BIOLOGIA

.FORENSE
MICROBIOLOGIA

MAY. S. PNP OSWALDO PERLECHE P.

LA DIRECCION NACIONAL DE CRIMINALISTICA

BRINDA EL APOYO TECNICO CIENTIFICO AL SERVICIO DE LA OPERATORIA POLICIAL Y LA ADMINISTRACION DE JUSTICIA

INVESTIGACION CRIMINAL Y CRIMINALISTICA

DEMOSTRAR MEDIANTE PRUEBA S LA VERDAD PROBABLE DE LA FORMA, CIRCUNSTANCIAS Y AUTORES DE UN CRIMEN. LA INVESTIGACION CRIMINAL EN PRINCIO SE BASA EN PREMISAS QUE HAN SIDO PROBADAS POR LA CRIMINALISTICA LA VERACIDAD EN EL ESCLARECIMIENTO DEL HECHO CRIMINAL

R=e P
T

EL LABORATORIO DE CRIMINALISTICA
APLICACIN DE LOS PROCEDIMIENTOS Y METODOLOGIAS DE CARCTER TECNICO- CIENTIFICO EN EL AREA DE LA CRIMINALISTICA E IDENTIFICACION POLICIAL

EQUIPO MULTDICIPLINARIO DE DIFERENTES ESPECIALIDADES

FORMULACION DE PERICIAS PERITAJES CRIMINALISTICOS NUEVAS METODOLOGIAS EN EL AMBITO DE LA CRIMINALISTICA

EL DPTO. DE BIOLOGIA FORENSE

ESTUDIO DE ELEMENTOS Y/0 EVIDENCIAS DE NATURALEZA BIOLOGICA VINCULADOS A LA INVESTIGACIONES CRIMINALISTICAS IDENTIFICACION BIOLOGICA AREAS DE ESTUDIO:
HEMATOLOGIA ESPERMATOLOGIA TRICOLOGIA MICROBIOLOGIA B. MOLECULAR OTRAS: INMUNOLOGIA ECOLOGIA ENTOMOLOGIA BIO -ANTROPOFISICO

LA CRIMINALISTICA Y LA INVESTIGACION DE DELITOS Y/O RIESGOS DE ORIGEN BIOLOGICO

1. LA OPERATORIA POLICIAL DEMANDA DE PERSONAL ESPECIALIZADO EN LA INVESTIGACION DE POSIBLES EVENTOS DELICTIVOS QUE DIRECTA O INDIRECTAMENTE COMPROMETEN DE MANERA PELIGROSA LA SALUD HUMANA Y EL EQUILIBRIO AMBIENTAL.
DELITOS CONTRA LA SALUD PUBLICA Y DE PELIGRO COMUN DELITOS CONTRA LOS RRNN Y EL MEDIO AMBIENTE

2. SE REQUIERE DE PERICIAS, MONITOREOS, ANALISIS DE LABORATORIO, INFORMES DE MATERIA SANITARIA Y OTROS QUE DEBEN SER PUESTOS A DISPOSICION DEL ORGANO DE LINEA Y DEL SECTOR COMPETENTE

CONSIDERACIONES: NORMAS OFICIALES SISTEMAS DE INSPECCION OFICIAL SISTEMAS DE VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA ESTANDARES DE CALIDAD NORMAS INTERNAS DE CALIDAD SISTEMAS DE ASEGURAMIENTO CALIDAD LEGISLACION AMBIENTAL NORMATIVA LEGAL Y CONTROL INSTRUMENTOS DE GESTION AMBIENTAL INVESTIGACION

DELITOS CONTRA
VIDA, CUERPO Y LA SALUD

FORMAS
HOMICIDIO ABORTO LESIONES

EVIDENCIAS MAS COMUNES

MANCHAS SANGRE, PELOS, SEMEN,FAUNA CADAVERICA SANGRE, LANUGO, MECONIO, CLOSTRO SANGRE, PELOS, SARRO UNGUEAL SEMEN, SARRO UNGUEL SEMEN ALIMENTOS ALIMENTOS DE DISTRIBUCION GRATUITA ADITIVOS, PRODUCTOS NATURALES

