Ps-Graduao em Gentica

Basofilia e Acidofilia: colorao do Pantico

Disciplina: Preparaes citolgicas e anlises citogenticas Maria Isabel Afonso da Silva

Reaes Citoqumicas Mediadas por Ligaes Eletrostticas

Afinidade eletrosttica: um corante ionizado em uma soluo reage com um substrato de carga inica oposta.

Substrato catinico

Acidofilia

Corante aninico

Substrato aninico

Basofilia

Corante catinico

Basofilia

Corantes Bsicos (Catinicos)

Substrato carregado negativamente (aninico) reage eletrostaticamente com um corante carregado positivamente (catinico). Corantes:

Azul de metileno

Azul de alcian Azul de toluidina

Basofilia

Basofilia
Fosfatos (cidos nuclicos)
Grupamentos negativos

Sulfatos (Glicosaminoglicanos sulfatados)

Carboxilas
(Protenas e acares cidos)

Reao de Acidofilia - Corantes cidos (Aninicos) Os corantes reagem com os elementos que possuem cargas positivas na clula Ex: protenas, que podem apresentar radicais bsicos de seus aminocidos ionizados (NH3+).
Fast green Orcena

Xilydine Ponceau

Srius Red

Reao de Acidofilia

Grupamentos se ionizam na dependncia de pHs diferenciados Obtidos a partir de soluo tampo em que os corantes so diludos

SUBSTRATO

CORANTE
+ catinico -

EXEMPLOS
Azul de Toluidina Azul de metileno Azul de alcian Hematoxilina

BASOFILIA - aninico

ACIDOFILIA + catinico - aninico

Xylidine ponceau Sirius red Fast Green Eosina Orcena

Hematoxilina Eosina Hematoxilina (+) Substratos (-) Ncleos Eosina (-) Substratos (+) Citoplasma

(grupam/o NH2+) (grupam/os fostato do DNA e RNA) aminocidos bsicos (lisina, cidos nucleicos, aminocidos cidos arginina, histidina) (asprtico, glutmico). Rosa Azul

Hematoxilina Eosin

(Mus muscullus) (ASSIS & AZEREDO-OLIVEIRA, 2002)

G

Ep

A
Normal
V

ML

A
5.0 m

Prstata

Glndulas acessrias de morcego

5.0 m

Pantipo (HematocorBiolgicaR)

Reao de Acidofilia/Basofilia -Mediadas por Ligaes Eletrostticas

Colorao de rotina para anlise geral da morfologia das clulas sanguneas Facilita a identificao e diferenciao dos leuccitos Basofilia: Como a hematoxilina - grupamentos fosfatos dos cidos nuclicos (Ncleo)

Acidofilia:

Como a eosina Amino de resduos proticos (NH3)- (ncleo e Citoplasma)

PANTICO RPIDO LB 1)Finalidade: Conjunto para colorao rpida em hematologia. 2) Princpio: A extenso hematolgica submetida ao de um fixador e duas solues corantes, por meio de imerses, ao final da ltima, encontra-se pronto para leitura.

CORANTE RAPIDO PARA HEMATOLOGIA COM 1 FIXADOR-TRIARILMETANO E CORANTES / 2XANTENO / 3-TIAZINA (de 500 ml) Pantico rpido 1: compe-se por uma soluo de triarilmetano a 0,1%. Pantico rpido 2: compe-se por uma soluo de xantenos a 0,1%. Pantico rpido 3: compe-se por uma soluo de tiazinas a 0,1%.

O material deve ser mantido em temperatura ambiente, em local fresco, seco e protegido da incidncia direta de luz solar

Phrynops geoffroanus ou Cgado-de-Barbelas

Puno Cardaca

Amostras Sanguneas

Seio venoso cervical

Descartada a primeira gota tcnica de esfregao extenses sangneas - fixao.

Hemograma Contagem de trombcitos Contagem diferencial dos leuccitos: - moncitos

- linfcitos - neutrfilos - azurfilos - heterfilos - eosinfilos - basfilos

Clulas Vermelhas de Quelnios

Atuam na inflamao, promovem fagocitose; como clula hemosttica

Clulas brancas de Quelnios

Moncito Combate a doenas infecciosas. 3% a 20%

Linfcitos

Citoplasma basoflico. Resposta imune - infeco viral. 15% a 90%

Neutrfilo Azurfilo+Moncito
Respondem infeces bacterianas. 0,5% a 10%

2% a 5%

Clulas brancas de Quelnios

Heterfilo Combate a infeces bacterianas. 20% a 40%

Eosinfilo+Heterfilo

Encontrados em infeces parasitrias. 7% a 20%

Reaes imunes. 10% a 25% Basfilo

Constituem o maior n de clulas do sangue Em mdia 4,5 milhes na mulher e 5,5 milhes no homem. Medem aproximadamente 7,5 um de dimetro

Agranulcitos: Ncleo sem segmentao e apenas granulaes azuroflicas, quase imperceptveis: linfcitos e moncitos.

Granulcitos: Ncleos lobulados de forma varivel (polimrficos) grnulos citoplasmticos proeminentes, cujas caractersticas tintoriais diferem conforme a classe qual pertence o granulcito: neutrfilos, eosinfilos ou basfilos.

Neutrfilo

40-70% Medem 12-15um de dimetro. O citoplasma acidfilo, com muitos grnulos finos. O ncleo possui cromatina em grumos, com 2-5 lbulos distintos Funo fagocitria.

Linfcito
20-50% Medem de 6-12 um de dimetro. Possuem citoplasma basfilo, pequeno, escasso. O ncleo apresenta-se esfrico com cromatina bastante condensada. Linfcitos T: imunidade celular Linfcitos B: produo de anticorpos.

Moncito

2-10% dimetro de 12-20 um. Apresenta um ncleo irregular, frequentemente lobulado, e citoplasma cinza-azulado opaco, com grnulos azurfilos finos. So clulas precursoras do sistema fagoctico mononuclear.

Eosinfilo

0-8% So ligeiramente maiores do que os neutrfilos: 12-17 um. O ncleo geralmente bilobulado, mas pode ser trilobulado. Os grnulos so esfricos e maiores, preenchem o citoplasma e coram-se de avermelhado (eosina). So importantes nas doenas alrgicas e parasitrias

Basfilo 0-3% Apresentam o citoplasma com granulaes pretas e grandes, irregulares, que tm afinidade por corantes bsicos. O ncleo tem dois segmentos, geralmente encobertos pelas granulaes. Esto envolvidos nas reaes imediatas de hipersensibilidade (asma).

Plaquetas So pequenos fragmentos citoplasmticos presentes no sangue circulante. Medem 2-4um de dimetro. Atuam na coagulao sangunea, na retrao e dissoluo de cogulos