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Enzimas

09/05/2013

HISTRICO

Catlise biolgica incio sc. XIX digesto da carne: estmago; digesto do amido: saliva.

Dcada de 50 Louis Pasteur - concluiu que a fermentao do acar em lcool

pela levedura era catalisada por fermentos = enzimas

Eduard Buchner (1897) extratos de levedo podiam fermentar o acar at lcool; enzimas funcionavam mesmo quando removidas da clula viva.

James Sumner (1926)


Isolou e cristalizou a urease; Cristais eram de protenas; Postulou que todas as enzimas so protenas.

John Northrop (dcada 30) Cristalizou a pepsina e a tripsina bovinas;

Dcada de 50 sc. XX 75 enzimas isoladas e cristalizadas; Ficou evidenciado carter protico.

Atualmente + 2000 enzimas so conhecidas.

INTRODUO

Definio:
Catalisadores biolgicos; Longas cadeias de pequenas molculas chamadas aminocidos.

Funo: Viabilizar a atividade das clulas, quebrando molculas ou juntando-as para formar novos compostos.

Com exceo de um pequeno grupo de molculas de RNA com propriedades catalticas, chamadas de RIBOZIMAS, todas as enzimas so PROTENAS (globulares, de estrutura terciria).

Estrutura Enzimtica

Holoenzima

Protena
Ribozimas Apoenzima ou Apoprotena

Cofator
Pode ser: on inorgnico molcula orgnica

RNA

Coenzima

ENZIMAS:
Apresentam alto grau de especificidade; So produtos naturais biolgicos; Reaes baratas e seguras; So altamente eficientes, acelerando a velocidade das reaes

(108 a 1011 + rpida);


So econmicas, reduzindo a energia de ativao;

No so txicas;
Condies favorveis de pH, temperatura, polaridade do solvente

e fora inica.

Conceitos

As enzimas...
Aceleram reaes qumicas

H2O2

Catalase

H2O +

O2

Ex: Decomposio do H2O2 Condies da Reao Sem catalisador Platina Enzima Catalase Energia livre de Ativao KJ/mol Kcal/mol 75,2 18,0 Velocidade Relativa 1

48,9
23,0

11,7
5,5

2,77 x 104
6,51 x 108

No so consumidas na reao

H2O2

Catalase

H2O + O2

E+S

E+P

Atuam em pequenas concentraes

1 molcula de Catalase

decompe 5 000 000 de molculas de H2O2 pH = 6,8 em 1 min

Nmero de renovao = n de molculas de substrato convertidas


em produto por uma nica molcula de enzima em uma dada unidade de tempo.

No alteram o estado de equilbrio


Abaixam

a energia de ativao;

No apresenta efeito termodinmico global


G

no afetada pela enzima.

Energia de ativao sem enzima


Diferena entre a energia livre de S e P

Energia de ativao com enzima

Caminho da Reao

Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das enzimas

originou Chave-Fechadura , que considera que a enzima possui sitio ativo complementar ao substrato.

Koshland (1958): Encaixe Induzido, enzima e o substrato

sofrem conformao para o encaixe. O substrato


distorcido para conformao exata do estado de transio.

Nomenclatura e Classificao

Sculo XIX - poucas enzimas identificadas


Adio do sufixo ASE ao nome do substrato: Ex: - gorduras (lipo - grego) LIPASE

- amido (amylon - grego) AMILASE


Nomes arbitrrios: - Tripsina e pepsina proteases

1955 - Comisso de Enzimas (EC) da Unio Internacional de Bioqumica (IUB)


nomear e classificar. Cada enzima cdigo com 4 dgitos que caracteriza o tipo de reao catalisada:

1 dgito - classe
2 dgito - subclasse 3 dgito - sub-subclasse 4 dgito - indica o substrato Ex Amilase 3.2.1 ( classe 3 = grupo das hidrolases; primeira subclasse de numero 2 = grupo das hidrolases que quebram carboidratos; segunda subclasse de numero 1 = as glicosidases

Fatores que influenciam a atividade enzimtica

A atividade enzimtica influenciada por:

pH;

temperatura.

pH
O efeito do pH sobre a enzima deve-se s variaes

no estado de ionizao dos componentes do sistema

medida que o pH varia.

Enzimas grupos ionizveis, existem em estados

de ionizao.

TEMPERATURA

temperatura dois efeitos ocorrem: (a) a taxa de reao aumenta, como se observa na maioria das reaes

qumicas;
(b) a estabilidade da protena decresce devido a desativao trmica. O efeito da temperatura depende:

- pH e a fora inica do meio; - a presena ou ausncia de ligantes.


A temperatura tima para que a enzima
atinja sua atividade mxima, a

temperatura mxima na qual a enzima possui uma atividade cte. por um perodo de tempo.

CINTICA ENZIMTICA

Cintica Enzimtica estudada para:

Determinar as constantes de afinidade do S e dos inibidores; Conhecer as condies timas da catlise; Ajudar a elucidar os mecanismos de reao; Determinar a funo de uma determinada enzima em uma rota metablica.

Victor Henri (1903): E + S ES

Em 1913: Leonor Michaelis -Enzimologista Maud Menten - Pediatra

E+S
Etapa rpida

ES

E+P
Etapa lenta

APLICAES

TIPOS DE APLIES INDUSTRIAIS


Alimentos Raes animais Papel e celulose Couro Txtil

ALIMENTOS

Panificao:

- Melhoria de cor, sabor e estrutural atravs

de

preparado enzimtico que contm alfa-amilase

fngicas. Atua sobre a farinha de trigo, acelerando


o processo de fermentao devido a uma maior formao de acares para o fermento.

RAES ANIMAIS

Utilizao de enzimas nas raes para leites durante o

perodo de lactao:

- Emprego de Xilanase, Beta-glucanase e Alphaamylase com o objetivo de digesto de amido e, em

decorrncia disso, ganho de peso e abate precoce.

INDSTRIA DE PAPEL E CELULOSE

Remoo de depsitos em mquinas de papel:

- Substituio de cidos fortes por enzimas com o objetivo de assegurar a integridade fsica dos funcionrios e cumprir leis ambientais.

INDSTRIA DO COURO
Uma das primeiras partes do processo de transformao de uma

pele em couro a eliminao dos plos que ainda venham agarrados.


O processo usado at agora envolvia sulfureto de sdio, um qumico com um cheiro to intenso que impossvel passar por uma fbrica de curtumes sem dar por ela. Em alternativa, foi sugerido indstria que passe a usar enzimas o mau cheiro desaparece e a carga poluente dos efluentes eliminada.

INDSTRIA TXTIL

Usa-se a amilase bacteriana (Bacillus subtilis e Bacillus


lichenformis) estvel ao calor para eliminar a goma dos produtos txteis, substituindo os cidos e lcalis na hidrlise do amido.

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