Introduccin Genes y enfermedad Variabilidad en los organismos Mecanismos de variabilidad Etapas de variacin en los patgenos Gentica de la virulencia en los patgenos y de la resistencia en las plantas hospedantes Produccin de las variedades resistentes Informacin gentica cido nuclico
Qu es un gen? Segmento de ADN que codifica para una protena o molcula de ARN E I E I E Procariotas Eucariotas Qu es un gen? No todos los genes se expresan en el mismo momento Segn las necesidades de la clula Promotores, terminadores, condensacin de la cromatina En general Patgenos especficos de cada planta Fusarium oxysporum lycopersici
Venturia inaequalis Marchitez del tomate Roa del manzano Lo que permite el desarrollo de una cierta enfermedad
Genes del patgeno que determinan la especificidad o la virulencia sobre el hospedante en particular. Hospedante Genes de susceptibilidad y especificidad Patgenos que atacan mltiples plantas Genes diversos Genes con amplio espectro Una planta puede ser susceptible por hasta 200 patgenos diferentes, lo normal es menos de 100 Las caractersticas de un organismo no son fijas, varan de un individuo a otro Reproduccin sexual aumenta la variabilidad, los individuos sern diferentes entre s y de sus progenitores Reproduccin asexual disminuye la variabilidad Generales
Especializados Recombinacin
Mutacin Fusarium verticillioides Pseudomonas syringae Virus del mosaico del tabaco Ocurre durante la reproduccin sexual en: Plantas Hongos Nematodos
La mayora de los organismos producen variabilidad mediante segregacin y recombinacin de genes durante la meiosis.
En hongos estos gametos haploides se dividen mitticamente para producir el micelio y las esporas. Es un cambio en el material gentico de un organismo, dependiendo de donde se produzcan pueden ser: Somticas Germinales Se transmiten hereditariamente
NO HEREDABLE HEREDABLE Dependiendo de la magnitud del cambio: Genmicas: Vara el n de cromosomas. Cromosmicas: Cambios en la secuencia de los genes. Deleciones Inserciones Translocaciones Gnicas: Cambios de bases Sustitucin de bases Adicin Delecin
Las mutaciones ocurren espontneamente
La mayora son recesivas, no tienen por qu expresarse.
Los patgenos por lo general tienen mucha descendencia, de modo que es ms posible que ocurran mutaciones, generando individuos con distinto grado de virulencia El ADN extranuclear tambin muta.
Este ADN controla algunas caractersticas de los organismos, estas mutaciones son ms difciles de detectar porque no siguen las leyes de la gentica mendeliana.
HERENCIA CITOPLASMTICA Este tipo de mutacin puede darle al patgeno nuevas caractersticas: Tolerancia a sustancias txicas Uso de nuevas sustancias para crecer Modificacin de su virulencia
Tambin los hospedantes pueden adquirir nuevas caractersticas Resistencia Ocurren en determinado tipo de organismos son: Procesos semejantes a la sexualidad en hongos Heterocariosis Parasexualismo Heteroploida Formacin de sectores Procesos semejantes a la sexualidad en bacterias Conjugacin Transformacin Transduccin Recombinacin gentica en virus Como resultado de la anastomosis, las clulas de las hifas poseen ncleos genticamente diferentes Es el proceso por el cual se producen recombinaciones genticas dentro de los heterocariontes
Los ncleos se fusionan y posteriormente se dividen. Se trata de clulas, tejidos u organismos completos con nmeros cromosmicos que difieren del normal para esos organismos. Est asociado al ciclo celular La expresin es proporcional al nmero de cromosomas que haya. Afecta a la tasa de crecimiento, tamao, produccin de esporas, patogenicidad Desarrollo de hongos morfolgicamente distintos dentro de una misma colonia.
Tambin pueden diferir en patogenicidad
Puede ser resultado de heteroploida, aunque tambin de mutaciones, heterocariosis o parasexualismo. Transferencia de ADN entre dos bacterias compatibles que se ponen en contacto, mediada por la presencia de un plsmido conjugativo. Captura e incorporacin de ADN libre. Transferencia de ADN mediada por un virus: Generalizada
Especializada Cuando dos cepas del mismo virus infectan el mismo organismo se obtienen recombinantes, diferentes a las originales. La virulencia de un patgeno puede disminuir cuando se mantiene durante un largo periodo en el cultivo, o cuando pasan varias veces a travs de diferentes hospedadores. Prdida de virulencia Atenuacin Esta virulencia puede volver a recuperarse, aunque en algunos casos es irreversible Seleccin de individuos menos virulentos/ avirulentos Sustituyen a los virulentos Dentro de las poblaciones de patgenos podemos encontrar diferentes:
Variedades: Se trata de algunos individuos de una especie que atacan a una determinada especie de hospedante.
