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BIOMATERIAL SCAFFOLDS FOR

CONTROLLED LOCALIZED
GENE DELIVERY OF
REGENERATIVE FACTORS
Isabelle Braga Produo de Biofrmacos
John Chantre Prof. Dr. Ralph Santos-Oliveira
Lorrainy Augusto
Sara Rezende
INTRODUO
OS biomateriais desempenham um papel na
regenerao de tecidos, servindo para apoiar a
adeso e migrao celular, que resulta na
integrao com o hospedeiro. A capacidade
regenerativa pode ser melhorada atravs de uma
distribuio localizada de fatores.

Denominao de clulas tansfetadas ou
transduzidas por vetores no-virais e virais, que
podem funcionar como biorreatores para a
protena.

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INTRODUO
Os vetores podem ser plasmdeos ou uma cadeia
circular de DNA, que so relativamente estveis e
podem ser distribudas a partir de um material, ou
consistir de cidos nucleicos empacotadas que tm
maior eficcia em relao ao plasmdeo nu.

Biomateriais podem ser carregados com os vetores
e projetados para libertar a sua carga de uma
forma controlada, que serve para manter uma
concentrao elevada de vetores locais, o que
aumenta a probabilidade de internalizao celular.
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RELEVNCIA TRANSLACIONAL
Biomateriais que transportam vetores so,
primeiramente, um alvo de transporte de massa
limitado.

O design desses biomateriais , incluindo a taxa de
degradao, porosidade, e arquitetura, influencia a
taxa de crescimento interno das clulas e a
identidade de infiltrao celular, que impacta a
eficincia pelo qual o transgene expresso.


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RELEVNCIA TRANSLACIONAL
Sistemas de distribuio mais eficientes e
controlados, que so necessrias para a formao
direta de tecidos funcionais.

As principais questes abordadas, foram:

a extenso e a durao da expresso transgnica
a identidade das clulas infiltrando o biomaterial e
expressando o transgene
o nmero de clulas dentro e adjacentes ao implante que
expressam o transgene
o impacto do material e vetor sobre a resposta de corpo
estranho
os elementos necessrios para expressar a maximizar a
formao de tecido.
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RELEVNCIA CLNICA
Os tratamentos destinados a
promover o processo de
cicatrizao de feridas
complexas tiveram sucesso
moderado.

A aplicao de distribuio
pode fornecer a tecnologia
necessria para recriar
padres da expresso gnica
e organizao celular.


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VANTAGENS E LIMITAES
Estruturas microporosas ou hidrogis, fornecem um
suporte para o crescimento tecidual e uma
distribuio de codificao gnica, melhorando sua
bioatividade.

Propriedades fsica distintas.

Estratgias de distribuio: Encapsulamento ou
Imobilizao.
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VANTAGENS E LIMITAES
O vetor encapsulado em um
biomaterial durante a fabricao e deve
permanecer estvel durante todo o
processo. Alternativamente, os vetores
so imobilizados aps a fabricao, o
que evita a sua exposio no processo.

Plasmdeos podem ser alvos dessas
estratgias, devido a sua estabilidade,
podendo tambm ter uma formao de
complexos com lipdeos catinicos.

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VANTAGENS E LIMITAES
Para vetores no-virais, h uma proteo ao
plasmdeo em relao a degradao, facilitando
sua entrada na clula e sua estabilidade.

Os vetores virais so mais eficientes, mesmo tendo
uma meia-vida curta e perda de potencial durante o
processo.
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RESULTADOS
Biomaterias formados a partir de microesferas
compostas de copolmeros de lctido e gliclido
(PLG) modificado com polidopamina e polmero
catinico (PD)

Feitos em camadas, em que o plasmdeo retido
dentro de uma camada central de polmero, e uma
camada externa porosa rodeia esse polmero
central, permitindo a infiltrao de clulas.
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RESULTADOS
Alterando a estrutura, de um promotor de
citomegalovrus para um promotor de ubiquitina C,
aumentou-se a durao da expresso. O que
indica que a dose inicial libertada e o design
vetorial afetam a expresso.


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RESULTADOS
O hidrogel um polmero de matriz hidroflica que
pode ser facilmente manipulado em condies de
reticulao. Os naturais tem a capacidade de
suportar a adeso de clulas, j os sintticos so
modificados para suportar a migrao celular.

A migrao, em seguida, ocorre atravs de
degradao proteoltica dos reticuladores de
peptdeos, por enzimas secretadas por clulas.
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INOVAO
A verso inicial influencia significativamente a
expresso do transgene in vivo no local de
implantao e, uma liberao rpida leva a
expresso junto ao biomaterial.

Fosfatidilserina (PS) um componente da
membrana plasmtica capaz de ligar lentivrus e
fornecer uma pequena molcula, que podem ser
apresentados na superfcie para mediar interaes
especficas.


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PLG modificados
com polmeros
catinicos
PLG modificado com
fosfatidilserina
PEG modificado co
peptdeos de
afinidade
Biomaterial Microporos Microporos Hidrogis
Vetor Plasmdeo nu Lentivrus Lipoplex
Modificao Incorporao da
Polidopamina (PD)
Incorporao da
fosfatidilserina (PS)
Incorporaes de
repetio base de
lisina
Resultados da taxa de
liberao

Ligao especfica
para o biomaterial
da reteno de
vetor
Concluses Dose inicial do
plasmdeo um
fator importante na
extenso e durao
da expresso do
transgene.
OS pode induzir a
ligao especfica de
vetores lentivirais de
biomateriais, o que
aumenta a eficcia da
transferncia.
Os hidrogis
modificados com
peptdeos,
aumentam a
reteno de vetores
e aumentam a
distribuio de
genes.
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RECOMENDAES
A expresso insuficiente ineficaz, assim como
seu excesso pode conduzir na formao de tecidos
desorganizados.

A expresso a curto prazo pode ser ineficaz no
crescimento tecidual e a prolongada pode inibir os
etapas subsequentes regenerao.

As caractersticas da expresso ser crtico para a
induo da cascata complexa de processos que
conduz restaurao da funo do tecido.

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DESENVOLVIMENTO PARA O FUTURO
Aplicao dos sistemas de transferncia de genes
para controle do microambiente e promoo de
cicatrizao de feridas ou regenerao dos tecidos.

Estratgias de regulao, tendo promotores
desenvolvidos para controlar a expresso em
momento definido ou em clulas especficas.

Desenvolvimento com clulas-tronco pluripotentes
induzidas pode identificar fatores de criao de
clulas progenitoras de tecidos in vivo, com
potencial para promover a regenerao.
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OBRIGADA!
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