Eduardo Noriega Dulce Flores

*Carolina Chvez *Brenda Martnez Magali Gaona

Sir Hans Krebs 1937

Musculo pectoral de paloma
El citrato El isocitrato Cis aconitato Estimulan la oxidacion del piruvato y el consumo de oxigeno

El malonato (inhibidor de la succinato deshidrogenasa) logra bloquear la oxidacin del piruvato

La administacion de piruvato y oxalacetato al tejido provocaba la acumulacin de citrato

Adicin del grupo acetilo al oxalacetato (o sntesis del citrato)

COO C=O CH
2

COO
Oxalacetato

El oxalacetato es un compuesto de 4 carbonos Tambien llamado cido oxalactico

Acetil - CoA

COO C=O CH
2

COO
Oxalacetato

El grupo acetilo o acetil proviene CH 2 de la glucolisis o de la HO CbetaCOO Oxidacion de acidos CH grasos y 2 Contiene 2 COO carbonos

Citrato

Acetil - CoA

COO C=O CH
2

COO
Oxalacetato

La coenzima A (Co A) es 2 una CH coenzima HO C COO especializada en el transporte CH de dos de grupos 2 Carbonos como COOdel Es el caso grupo acetil Citrato

Acetil - CoA

COO C=O CH
2

COO CH 2 HO C COO
2

COO
Oxalacetato

CH

COO

Acetil - CoA

CoA - SH

COO C=O CH
2

COO CH 2

HO C

COO
2

COO
Oxalacetato

CH

COO

Acetil - CoA

CoA - SH

COO C=O CH
2

COO CH 2

HO C

COO
2

COO
Oxalacetato

CH

COO

Acetil - CoA

Acetil - SH

COO C=O CH
2

COO

COO
Oxalacetato

Citrato sintasa

La citrato sintasa CH 2 es una enzima que actua HO C sobre COO el acetil CoA Rompiedolo CH para 2 que pueda salir la CoACOO y formar El citrato Citrato

Acetil - CoA

Acetil - SH

COO C=O CH
2

COO CH 2

COO
Oxalacetato

Citrato sintasa

HO C

COO
2

CH

COO
Citrato

Enzima : citaro sintasa

Coenzima : CoA

Sustrato : oxalacetato o acido oxlico u oxalactico Tipo de reaccion : sintesis, adicin o acilacin Producto : acido citrico o citrato

Isomerizacin del citrato a isocitrato

COO CH 2 HO C COO
2

CH

COO
Citrato

COO CH 2 HO C COO
2

CH

COO
Citrato

COO CH 2 HO C COO
2

COO CH 2 C COO

CH

HO

CH
COO
Isocitrato

COO
Citrato

El isocitrato es CH un isomero del 2 acido citrico y HO la C COO diferencia esta en en el CH hidroxilo grupo 2 (OH) se COO en encuentra el carbono 2 Citrato

COO

COO CH 2 C COO

HO

CH
COO
Isocitrato

COO CH 2 HO C COO
2

COO aconitasa CH
2

C COO

CH

HO CH COO
Isocitrato

COO
Citrato

COO CH 2 HO C COO
2

COO aconitasa CH
2

C COO

CH

COO
Citrato

La aconitasa actua HO CHal cido deshidratando 2 citrico formando un COO subproducto llamado cis aconitato Isocitrato

COO CH 2 HO C COO
2

COO CH 2 HO C COO
2

CH

CH

COO
Citrato

COO
Cis aconitato

COO CH 2 HO C COO
2

COO CH 2 C COO

CH

CH
COO
Cis aconitato

COO
Citrato

COO CH 2 C COO aconitasa

COO CH
2

C COO

CH
COO
Cis aconitato

Despues la aconitasa HO CH hidrata al cis aconitato 2 cambiando el orden de COO los Hidrogenos y el Oxigeno Isocitrato

