ELIZALDE RIVAS GABRIEL ALEJANDRO. HERNNDEZ JENNIFER. MARTNEZ DAZ JUAN CARLOS.

PREZ DAZ DIANA LARISA SANTAMARA RIVERA MA. LIZBETH.

INTRODUCCIN
CARBOHIDRATOS. Grupo de compuestos formados por C, H 2 y O2. Son aldehdos o cetonas con mltiples grupos hidroxilo. Sirven como almacn de energa, combustible y metabolitos intermediarios. Los azucares Ribosa y desoxirribosa forman parte del armazn estructural del RNA y DNA. Los polisacridos son elementos estructurales de las paredes celulares de las bacterias y plantas.
-Monosacridos -Polisacridos -Alcoholes polihdricos

METABOLISMO.

SUMA DE TODOS LOS PROCESOS QUIMICOS QUE OCURREN DENTRO DE UN ORGANISMO.

ANABOLISMO. ENCARGADA DE LA SNTESIS DE MOLCULAS ORGNICAS MS COMPLEJAS A PARTIR DE OTRAS MAS SENCILLAS REQUIRIENDO PARA ELLO ENERGA. CATABOLISMO. TRANSFORMACIN DE MOLCULAS ORGNICAS O BIOMOLCULAS COMPLEJAS EN MOLCULAS SENCILLAS, PRODUCIENDO ENERGA LA CUAL SE ALMACENA COMO ATP.

METABOLISMO. oFERMENTACIN.

oRESPIRACIN.

oFOTOSNTESIS.

FERMENTACIN.
Proceso metablico de oxidacin-reduccin anaerbica, en la cual un sustrato orgnico sirve como aceptor de electrones en lugar del oxgeno.
La fermentacin de sustratos orgnicos como los carbohidratos dan tanto productos finales reducidos como oxidados.

TIPO DE FERMENTACIN. ALCOHLICA HOMOLCTICA HETEROLCTICA

PRODUCTOS PRINCIPALES. ETANOL Y CO2. CIDO LCTICO. CIDO LCTICO, ETANOL Y CO2. 2,3-BUTANODIOL, BUTANOL,SUCCINATO, LACTATO, ACETATO, FORMIATO, H2O Y CO2. BUTIRATO, ACETATO Y CO2. PROPIANATO, ACETATO Y CO2.

EJEMPLOS
ALGUNAS LEVADURAS Y ZIMOMONAS

Lactobacillus. Streptococcus Lactobacillus. Leuconostoc

ENTEROBACTERIAS:

CIDA MIXTA

BUTRICA

PROPINICA

Shigella sp. Salmonella sp., Klebsiella sp., Escherichia coli Clostridium butiricum Propionibacterium, Clostridium propionicum

CIDOS ORGNICOS

Los cidos orgnicos son una variedad de cidos que se concentran habitualmente en los frutos de numerosas plantas. Son compuestos orgnicos que poseen al menos un grupo cido. Se distinguen el cido ctrico, el mlico, el tartrico, el saliclico, el oxlico, y los grasos.

En qumica orgnica, se denominan cidos orgnicos a aquellas sustancias que poseen al menos un grupo carboxilo (-COOH). R-COOH +H2O <=> R-COO- + H3O+

Los cidos orgnicos se denominan alifticos, si R es una cadena lineal de carbonos y aromticos si R es un anillo de carbonos.

Ac. malnico

Ac. benzoico

ALGUNAS PROPIEDADES DE LOS CIDOS ORGNICOS

Fsicas:
- Los primeros miembros son lquidos de olor algo picante y sabor cido, solubles en agua. - Entre el de 4 carbonos y el de 9 son aceitosos - A partir de 10 carbonos se llaman cidos grasos superiores, de consistencia slida, sin aroma e insolubles en agua.

Qumicas:
- Presentan carcter cido. - Lo cual genera una disminucin en el pH. - Formacin de sales.

OBTENCIN:
Los cidos orgnicos son compuestos que se forman al oxidar un aldehdo. Esto ocurre porque el H2 del grupo funcional aldehdo (-CHO) se sustituye por el grupo hidroxilo (-OH) Por oxidacin moderadamente un alcohol primario (en presencia de un catalizador como KMnO4 ) el cual producir su respectivo aldehdo y a su vez al seguir oxidando producir el respectivo cido carboxlico.

FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS EN TUBOS DE DURHAM

El patrn de fermentacin de un microoganismo es de gran valor taxonmico y es influenciado por el tipo de sustrato disponible en el medio de cultivo, su pH y la temperatura de incubacin. Los caldos para fermentacin tienen indicadores de pH, cuyo cambio de color evidencia la produccin de cidos. Adems a estos tubos se les coloca una campana de Durham para detectar la produccin de gas.