ANALISIS ESPECIALES Y COMPLEMENTARIOS

HOMOLOGACION DE PELOS ITB, ADN, IPM ITB ITB ITB, ADN ITB COMPARATIVO MICROSCOPICO

LIBERTAD

V. SEXUAL PROXENETISMO ADULTERACIONES VENTAS ILICITAS OTROS SALUD PUBLICA - CONTAMINACION - TID PELIGRO COMUN C. RR NN y el MA

ORDEN ECONOMICO

SEGURIDAD PUBLICA

ALIMENTOS, AGUA, MEDICINAS, P. NATURAL BOTANICAS (COCA, AMAPOLA, MARIHUANA) AGENTES BIOLOGICOS RESIDUOS SLIDOS Y LQUIDOS DESECHOS INDUDTRIALES O DOMESTICOS ESPECIES FLORA FAUNA PROTEGIDAS RECURSOS HIDROBIOLGICOS

INSP. HIGIENICO - SANITARIA PELIGRO MICROBIOLOGICO INSPECCION OCULAR PELIGRO MICROBIOLOGICO A. CRIMINALISTICA SOBRE IA I. OCULAR (AMB. NATURALES, URBANOS, AGRCOLAS, PECUARIOS) ( Comercializacin ilegal) (Mtodos prohibidos de pesca)

ECOLOGIA

RAZONES PARA APLICAR LA MICROBIOLOGIA EN EL CAMPO DE LA CRIMINALISTICA

LA INVESTIGACION DE UN PROBABLE DELITO CONTRA LA SALUD PUBLICA, DEBIDO A CIERTOS AGENTES MICROBIOLOGICOS PRESENTES EN UN ALIMENTO O GRUPO DE ALIMENTO EN PARTICULAR. LA IDENTIFICACION DE AGENTES MICROBIOLOGICOS DE PELIGRO. DETECTABLES POR METODOS SENCILLOS Y RAPIDOS. ALERTAR DE LOS POSIBLES EVENTOS QUE IMPLICAN PELIGROS MICROBIOLGICOS, CAPAZ DE DESCENCADENAR UN PROBLEMA GRAVE E INMEDIATO PARA LA SALUD PBLICA.

LA INCIDENCIA DE LOS PELIGROS CRECE DIA A DIA

ENFERMEDADES (ETAs))

ORIGEN BIOLOGICO

ORIGEN QUIMICO

50

60

70 Tiempo (Aos)

80

90

POR QUE UTILIZAR LA MICROBIOLOGIA FORESE?

1) AUMENTA LA INCIDENCIA DE PELIGROS DE ORIGEN MICROBIOLOGICO.
2) PERMITE ESTIMAR, LAS CARACTERISTICAS DEL PELIGRO MICROBIOLOGICOS, PARA ALERTAR A LAS AUTORIDADES COMPETENTES. 3) ES UNA DISCIPLINA EN EVOLUCION

MICROBIOLOGIA
Estudio de la microorganismos que se relacionan con la actividad y bienestar del hombre
LOS MICROORGANISMOS EN EL

BIOLOG.FORENSE

CAMPO DE LA CRIMININALISTICA

MICROBIOL.APLICADA
AGENTES BIOLG. SUST. DERIV.

MICROORGANISMOS DE AMBIENTES ESPECIALES

MICROORGANISMOS INDESEABLES

MICROORGANISMOS ESPECIALES DE USO NOCIVO EN POBLACION

***
MICROORGANISMOS
BACT.-MOHOS-LEVAD.

****
PATOGENOS
MICROORGANISMOS Y POLUCION

BACTERIAS-MOHOS RICKETSIAS-VIRUS

TOXINAS SUSTANCIA BILOGICAMENT. DERIVADA

MICROORGANI SMOS GENETICAMEN TE MODIFICADOS (OGM)

ALGAS -PROTOZOOS

MICROORGANISMOS DETERIORADOS DE LOS PRODUCTOS

SEGURIDAD NACIONAL ORDEN INTER.

DELITOS ARMAS BIOLOGICAS BIOLOGI COS

*
TIPIFICACION SUSTRATOS RESIDUOS Y SUBSTANCIAS

ESCENA DEL DELITO

HISTORIA AMBIENTAL

DESEQUILIBRIO SUELO-AIRE AGUA MICROFAUNA MICROFLORA

* *
AMENAZA PARA LA SALUD

NORMAS DE PREVENC. SANITARIA

NORMAS DE CALIDAD DE LOS PDTOS.

