de aterosclerose. nveis elevados de HDL so benficos e at mesmo desejveis. Exerccios fsicos podem aumentar essa frao do HDL. seus nveis se elevam no hipotireoidismo e

Significado Clnico : Diminudos


Fatores genticos: hipoalfalipoproteinemia. Fumo.

Obesidade.
Hipertrigliceridemia. Sedentarismo.

Esterides,andrognios, progestgenos, anablicos, tiazdicos.


b-Bloqueadores adrenrgicos.

Neomicina.
Anti-hipertensivos.

LDL

Qumico
Determinao

Metodologia Finalidade Princpios Reagentes Amostras Procedimentos Influncias Analticas Interferncias Linearidade Intervalo de Referncia Significado Clnico

Metodologia : Surfactante Seletivo.

Finalidade : determinao da frao LDL do


colesterol presente no soro e plasma

Princpio:
Na primeira etapa o LDL colesterol presente na amostra protegido das reaes enzimticas, enquanto os quilomcrons, VLDL e HDL colesterol reagem com as enzimas Colesterol Esterase (CHE) e Colesterol Oxidase (COD). O perxido de hidrognio produzido pelas reaes enzimticas nesta primeira etapa ento decomposto pela Catalase presente no Reagente. Na segunda etapa, a adio do Reagente 2 proporciona a reao do LDL colesterol com as enzimas CHE e a COD e a inativao da Catalase. O perxido de hidrognio produzido nesta etapa forma um complexo colorido pela condensao da 4Aminoantipirina com HDAOS (N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3,5dimetoxianilina) na presena da Peroxidase (POD). A concentrao do LDL colesterol proporcional absorbncia do complexo formado medido a 600 nm.

LDL + HDL+ VLDL+Quilomicrons +Surfactante 1


CE+CO

LDL+ Produto Incolor


CE

LDL+ Surfactante 2
CO

Colesterol + c. Graxos Colesterol 4 en-ona + H2O2 peroxidase

Colesterol + O2

H2O2+ DSBmT + 4-aminoantipirina


Quinoneimina + 4 H2O

Reagentes:
Tampo de Good 25 mmol/L pH 6,8; Colesterol Esterase 5.000 U/L;Colesterol Oxidase 5.000 U/L; HDAOS 0,64 mmol/L e Catalase 1.000.000 U/L.

Tampo de Good 25 mmol/L pH 7,0; 4-aminoantipirina 3,4 mmol/L; Peroxidase 20.000 U/L e azida sdica 0,095%. Calibrador:Soro Humano; azida sdica 0,095% (valor daconcentrao de LDL)

Amostra: Soro ou Plasma(hepariana-ltio, EDTA) Procedimento: Rotular 2 tubos Calibrador e teste


1. Colocar - 10 L da Amostra no tubo T. 2. Colocar 10 L do Calibrador no Tubo C. 3. Colocar nos tubos T e C 750 L do reagente 1. 4. Homogeneizar, incubar a 37 C por 5 minutos. 5. Medir imediatamente a absorbncia a 546 nm da amostra (A1a) e do calibrador (A1c) frente a gua destilada. 6. Colocar 250 L do Reagente 2. nos 2 tubos. 7. Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37 C. 8. Medir imediatamente a absorbncia da amostra (A2a) e do calibrador (A2c) frente a gua destilada a 546 nm.

Clculos:
A2c - A1c = DA calibrador A2a - A1a = DA amostra [C] = Concentrao do Calibrador

A amostra x concentrao do calibrador = (mg/dL) A calibrador Fator: = [Cal] A calibrador Concentrao de LDL (mg/dL) = A amostra x Fator Calibrao

Linearidade:

6,6 e 992 mg/dL. Para valores superiores, diluir a amostra com NaCl 150 mM (0,9%), realizar nova dosagem e multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.

Influncias Analticas:Anticoagulantes Citrato e


Oxalato, no devem ser usados, pois produzem resultados falsamente diminudos. Amostras s devem ficar em T.A. por 14 horas.

Interferncias:Hemlise, Ictercia e Lipemia


Hemoglobina > 500 mg/dL Bilirrubina Conjugada > 40 mg/dL Bilirrubina No-Conjugada > 50 mg/dL Triglicrides > 1293 mg/dL cido Ascrbico > 50 mg/dL Gama-Globulinas >5000 mg/dL Diluir as amostras com valores maiores do que permitido, exceo do triglicrides.

Valor de Referncia:
Adultos timo Limiar timo Limiar Elevado Elevado Muito elevado
< 100 100 a 129 130 a 159 160 a 189 190

Crianas e Adolescentes Idade de 2 a 19 anos Desejvel < 110 Limtrofe 110 a 129 Elevado 190

Significado Clnico
As lipoprotenas de baixa densidade (LDL), so as principais protenas de transporte do colesterol. Os nveis de colesterol total so conhecidos por estarem correlacionados com a doena arterial coronariana (DAC). Nos ltimos anos, em adio ao colesterol total a determinao da frao LDL do colesterol tornou-se fundamental para a avaliao do risco de DAC, pois so seus nveis que determinam o diagnstico e as metas de avaliao e de tratamento da hipercolesterolemia. A relao entre a doena aterosclertica e o aumento de LDL significativa e direta

VLDL
Quantificado pela equao matemtica:
VLDL = Triglicrides

Transformao de VLDL en LDL


Apo B-100 Apo CI Apo CII Apo CIII Apo E Apo A-I

VLDL naciente

VLDL madura

HDL
Lipasa lipoproteica

TG AG FOSFOL

IDL HDL LDL


Esteres de COL

Arterias

Equao de Friedwald
VLDL = Triglicrides 5
LDL= Colesterol Total (HDL + VLDL) Colesterol Total e Fraes = Colesterol HDL + Colesterol LDL

+ Colesterol VLDL Limitaes: Alta concentrao de Triglicrides Quantidade significante de quilomicrons Disbetalipoproteinemias

Avaliao das Apolipoprotenas A medida das apolipoproteina aumentam a especificidade para a identificao dos fatores de risco coronariano. O perfil de apolipoproteinas indicado para pacientes que apresentam riscos de aterosclerose tais como: Hipercolesterolemia. A apoB utilizada para confirmar o diagnstico. HDL C reduzidos Crianas com antecedentes familiares Mulheres usurias de anticoncepcional

A Apolipoprotena A1 a principal constituinte das lipoprotenas de densidade alta (HDL), no qual captada rapidamente assegurando seu retorno ao fgado para seu catabolismo A diminuio de apoA1 indicador do aumento do riscocardiovascular

Apolipoprotena B Maior constituinte protico das lipoprotenas de densidade baixa (LDL) e secundariamente das (VLDL) A apo B atua como determinante da unio das LDL a seus receptores especficos As LDL circulante em excesso so captadas pelos macrfagos produzindo as clulas espumosas, ponto de partida da placa de ateroma. Pois uma concentrao elevada de apoB favorece a formao de aterosclerose

Lipoprotena (a) Lp(a) Elevados nveis de Lp(a) esto associados com o aumento de risco para o: Infarto do miocrdio; Doenas vasculares prematuras (menor de 55 anos) Doena arterial crebro vascular Enfarto agudo do miocrdio em pacientes com histrico familiar e hipercolesterolemia;