COO CH 2 C COO aconitasa

COO CH
2

C COO

CH
COO
Cis aconitato

HO CH COO
Isocitrato

Enzima : aconitasa
Sustrato : cido citrico o citrato

Tipo de reaccion : isomerizacin

Producto : cido isocitrico o isocitrato Subproducto : cis aconitato

Oxidacion del isocitrato hasta oxalasuccinato

Descarboxilacin del oxalasuccinato hasta el cetoglutarato

COO CH 2 C COO
2

COO CH 2 C COO

HO

CH

CH
COO
Cis aconitato

COO
Isocitrato

COO CH 2 C COO
2

COO CH 2 C COO

HO

CH

CH
COO
Cis aconitato

COO
Isocitrato

COO CH 2 C COO
Isocitrato deshidrogenasa

COO CH 2

C -- COO O=C COO

oxalasuccinato

HO

CH

COO
Isocitrato

COO CH 2 C COO
2

COO CH 2 C COO

HO

CH

CH
COO
Cis aconitato

COO
Isocitrato

COO CH 2 C

NAD+

COO CH 2

COO
2

C -- COO O=C COO

oxalasuccinato

HO

CH

COO
Isocitrato

COO CH 2 C

NAD+

COO CH 2

COO
2

C -- COO O=C COO

oxalasuccinato

HO

CH

COO
Isocitrato

COO CH 2 C

NAD+

NADH + H

COO CH 2

COO
2

C -- COO O=C COO

oxalasuccinato

HO

CH

COO
Isocitrato

Enzima : Isocitrato deshidrogenasa

Sustrato : cido isocitrico o isocitrato

Tipo de reaccion : deshidorgenacin y oxidacion Producto : oxalasuccinato o acido oxalasuccinico Coenzima : NAD

La enzima COO COO isocitrato deshidrogenasa CH 2 CH 2 debilita el enlace C COO H 2C del Isocitrato grupo carbonilo deshidrogenasa central H=C O=C y el acido isocitrico COO en lo pierde COO forma de CO2 cetoglutarato oxalasuccinato

La enzima COO COO isocitrato deshidrogena CH 2 CH 2 sa debilita el enlace C COO H 2C del Isocitrato grupo deshidrogenasa carbonilo HO CH O=C 2 central y el COO acido COO isocitrico lo cetoglutarato Isocitrato pierde en forma de CO2

CO2

COO CH 2 C COO

COO CH 2
Isocitrato deshidrogenasa O=C

H 2C

H=C
COO
oxalasuccinato

COO
cetoglutarato

COO CH 2 C

NAD+

NADH + H

COO CH 2

COO

O=C
COO

Isocitrato deshidrogenasa O=C

H 2C

COO
cetoglutarato

oxalasuccinato

El a cetoglutarato es una COO molecula de 5 atomos de carbono CH 2 C COO

2

COO CH 2 H 2C

HO

CH

O=C COO
cetoglutarato

COO
Isocitrato

Enzima : isocitrato deshidrogenasa

Sustrato : oxalasuccinato

Tipo de reaccion :descarboxilacion

Producto : cetoglutarato o cido cetoglutarico

Oxidacion del cetoglutarato y sintesis del succinil CoA

COO CH 2 H C
2

O=C
COO
cetoglutarato

Gracias COO a un complejo CH 2 multiensimatico cetoglutarato C deshidrogenasa el cetoglutarato pierde un atomo COO de carbono cetoglutarato liberado como CO2

COO CH 2 H C
2

COO CH 2
cetoglutarato deshidrogenasa

O=C
COO

COO
cetoglutarato

cetoglutarato

COO CH 2 H C
2

COO CH 2
cetoglutarato deshidrogenasa

O=C
COO

COO
cetoglutarato

cetoglutarato

COO CH 2 H C
2

COO CH 2
cetoglutarato deshidrogenasa

O=C
COO

COO
cetoglutarato CO 2

cetoglutarato

COO CH 2 H C
2 2

COO CH 2 H C

O=C
COO
cetoglutarato

O=C

De esta manera queda un COO de cuatro compuesto atomos de carbono

COO CH 2 H C
2

CH 2

H C
2

O=C
COO
cetoglutarato

O=C

COO CH 2 H C
2

CoA

COO CH 2 H C
2

A este compuesto de O=C cuatro carbonos se le agrega denuevo la COO CoA para llevarlo cetoglutarato hacia el proximo proceso