INSPECCION HIGIENICO-SANITARIA - Fbricas y locales de
comercio de alimentos. - Mercados-centros de Acopio-Restaurntes. - Chancheras - Playas-Piscinas.

DELITO CONTRA LA SALUD PB.

CONDICIONES DE ACTITUD

DELITO CONTRA LA FE Y LA SALUD PB.

OBSERVACION MICROSCOPICA

BIOMASA

PERFIL MICRO BIKLOGICO

INFECCIONES (Vias de Infeccin)

InNTOXICACIONES
(los microorganismos se multiplican y producen toxinas)

VIDA UTIL (Multip. De microorganismos)

ALTERACION DE LOS PDTOS.

ITC

CMARN
HISTORIA NATURAL
PROTECCION DEL MEDIO AMBIENTE Y DE LOS RR.NN.

***

INTERES CRIMINAL

INTERES AMBIENTAL

****
INTERS SOCIAL

A DIGEMID INDECOPI CODEX FDA FAO/OMS - ICMSF PROTECCION DE LAS PERSONAS INTERES ECONOMICO

MEDIDAS SANITARIAS

DELITO CONTRA LA VIDA EL CUERPO Y LA SALUD

* * DELITO
CONTRA LA VIDA EL CUERPO Y LA SALUD

Carcter Oficial
NORMAS OFICIALES SOBRE BPM SISTEMAS DE INSPECCION OFICIAL SISTEMA DE VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICA

Carcter Privado
ESTANDARES CALIDAD DE LOS PRODUCTOS NORMAS INTERNAS DE CALIDAD SISTEMA DE ASEGURAMIENTO DE LA CALID HACCP (APPCC) ISO 9000 POES BPA y BPM

PELIGROS ASOCIADOS A LOS ALIMENTOS

FISICOS
Astillas, guantes, fragmentos de metal, vidrio Insectos, cabellos, hongos, excremento de roedor, etc.

QUIMICOS
Pesticidas, residuos de antibiticos, aflotoxinas, aditivos, etc.

BIOLOGICOS
Bacterias patgenas, parsitos, virus.

PELIGROS BIOLOGICOS

BACTERIAS PARASITOS HONGOS VIRUS

BACTERIAS

Anatoma de una bacteria

FLAGELOS

ESPORAS

CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO

Log. N Bact.

Tiempo de incubacin

POSIBLES DESTINO DE UN MICROORGANISMO DESPUES DE INGRESAR A UN ALIMENTO

N de m.o. Crecimiento

Sobrevivencia

Muerte Tiempo de almacenamiento

FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO Y SOBREVIVENCIA DE MICROORGANISMOS EN ALIMENTOS

INTRINSECOS
pH ACTIVIDAD DE AGUA (Aw) POTENCIAL REDOX (Eh) COMPOSICIN NUTRICIONAL SUBSTANCIAS ANTIMICROBIANAS

EXTRINSECOS
TEMPERATURA
CONGELACIN (sobrevivencia) REFRIGERACIN (sobrevivencia/ crecimiento) CALENTAMIENTO (muerte)

TIEMPO DE ALMACENAMIENTO ATMOSFERA HUMEDAD RELATIVA CONDICIN FISIOLGICA DEL MICROORGANISMO ( stress)

En general el nmero y tipo de microorganismos presentes en un alimento elaborado esta influenciado por 4 factores

1. EL AMBIENTE EN EL CUAL FUE OBTENIDO 2. LA CALIDAD MICROBIOLOGICA DEL ALIMENTO ANTES DE SER TRATADO 3. LAS CONDICIONES HIGIENICAS EN LAS CUALES ES MANIPULADO Y PROCESADO 4. LAS CONDICIONES DE ENVASADO, ALMACENAMIENTO Y POSTERIOR MANIPULACIN