Razas: Individuos de una especie patognica que ataca a algunas variedades de planta hospedante, y a otras no.
Variante: Individuos de una especia de patgeno que modifica su virulencia, pudiendo infectar a una nueva variedad de planta.
Biotipo: Individuos idnticos producidos asexualmente por un variante.
Proliferar Morir Hay plantas resistentes frente a ciertos patgenos porque pertenecen a grupos taxonmicos inmunes a ellos.
Porque tienen genes que proporcionan resistencia.
Porque escapan o toleran la infeccin. RESISTENCIA DE PLANTAS NO HOSPEDANTES RESISTENCIA VERDADERA RESISTENCIA APARENTE Existe variacin en cuanto a la susceptibilidad de las variedades de cultivares frente a un patgeno.
Tambin se encuentran diferencias en cuanto a la virulencia de los patgenos que infectan una planta.
Mayor Menor Es la resistencia que tiene aquel tipo de plantas que no es capaz de ser infectado por un patgeno, o para la cual ese patgeno no tiene ningn efecto.
Esas plantas, por su parte, mostrarn sensibilidad para sus propios patgenos. Es aquella que est controlada por la presencia de uno o varios genes. El hospedante y patgeno son ms o menos incompatibles entre s. Dos tipos: Horizontal vertical Se encuentra bajo el control de muchos genes.
Puede verse afectada por las condiciones ambientales. NO evita la infeccin RESISTENCIA POLIGNICA RETRASA LA PROPAGACIN DE LA ENFERMEDAD Controlada por uno o algunos genes
Controlan la etapa de interaccin entre planta- patogeno RESISTENCIA OLIGOGNICA EVITA EL ESTABLECIMIENTO DEL PATGENO Desarrolla respuestas de hipersensibilidad Este tipo de resistencia engloba otro tipo de resistencia tambin importante en plantas:
La resistencia est bajo el control del material gentico dispuesto en el citoplasma. RESISTENCIA CITOPLASMTICA Tizn foliar amarillo Tizn foliar sureo del maz La presentan aquellas plantas que permanecen libres de las infecciones por sus propios patgenos.
Esto puede ocurrir porque: La planta escape a la enfermedad. Tolere la enfermedad.
Para que ocurra una infeccin tienen que darse a la vez los siguientes fenmenos: Husped susceptible. Patgeno virulento. Ambiente favorable.
No coincidencia = No enfermedad Hay cultivos que pueden dar buenas cosechas a pesar de estar infectados.
Son susceptibles a la enfermedad, pero presentan una falta de receptores.
Este tipo de plantas no son destruidas por los patgenos, y en algunas ocasiones pueden producir una mejora en la cosecha. Los patgenos son especficos para un tipo de planta, a la cual son capaces de causarle enfermedad.
Especies cultivadas Mejoramiento gentico Especificidad depende GENOTIPO Planta Patgeno Nuevas razas de patgenos Presin de seleccin La resistencia de una planta o la virulencia vienen determinadas por una serie de genes.
Genes que determinan la resistencia oligognica/susceptibilidad en la planta son complementarios a los que determinan la virulencia/avirulencia en el patgeno.
Generalmente los genes de resistencia en el hospedante son dominantes (R) y los de susceptibilidad recesivos (r).
En patgenos los genes Avr son los que confieren las caractersticas: (A) avirulencia, (a) patogenicidad.
Virulencia Grado de patogenicidad.
El concepto de gen por gen propone que: Determina la resistencia del hospedante Horizontal Vertical POR CADA GEN DE RESISTENCIA EN EL HOSPEDANTE, EXISTE UN GEN DE VIRULENCIA EN EL PATGENO
Tiene que ver con el reconocimiento entre los distintos genes correspondientes. En cuanto a las interacciones planta-patgeno pueden ser:
Incompatibles Reaccin hipersensible. Compatibles La enfermedad se establece.
Este reconocimiento puede ser tanto extracelular como intracelular.
Los productos de R reconocen regiones de Avr e inician una respuesta.
El reconocimiento entre los genes Avr y R activa cascadas de seales y vas de transduccin para la expresin de los genes de la defensa. Los genes se encuentran regulados mediante represores y activadores, que reprimen o promueven su expresin. Una vez se produce la infeccin, las partculas patognicas son reconocidas e inactivan el represor de los genes para la defensa. Entonces se transcribir el opern dando lugar a sustancias txicas para el patgeno. P P R R Los patgenos pueden escapar a este tipo de respuesta: Neutralizando la sustancia que se forma.