O=C

S-CoA

COO CH 2 H C
2 2

COO CH 2 H C

O=C
cetoglutarato

O=C

COO Succinil CoA

S-CoA

Enzima : complejo multiensimatico cetoglutarato deshidrogenasa

Sustrato : cetoglutarato o cido cetoglutarico Tipo de reaccion : descarboxilacion Producto : succinil CoA

Hidrlisis del succinil CoA y formacin del GTP

COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 O=C O=C

H2O Succinil CoA sintetasa

COO Gracias a la succinil CoA Succinil CoA cetoglutarato

S-CoA

sintetasa, el succinil CoA se hidrolisa liberando la CoA y una molecula de acido succinico

COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 O=C O=C

H2O Succinil CoA sintetasa

Acido succinico o succinato

COO Succinil CoA cetoglutarato

S-CoA

CoA - SH

COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 O=C O=C

paralelamente

Acido succinico o succinato

Succinil CoA sintetasa

COO Succinil CoA cetoglutarato

S-CoA

CoA SH

La hidrlisis del succinil CoA libera la suficiente energia para que paralelamente un el GDP capte una molescula de P y formen GTP, el cual dara origen al ATP

GDP

GTP

paralelamente

Enzima : succinil CoA sintetasa

Sustrato :succinil CoA

Tipo de reaccion :hidrlisis y sintesis

Producto : cido succinico o succinato

Oxidacin del succinato o sintesis del fumarato

COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 O=C O=C Succinato COO

COO CH HC Succinato deshidrogensa COO

cetoglutarato Esta ensima es una oxidoreductasa y deshidrogenasa a la vez

FAD FADH COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 Succinato O=C deshidrogensa O=C Succinato COO
cetoglutarato

COO CH HC COO

Reduce al FAD

FAD FADH COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 Succinato O=C deshidrogensa O=C Succinato COO
cetoglutarato

COO CH HC COO

Deshidrogena al succinato

FAD FADH COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 Succinato O=C deshidrogensa O=C Succinato COO
cetoglutarato

COO CH HC COO

Oxida al succinato

FAD FADH COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 Succinato O=C deshidrogensa O=C Succinato COO
cetoglutarato

COO CH HC COO

De esta manera obtenemos al fumarato

FAD FADH COO COO CH 2 CH 2 H2 C H C 2 Succinato O=C deshidrogensa O=C Succinato COO
cetoglutarato

COO CH HC COO

Fumarato

Enzima : succinato deshidorgenasa

Coenzima : FAD (mucha mas poder reductor) Sustrato :succinato o cido succnico

Tipo de reaccion :oxidacion, reduccion y deshidrogenacion Producto : cido furmico o fumarato

Hidratacin del fumarato o sintesis del malato

COO CH HC COO Fumarasa

Fumarato
Esta enzima es una hidratasa y actua hidratando al fumarato

COO CH HC COO

H2O

Fumarasa
Como consecuencia de la unin del fumarato mas agua se forma un a - hidroxicido

Fumarato

COO CH HC COO

H2O HO
Fumarasa

COO CH CH 2 COO Malato

Fumarato

Enzima : fumarasa
Sustrato : cido furmico o fumarato

Tipo de reaccion :hidratacin

Producto :cido mlico o malato

Oxidacin del malato

COO

HO CH
CH 2 COO Malato
Esta enzima es una oxidorreductasa

Malato deshidrogenasa

COO

NAD

NADH + H

HO CH
CH 2 COO Malato
Esta enzima reduce al NAD que trabaja como coenzima

Malato deshidrogenasa

COO

NAD

NADH + H

HO CH
CH 2 COO Malato
El NAD oxida el grupo alcohol del a - hidroxicido hasta un grupo carboxilo