Factores que influyen en el grado de peligrosidad

Aw MINIMA PARA EL CRECIMIENTO DE DIFERENTES TIPOS DE MICROORGANISMOS

TIPO DE MICROORGANISMOS BACTERIAS (la mayora) LEVADURAS HONGOS

MINIMA Aw REQUERIDA 0.90 0.80 0.70

Ejemplos de valores de Aw para alimentos ALIMENTO

CARNE LECHE FRUTAS HORTALIZAS PAN LECHE EVAPORADA PASTA DE TOMATE QUESO LECHE CONDENSADA MARMELADAS JARABES GALLETAS PASTA

Aw
0.95 0.99

0.93 0.95

0.85 0.93

0.60 0.85

< 0.60

LOS TRES PATOGENOS MAS COMUNES

Salmonella
- Causante de Infeccin

Staphylococcus aureus
- Causante de intoxicacin

Clostridium perfringens
- Causante de toxiinfeccin

ALGUNOS PATOGENOS CAUSANTES DE ENFERMEDAD SEVERA

Clasificados como riesgo severos directos Escherichia coli (hamburgesa, sidra y jugo de manzanas)
- colitis hemorrgico

Clostridium botulinum (conservas caseras)

- Botulismo

Listeria monocytogenes (queso blanco, alfalfa, ensalada de col)

- Listeriasis

Vibrio vulnificus(ostras)
- Septicemia fulminante

ALGUNOS PATOGENOS CAUSANTESDE ENFERMEDAD MODERADA

AMPLIA DISTRIBUCION DISTRIBUCION LIMITADA

Salmonella spp. Shigella spp. Otras E. coli patgenas Streptococcus pyogenes

S. aureus C. perfringens Campylobacter jejuni Trichinella spiralis

PARASITOS

PARASITOS

ASOCIADOS CON FRUTAS Y VERDURAS

(con contaminacin fecal) PROTOZOOARIOS Entamoeba PLATELMINTOS (gusanos planos) Taenia solium Taenia saginata NEMATELMINTOS (gusanos redondos) Ascaris lumbricoides

HONGOS

HONGOS
CRECEN EN MATERIA ORGANICA CADA COLONIA FORMA UN MICELIO Micelio compuesto de hifas

CIERTAS ESPECIES PRODUCEN MICOTOXINAS: - Aflotoxinas - Ochratoxina - Zearalenona

LAS MICOTOXINAS PUEDEN ESTAR PRESENTES EN ALIMENTOS

Aflotoxinas en cereales.

ENFERMEDADES CAUSADAS POR LAS AFLOTOXINAS

DOSIS BAJAS - Cncer al hgado DOSIS ALTAS - Necrosis del hgado SE ABSORBEN Y PASA DEL INTESTINO A LA LECHE PRODUCTOS DEL MANI HAN CAUSADO BROTES EN AVES

VIRUS

VIRUS
LA HEPATITIS A ES UNA DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDDADES VIRALRES QUE SE TRASMITE POR ALIMENTOS LOS VIRUS EN ALIMENTOS: No se multiplican Sobreviven por un periodo determinado Provienen de contaminacin directa

FACTORES QUE FAVORECEN BROTES DE ETA

ALMACENAMIENTO INADECUADO - Temperatura COCIMIENTO INSUFICIENTE - Carnes, bisteck, hamburgesas CONTAMINACION CRUZADA - Bacterias pasan de materiales crudos a cocidos .No competencia
. Abuso de temperatura

PREVENCION DE ETAs
EVITAR CONTAMINACION - Buenas Prcticas de Manufactura (BPM) DESTRUIR PATOGENOS - Tratamientos trmicos EVITAR MULTIPLICACION - Refrigeracin

CALIDAD DE UN PRODUCTO ALIMENTICIO

VALOR ALIMENTICIO

NUTRICIONALES

SALUD ELEMENTOS DIETETICOS INOCUIDAD ESTABILIDAD

SANITARIOS

TECNICOS

VIDA UTIL IMPACTO MEDIO AMBIENTE

CRITERIOS ORGANOLEPTICOS

HEDONICOS

LA MUESTRA PARA EL ANALISIS MICROBIOLOGICO

Es importante que la muestra de alimento refleje con exactitud las condiciones microbiolgicas existentes en el momento del muestreo. Se debe tratar de mantener en lo posible constante la carga o microflora original. En los planes de muestreo el clculo del tamao de la muestra depende de las probabilidades de presencia de patgenos.