CALDO BASE ROJO DE FENOL

Extracto de carne 1 g Proteosa peptona No. 3 10 g Cloruro de sodio 5g Rojo de fenol 0.018g Agua 1000 ml pH a 7.4 Medio de cultivo selectivo usado para la fermentacin de azucares, como lo son Glucosa, Sacarosa y Manitol.

MTODO:

Inocular con una asada de cada microorganismo, los tubos de Durham con los diferentes azucares o poli-alcoholes.

Incubar tubos a 37C 24 horas.

Observar el resultado.

INTERPRETACIN DE RESULTADOS POSITIVO (+) Produccin de cido: color amarillo, pH= 6.8 NEGATIVO (-) El indicador no vira. Color rosa rojizo, no hubo produccin de acido.

Produccin de gas: burbuja de gas Sin produccin de presente en el tubo gas: ausencia de de Durham. burbuja.

RESULTADOS DE LA PRACTICA

Klebsiella pneumoniae

Escherichia coli

Bacillus subtilis

Shigella flexnery

Proteus vulgaris

Pseudomonas aeruginosa

Prueba

Klebsiella pneumoni ae

E. col i

Bacillu s subtili s

Salmonel la typhi

Shigell a flexner i

S. aure us

Pseudomon as aeruginosa

Proteu s vulgar is

Glucos a

Acido Gas

+ +

+ +

+ -

+ -

+ +

+ -+

+ +

+ +

Sacaro sa
Manito l

Acido
Gas Acido Gas

+
+ +

+ + +

+
+ +-

+ -

+ +

+
+ +-

+
-+

FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS EN MEDIO DE KLIGLER

FUNDAMENTO.

Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.

COMPOSICION.
FRMULA EN GRAMOS POR LITRO PEPTONA DE CARNE CLORURO DE SODIO LACTOSA TRIPTEINA GLUCOSA CITRATO DE HIERRO Y AMONIO 13.0 5.0 10.0 10.0 1.0 0.5

TIOSULFATO DE SODIO
ROJO DE FENOL AGAR

0.3
0.025 15.0 PH FINAL= 7.3 0.2

METODOLOGA

Inocular por picadura y en la superficie de los tubos de Kligler cada una de las cepas proporcionadas.

Incubar los tubos a 37C durante 24 hrs

Observar el resultado

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.

A. Una superficie alcalina y un fondo cido (rojo/amarillo) indica fermentacin solo de la glucosa.

negro indica produccin de H2S.

B. Una superficie y fondo cido (amarillo/amarillo) indica la fermentacin de glucosa y lactosa.

C. Una superficie y fondo alcalino (rojo/rojo) indica que no hubo fermentacin de ninguno de los carbohidratos. D. Una superficie cida y un fondo alcalino (amarillo/rojo) indica fermentacin solo de lactosa. E. La presencia de burbujas o fracturas en el medio indica produccin de gas. F. La presencia de un precipitado

RESULTADOS DE LA PRACTICA

Klebsiella pneumoniae

Escherichia coli

Bacillus subtilis

Salmonella typhi

Shigella flexneri

Staphylococcus aureus

Pseudomonas aeruginosa

Proteus vulgaris

Prueba De Kligler

Klebsiella pneumoniae

E . c o l i

Bacillus subtilis

S. typhi

S. flexneri

S. aureus

P. aeruginosa

Proteus vulgaris

GLUCOSA

+ -

+ + -

+ -

+ +

+ -

+ +

LACTOSA

GAS

H2S

FERMENTACIN DE CARBOHIDRATOS Pruebas rojo de metilo y de Voges Proskauer

PRINCIPIO Determinar la capacidad de algunos microorganismos para producir un producto final neutro, acetilmetilcarbinol (AMC, acetona), a partir de la fermentacin de la glucosa. Los productos finales de la fermentacin de la glucosa son cidos. Fermentacin acido mixta.

La prueba de Voges Proskauer se basa en la deteccin de la acetona, un precursor en la produccin del 2,3-butanodiol.