Malato deshidrogenasa

COO

NAD

NADH + H

HO CH
CH 2 COO Malato
El NAD oxida el grupo alcohol del a - hidroxicido hasta un grupo carboxilo

Malato deshidrogenasa

COO

NAD

NADH + H COO
C=O

HO CH
CH 2 COO Malato

Malato deshidrogenasa

CH 2 COO

De esta manera se obtiene el oxalacetato o cido oxalactico para el primer paso del ciclo de Krebs

COO C=O CH
2

COO Oxalacetato

Enzima : malato deshidrogenasa

Coenzima: NAD

Sustrato : cido mlico o malato

Tipo de reaccion :oxidacion y deshidrogenacin Producto :cido oxalactico u oxalacetato

 Por

cada molcula de Acetil-CoA se formarn

3 NADH 1 FADH 1 ATP o GTP 2 CO2

Por

cada molcula de glucosa se formarn

6 NADH 2 FADH 2 ATP o GTP 4 CO2

Regulacion de las enzimas en el ciclo de Krebs

Muchas de lasa enzimas son reguladas por una retroalimentacin negativa Citrato sintasa
Isocitrato deshidrogenasa

cetoglutararo deshidrogenasa

Son inhibidas por las concentraciones de ATP

 El

ciclo del acido ctrico es regulado por precisin (de manera estrecha) para que se satisfagan de manera constante los requerimientos energticos y de biosntesis de la clula. La regulacin se consigue principalmente por la modulacin de enzimas clave y la disponibilidad de determinados sustratos. Como ya se comento, el ciclo depende de un aporte continuo de NAD,FAD Y ADP (es decir productores de energia).

 La

regulacin se hace por medio de 3 enzimas: La citratosintasa La isocitrato deshidrogenasa La cetoglutarato deshidrogenasa

Estas

tres enzimas operan lejos del equilibrio y tambin catalizan reacciones que representan importantes puntos metablicos.

Es la primera enzima del ciclo Cataliza la formacin del citrato a parir del acetil-coA y oxalacetato dado que la concentracin de acetil-coA y oxalacetato son bajas en la mitocondria con relacin a la cantidad de la enzima cualquier aumento de la disponibilidad del sustrato estimula la sntesis de citrato Concentraciones elevadas de succinil Coa y de citrato inhibiendo la citratosintasa actuando como inhibidores alostericos Es inhibida por : citratio ,NADH, ATP Y SUCCINIL COA

 Cataliza

la segunda reaccin del ciclo regulada en un extremo. Es inhibida por : NADH y ATP Es activada por: NAD+ y ADP Esta muy regulada debido a su importante papel del metabolismo del citrato. La conversacin de citrato a isocitrato es reversible

 El

trasporte del citrato saca de la mitocondria al acetil CoAndebido a que este no puede atravesar la membrana mitocondrial interna ya que esto este esta en el citoplasma el citrato se fracciona por la citratoliasa y el acetil CoA que se forma es utilizado en varios procesos de biosntesis(como la sntesis de cidos grasos). el oxalacetato se utiliza en reacciones de biosntesis o puede convertisrse en malato

Puede volver a entrar a la mitocondria y convertirse otras ves en oxalacetato (es por lo que decimos que esta enzima es reversible). O puede convertirse en el citoplasma en piruvato por la enzima malica (el piruvato puede volver a entrar a la mitocondria)

 Es

regulada de manera estricta debido a la importancia del -cetoglutarato en numerosos procesos metablicos. Por ejemplo metabolismo de los A.A Al aumento del suministro celular de NADH la enzima se inhibe Activada por: NAD+ y AMP(es un indicador critico de baja carga energtica)

Agente Reductor NADH FADH GTP

Moles del Ciclo de Krebs 3 1 1

Moles que forman de ATP 3 moles 2 mol 1 mol Total

Moles formados Totales de ATP 9 moles 2 moles 1 mol 12 moles de ATP