Consideraciones sobre el muestreo

La Muestra puede estar referida a una o mas unidades de producto estraidas de un lote, remesa o una cantidad definida del producto. Tamao de la muestra es el nmero de unidades de producto contenidas en la muestra. Es representativa cuando su estado es lo mas parecido posible al conjunto o lote del cual se ha extrado.

Tipos de muestras
OFICIALES Formal, representa al lote de procedencia Se toman segn prescripciones reglamentarias. NO OFICIALES Informativa. Inspecciones, encuestas, operativos INCIDENTAL Circunstancial, para el esclarecimiento de una posible relacin de peligro o cuestionamiento de su inocuidad Se sospecha de la presencia de patgenos.

 El muestreo en el caso de muestra incidental es casual, por lo que generalmente es no representativa. El anlisis tiene carcter explorativo y selectivo. Aparentan normales al examen directo. Caracterizacin de la peligrosidad de productos o mercadera con eventuales defectos visibles

Investigacin de infracciones de la ley.

MUESTRAS

La muestra ingresa al Laboratorio DIRCRI a la Seccin Muestra con su respectivo Oficio,en el cual se indica el tipo de examen requerido. Se le asigna un Cdigo y N de Muestra para el registro.
Cuando el producto es perecible se lleva inmediatamente al Laboratorio de Biologa (S. Microbiologa) para su anlisis. Se le asigna un Cdigo de Anlisis Se realizan los exmenes

 ALIMENTOSDE VENTA AMBULATORIA ALIMENTOS CRUDOS ALIMENTOS COCIDOS MANIPULADORES SUPERFICIES

A. PROCEDENCIA B. ANTECEDENTE C. REFERENCIAS D. DESCRIPCION Condiciones de envo, tipo de envase, especificaciones del etiquetado (F. de Vencimiento), volumen o peso del producto, aspecto, consistencia. E. EXAMEN DE LABORATORIO 1. Observacin macro - microscpica Envase: resistencia e inocuidad, garanta de estabilidad del contenido, evite su contaminacin, no altere calidad ni sus especificaciones sensoriales. Contenido: Restos de insectos R. vegetales Formas de parsitos Sust. terrosas Mohos C. extraos Levaduras Otros: 2. Anlisis microbiolgico

Recuento de microorganismos aerobios mesfilos Numeracin de coliformes totales Escherichia coli Staphylococus aureus Salmonella spp. Bacillus cereus F. CONCLUSIONES (condiciones de aptitud) G. APRECIACION CRIMINALISTICA Condiciones de riesgo, caractersticas del peligro, condiciones higinico - sanitaria, calidad...

METODO DE RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS ICMSF 2nd Edition. 1978 reprinted 1988 (with revision) University of Toronto Press. Enumeration of mesosophilic : the agar plate methods. Method 1 (The Standard Plate Count, pour plate, or Aerobic Plate Count)
10 g de muestra( mnimo) + 90 ml de agua de peptona( 9 veces el tamao de la muestra)
Dependiendo del tipo de muestra utilizar: Blender (15,000-20,000 rpm) 2.5 minutos mximo Stomacher (230 rpm) 1 minuto

Dilucin 10 -1

Cuando se trabaja con 1 ml de la dilucin + 9 ml diluyente, se homogeniza aspirando 10 veces con una pipeta estril.

Dilucin 10 -2

Cuando se trabaja con 10 ml de la dilucin + 90 ml diluyente, se homogeniza agitando vigorosamente 25 veces en un arco de 30 cm

Idem procedimiento anterior

Serie de diluciones decimales 10 -3, 10 -4

1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

Adicin de agar a las placas

Agregar 10-15 ml de agar Plate Count temperado a 44-46C. Este proceso no debe demorar ms de 20 minutos desde la primera dilucin. . Hacer controles de esterilidad del agar solo y del agar ms el diluyente. Mezclar inmediatamente el inculo con el agar con movimientos de rotacin de la placa horario y antihorario alternados con movimientos hacia delante y atrs sobre una superficie nivelada. (5 de cada uno) Dejar solidificar el agar e invertir las placas.