Los microorganismos fermentadores de cidos mixtos pueden ser divididos a su vez en dos grupos: 1)Los que producen cidos, pero no 2,3-butanediol, como la Escherichia coli (VP-)

2) Los que si producen 2,3-butanediol, como los grupos Klebsiellaenterobacter (VP+)

MEDIO DE CULTIVO CALDO RM-VP

COMPOSICION: - Peptona regulada 7 g - Dextrosa 5 g -Fosfato dipotsico 5 g - Agua aforar hasta 1000ml - Ajustar pH a 6.9

ROJO DE METILO (RM) 5 gotas del reactivo rojo de metilo

VOGES PROSKAUER (VP) - 6 gotas -naftol (intensificador del color) - 2 gotas de KOH-creatina (agente oxidante)

QUIMICA DE ACCIN DEL REACTIVO

Voges Proskauer (VP) Positivo Color rojo rosado en la superficie del medio (presencia de acetona). Negativo Color amarillo en la superficie del medio . Puede formarse un color cobrizo, pero aun as la reaccin es negativa.

Rojo de Metilo (RM) Positivo Formacin de un anillo color rojo en la superficie del medio. Negativo Color amarillo en la superficie del medio .

RESULTADOS OBTENIDOS EN LABORATORIO Prueba

RM Otras VP
Klebsiella pneumoniae E. coli Bacillus subtilis S. typhi Shigella flexneri S. aureus P. aeruginos a Proteus vulgaris

+ -

+/-/-

+ -

+/+ -/-

+/-/-

+/-/-

-/+ -/-

RESULTADOS BIBLIOGRAFICOS Prueba

RM Otras VP
Klebsiella pneumoniae E. coli Bacillus subtilis S. typhi Shigella flexneri S. aureus P. aeruginos a Proteus vulgaris

+ -

+ -

+ -

+ -

+ -

UTILIZACIN DE CIDOS ORGNICOS

Sembrar el tubo con agar citrato de Simmons por estra abierta en la superficie.

Sembrar el tubo con caldo malonato con una asada.

Incubar a 37C por 24h.

UTILIZACION DE CIDOS ORGNICOS. FUNDAMENTO DE UTILIZACION DE CITRATO. El citrato de sodio es una sal del cido ctrico, compuesto orgnico simple que se encuentra como uno de los metabolitos del ciclo de los cidos tricarboxlicos (ciclo de Krebs). Algunas bacterias pueden obtener energa de fuentes distintas de la fermentacin de los hidratos de carbono, con el citrato como nica fuente de carbono. La medicin de esta caracterstica es importante para identificar muchos miembros de la familia Enterobacteriaceae . Cualquier medio usado para detectar la utilizacin del citrato por las bacterias que se van a probar debe carecer de protenas e hidratos de carbono como fuente de carbono.

Sulfato de magnesio 0.2g

Fosfato monoamniaco 1g. Fosfato dipotsico 1g. Citrato de sodio 2g.

Composicin.

Cloruro de sodio 5g.

Agar 15g. Azul de bromotimol 0.08g. Agua, aforar a 1000ml. Ajustar a pH 6.8.

UTILIZACIN DE MALONATO. PRINCIPIO.

Si un microorganismo es capaz de utilizar el malonato de sodio como nica fuente de carbono, al mismo tiempo que utilizar el sulfato de amonio como fuente de nitrgeno, se produce un aumento de la alcalinidad que se debe a la formacin de Hidrxido de sodio (NaOH).

Sulfato de amonio 2g.

Composicin.

Fosfato dipotsico 0.6g Fosfato monopotsico 0.4g

Cloruro de sodio 2g.

Malonato de sodio 3g Agua, aforar a 1000ml Ajustar pH a 6.7

PRUEBA DE MALONATO.

Positivo(+): Reaccin alcalina pH 7.6, color azul plido a color azul Prusia en todo el medio. Negativo(-): Sin cambios de color(verde) o amarillo (solo fermentacin de glucosa).

Prueba

Klebsiella pneumoniae

E . c o li

Bacillus subtilis

S. typhi

Shigella flexneri

S. aureus

P. aerugi nosa

Proteus vulgaris

CITRATO Otras LACTOSA

+ +

+ -

+ -

BIBLIOGRAFA.

http://www.fcv.uagrm.edu.bo/sistemabibliotecario/doc_libros/576 %202631Bacteriolog%C3%ADa%20diagn%C3%B3stica%20by%20Br os-20100817-170030.pdf http://books.google.com.mx/books?id=vwB0fgirgN0C&pg=PA275&l pg=PA275&dq=utilizacion+de+carbohidratos+y+acidos+organicos& source=bl&ots=xXugx3tjxc&sig=VU0rwcx7sE5gSVintmLpIdAC5x4& hl=es&sa=X&ei=-DJRUezyG6KE2gWn4CQDA&ved=0CEIQ6AEwBA#v=onepage&q=utilizacion%20de%20c arbohidratos%20y%20acidos%20organicos&f=false http://edicion-micro.usal.es/web/identificacion/AyudaPruebas.html