Incubar 48 +- 3 h a 29-31 C

GUA PARA EL REPORTE

Cmputo del SPC Cmputo del ESPC Cmputo y registro del SPC
Spreaders

Reporte e interpretacin

Repetibilidad y Error personal

A) Seleccionar 2 placas de una dilucin que presenten 30-300 colonias por placa. Promediar los conteos y multiplicar por la inversa de la dilucin. B) Promediar ambas placas an as una de ellas tenga conteos fuera del rango.

A) Si el conteo individual de las placas no est entre 30-300, reportar como ESPC (Recuento en Placa Estimado): b) Si son > 300, dividir las placas en secciones radiales(2,4,8..), contar las colonias y multiplicar por el factor que corresponde para obtener el recuento estimado por placa; promediar y multiplicar por la inversa de la dilucin c) Si hay > 200 colonias en 1/8 de la placa, multiplicar 1600 por aquella dilucin y reportar el ESPC como > el resultado. d) Cuando no hay colonias en las placas de menor dilucin, reportar el ESPC como < 0.5 veces la dilucin

Considerar slo los 2 dgitos significativos en el reporte de SPC y ESPC. Si el tercer dgito es = >5 aumentar el segundo dgito en una unidad.

A) Si en la placa se presentan colonias spreaders, contar las colonias fuera del rea spreader, que no debe ser ms de la mitad del rea de la placa. B) Reportar la presencia de colonias spreaders cada vez que el rea afectada exceda 1/4 del rea de la placa.

A) Reportar los conteos como SPC ESPC por gramo ml de alimento segn sea el caso.

Un segundo conteo en una placa deber estar : a) Dentro del 5% de la primera si lo realiza la misma persona.

b) Dentro del 10% de la primera si lo realiza otra persona.

NUMERACION DE COLIFORMES
Mtodo: ICMSF Micoorganisms in foods 1. Their Significacce and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 12 128 ;2nd Ed. 1978. Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COLIFORMS: DETERMINATION OF MOST PROBABLE NUMBER (NMP). Method 1 (North American)

10g de muestra + 90cm3 de agua peptonada

Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000 rpm x 2.5 min.

1cm3

1cm3
9 cm3 AP 10 -1 9 cm3 AP 10 -3

9 cm3 AP 10 -2

Tubos con 9ml de caldo lauril sulfato con campana de durhan

Tubos con 9ml de caldo verde brillante bilis al 2%

ETAPA PRESUNTIVA : Incubar a 36C+-1C x 48-+2horas; la lectura positiva se evidencia por la formacin de gas (atrapado en la campana de Durhan) y turbiedad en el medio que evidencia el desarrollo de microrganismos. Los tubos contabilizados como positivos se pasan a La siguiente etapa. ETAPA CONFIRMATIVA: Pasar 2 asadas de inculo, (asa de 3mm de diametro) de cada tubo positivo a tubos que contengan caldo verde brillante bilis al 2% provistos de campana de durhan e incubar a 36C +-1C x 48+-2horas. La lectura de tubos positivos se evidencia por la formacin de turbiedad y gas atrapado en la campana de durhan.. La cantidad de tubos positivos arrojan valores que describen el NMP de COLIFORMES /g de muestra analizada, segun la tabla de NMP del pte mtodo.

NUMERACION DE COLIFORMES FECALES

Mtodo: ICMSF Micoorganisms in foods 1. Their Significacce and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 125-139, 106 111 ; 2nd Ed. 1978. Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COLIFORMS : Method 1 . Determination of Coliforms Organisms of Fecal Origin. Method 1

10g de muestra + 90cm3 de agua peptonada

Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000 rpm x 2.5 min.

1cm3

1cm3
9 cm3 AP 9 cm3 AP -1 9 cm3 AP 10 -2 10 -3 10

Tubos con 9ml de caldo lauril sulfato con campana de durhan

Tubos con 9ml de caldo E.C. con campana de durhan

ETAPA PRESUNTIVA : Incubar a 36C+-1C x 48-+2horas; la lectura positiva se evidencia por la formacin de gas (atrapado en la campana de Durhan) y turbiedad en el medio que evidencia el desarrollo de microrganismos. Los tubos contabilizados como positivos se pasan a La siguiente etapa. ETAPA CONFIRMATIVA: Pasar 2 asadas de inculo, (asa de 3mm de diametro) de cada tubo positivo a tubos que contengan caldo E.C. provistos de campana de durhan e incubar a 44.5C +-2C x 48+-2horas. La lectura de tubos positivos se evidencia por la formacin de turbiedad y gas atrapado en la campana de durhan. La cantidad de tubos positivos arrojan valores que describen el NMP de COLIFORMES FECALES/g de muestra analiazada, segun la tabla de NMP del pte mtodo.

NUMERACION DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS

Mtodo: ICMSF Micoorganisms in Foods 1. Their Significance and Methods of Enumeration. Vol.. 1; pp 218 228 ;2nd Ed. 1978. Reprinted 1988 (with revisions) University of Toronto Press. ENUMERATION OF COAGULASE-POSITIVE STAPHYLOCOCCI. METHOD 5 . (MPN Telurite Manitol Glycine Broth).

10g de muestra + 90cm3 de agua peptonada

Homogeneizar en blender entre 15000 - 20000 rpm x 2.5 min.

1cm3

1cm3
9 cm3 AP 10 -2

9 cm3 AP 10 -3

9 cm3 AP 10 -5

Tubos con 9ml de caldo Telurito manitol glicina

Placas con agar Baird Parquer plaqueadas previamente a la siembra Test de coagulasa

Incubar a 36C+-1C x 48-+2horas, con el propsito de impedir el acceso de oxgeno , aadir a cada tubo agar-agar al 2%, fundido, de tal manera que forme una capa de 2-3 cm por encima del caldo. La presencia de Staphylococcus aureus , se pone de manifiesto por la aparicin de un precipitado de color negro o por el ennegrecimiento del medio, contabilizndose como positivo cada tubos de las diluciones trabajadas que presenten dicha caracterstica, luego se da paso a la siguiente etapa. De cada tubo positivo se coge una asada de inculo (asa de 3mm de dimetro ) y se siembra sobre la auperficie del agar Baird Parker por estrias y agotamiento. Incubar a 36C +-1C x 48+-2 horas. Las colonias de Staphylococcus aureus se evidencian como colonias de color gris a negro, con halo caracterstico

DETECCION DE SALMONELLA SP
Mtodo: FDA BACTERIOLOGICAL ANALYTICAL MANUAL, c.5, pp. 5.01-5.20, 8th. Ed. 1995. Revision A 1999. SALMONELLA. METODO PARA TINTES Y COLORANTES Mezclar bien y dejar reposar por 60 min. a temperatura ambiente. Adicionar 0,9 ml de una solucin de verde brillante al 1%, mezclar completamente con movomientos circulares, aflojar la tapa aprox. de vuelta e incubar 24 +-2 horas a 35C Sembrar en estrias y agotamiento un asa de 3mm de cultivo del caldo tetrationato, sobre la superficie de agar sulfito de bismuto (BS), Agar xilosa lisina desoxicolato (XLD) y Agar Haktoen entrico. Preparar las placas de agar hektoen el dia anterior al Sembrado y almacenarlas en lugar oscuro a temperatura ambiente hasta su uso . In cubar a 35C x 24+-2horas. En agar hektoen las colonias verde azuladas a azul con o sin centros negros. Muchos cultivos de Salmonella pueden tener grandes centros negros y Brillantes que parecen como colonias completamente Negras. Atipicamente se pueden apreciar colonias amarillas con o sin centros negros. En XLD, las colonias aparecen rosadas con o sin centros negros. Muchos cultivos de Salmonella Pueden tener grandes centros negros y brillantes que parecen como colonias completamente negras. Atipicamente se pueden apreciar colonias amarillas con o sin centros negros. En agar BS. Las colonias pueden aparecer de color marron, gris o negro a veces con brillo metlico, se puede observar el efecto llamado halo. Algunas cepas pueden producir colonias verdes con cierto o ningun oscurecimiento del medio circundante

10g de muestra + 90cm3 de CALDO TETRATION ATO

Agar Hecktoen entrico

Agar XLD

Agar Bismuto Sulfito

Colonias sospechosas BIOQUIMICA

TSI LIA INDOL UREA DULCITOL MALONATO KCN

SEROLOGIA

ECOLOGIA
LA CRIMINALISTICA EN LA INVESTIGACION DE LOS DELITOS CONTRA LOS RR NN Y EL MEDIO AMBIENTE

Globalizacin de la problemtica relativa al medio ambiente. Formas delincuenciales que incluyen los delitos biolgicos y los delitos ecolgicos Visin multidisciplinaria en la prevencin y control de las nuevas formas delictuosas. Imprescindible la participacin de las FF AA y la PNP. Aspectos puntuales que guardan relacin con la funcin policial. Integracin de la dimensin ambiental en los conceptos tradicionales de seguridad. Participacin activa en la proteccin del medio ambiente. En la investigacin DCE es importante el apoyo analtico de Laboratorio DIRCRI Extensin de la investigacin criminal y de la criminalsica en el esclarecimiento de los delitos ecolgicos.

PROBLEMAS AMBIENTALES GLOBALES

Adelgazamiento de la capa de ozono Recalentamiento global. Efecto invernadero Prdida de biodiversidad Contaminacin marina Disminucin de bosques tropicales Lluvia cida Desechos radiactivos

PROBLEMAS AMBIENTALES EN EL PER

EN EL MAR Sobreexplotacin pesquera Relaves, aguas residuales, pesticidas EN LA COSTA Salinizacin Deterioro de bosques. Tala y pastoreo Expansin urbana Salubridad en pueblos jvenes EN LA SIERRA Erosin de suelos agrcolas Sobrepastoreo y deterioro de pastos naturales Contaminacin por relaves y humos Deterioro de reas protegidas

PROBLEMAS AMBIENTALES EN EL PER (2)

SELVA ALTA Y CEJA DE SELVA Tala indiscriminada y deforestacin de bosques Residuos del cultivo y procesamiento de coca Saqueo de especies forestales de alto valor Deterioro de reas protegidas SELVA BAJA Tala de bosques Expansin del cultivo de coca y narcotrfico Contaminacin por explotacin de petrleo Deterioro de reas protegidas Salubridad en pueblos jvenes Contaminacin de aguas subterrneas POBLACIN ??!!

LA POLICIA NACIONAL DEL PERU Y LA PROTECCION DEL ENTORNO AMBIENTAL Y PATRIMONIO CULTURAL

 DIRECCION DE POLICIA DE TURISMO Y ECOLOGIA

- DIVISION DE PROTECCION TURISTICA - DIVISION DE PROTECCION AMBIENTAL - DIVISION DE INVESTIGACION DE DELITOS ECOLOGICOS - DIVISION DE OERACIONES MIXTAS - UNIDAD DE POLICIA DE TURISMO Y ECOLOGIA - UNIDAD DE SALVAMENTO DE ALTA MONTAA

DIRECCION DE CRIMINALISTICA DIVISION DE LABORATORIO CRIMINALISTICA - DPTO. DE INGENIERIA FORENSE

- DPTO. DE BIOLOGIA FORENSE - DPTO. DE BALISTICA FORENSE

OFICINAS REGIONALES DE CRIMINALISTICA

Porque interviene la PNP en infracciones y/o denuncias ambientales?

Constitucin Poltica del Per Art. No. 2 Num. 22 indica Toda persona tiene derecho a la paz, tranquilidad, al disfrute del tiempo libre y al descanso, as como a gozar de un ambiente equilibrado y adecuado al desarrollo de su vida. Art. 166 de la C.P.P. indica Que la PNP entre otras finalidades tiene la de investigar y combatir la delincuencia. D. Leg. 635 Cdigo Penal Establece por primera vez los Delitos contra la Ecologa Art. 304 al 314.

Como se genera una Intervencin y/o Investigacin Policial en Defensa del Ambiente?
1. Denuncia Directa 2. Denuncias

M. Publico Ministerio Municipalidades

Derivada a DIRPOLTURE

3. Informacin Abierta { Medios de Prensa

4. Acciones de Inteligencia

Planes de Operaciones Ambientales

Procedimiento Tcnico Cientfico que norma las

acciones policiales y para la ante intervencin la autoridad

investigacin

denuncia

competente de ilcitos ambientales

Peritos del Laboratorio PNP en el levantamiento de muestra de aguas servidas