Cambiando o bloqueando el sitio de accin de la sustancia. Plantas contnuo contacto con otros organismos
REGLA
EXCEPCIN Algunos patgenos Normalmente permanecen sanas Mecanismos de defensa
Resistencia
Avirulencia Susceptibilidad
Virulencia El ataque de patgenos es una situacin desfavorable
DETENER AMINORAR CONTRARRESTAR
Estos mecanismos de defensa pueden ser: Constitutivos. Inducidos. Activa Mecanismos de defensa Infeccin FSICOS: Capas gruesas de cutcula Presencia de tricomas Deposicin de ceras QUMICOS: Acumulacin de compuestos txicos NO INVOLUCRAN UNA RESPUESTA ACTIVA Como respuesta a la infeccin de un patgeno, son: Reaccin hipersensible Muerte celular programada. Produccin de fitoalexinas. Formacin de barreras estructurales Fsicas: lignina. Produccin de protenas para la resistencia.
Variabilidad natural en las plantas Efectos del mejoramiento gentico de las plantas sobre su variabilidad Mejoramiento gentico de las plantas para obtener resistencia a las enfermedades
Millones de aos de evolucin Plantas de cultivo actuales Signo de que portan muchos genes de resistencia a patgenos Seccin y reproduccin de lneas vegetales Su supervivencia en presencia de patgenos
Comienzos de la agricultura Seleccin de plantas silvestres de cada localidad La naturaleza y los patgenos Dbiles Agricultores Mejor produccin
Pasos iniciales Aumento de variabilidad de las plantas de una localidad Se combinan genes que se encontraban muy lejanos Pasos subsecuentes Eliminan variabilidad Se combinan los mejores genes
En poco tiempo algunas variedades mejoradas reemplazan a la mayora o a todo el resto de plantas de una extensa rea Pueden ser adoptadas por otros pases y reemplazar a las variedades locales
Estas variedades se usan mucho porque Fciles de obtener Estables y uniformes Todos quieren cultivarlas No slo hay beneficios Peligros de la uniformidad Vulnerabilidad de grandes plantaciones a brotes repentinos de epifitias de graves consecuencias
Fuentes de genes de resistencia
Tcnicas que se utilizan en el mejoramiento gentico clsico para obtener resistencia a las enfermedades
Mejoramiento gentico de las plantas para obtener resistencia al patgeno utilizando las tcnicas del cultivo de tejidos y la ingeniera gentica
Ventajas y problemas del mejoramiento gentico para la obtencin de resistencia vertical u horizontal
Vulnerabilidad de cultivos genticamente uniformes a las epidemias en las plantas
Mejoramiento gentico Variedades con alta productividad y de buena calidad Prueba de resistencia a patgenos de la zona Susceptible Resistente Distribucin para su produccin Se guarda, se descarta o se distribuye
-Otras variedades comerciales locales de o de otros lugares
-Variedades antiguas abandonadas
-Plantas emparentadas con el tipo silvestre
-Mutaciones inducidas Genes en variedades que crecen en zonas de la enfermedad
Mismos mtodos que se utilizan para mejorar cualquier caracterstica heredable Para hacer plantas resistentes a una enfermedad Dependen del sistema de cruza Autopolinizacin Polinizacin cruzada Proceso mucho ms complicado!
1) Solo puede ponerse en prctica cuando se ha inducido la enfermedad Organismo vivo y variable 2) La resistencia puede no ser estable y abatirse en ciertas condiciones Se han desarrollado sistemas: - Condiciones precisas de inoculacin del patgeno
- Monitoreo y control de las condiciones ambientales
- Evaluacin precisa de la incidencia de las enfermedades y severidad de la enfermedad
1) Seleccin masiva de semillas
2) Seleccin del pedigr o de lneas puras
Plantas con resistencias ms altas No hay control en polinizacin cruzada Fcil con autopolinizacin
3) Seleccin recurrente o retrocruza
R S Fcil en polinizacin cruzada, tiempo til
4) Uso de mutgenos como luz ultravioleta o sustancias qumicas
Cultivos de tejidos Ingeniera gentica -Propagacin de meristemos apicales -Cultivo de callos y de clulas vegetales individuales -Produccin de plantas haploides -Aislamiento, cultivo, transformacin, fusin y regeneracin de protoplastos Detectar, aislar, modificar, transferir y expresar genes
1) Cultivo de tejidos de plantas resistentes a la enfermedad
2) Aislamiento de mutantes resistentes a la enfermedad a partir de cultivos de clulas vegetales Estas plantas muestran gran variabilidad VARIACIN SOMACLONAL Intiles tiles
3) Produccin de dihaploides resistentes a partir de plantas haploides Colchicina
4) Aumento de la resistencia a enfermedades por la fusin de protoplastos
5) Transformacin gentica de clulas vegetales resistentes a enfermedades Es posible introducir DNA en clulas o protoplastos! -Agrobacterium tumefaciens -Microinyeccin -Electroporacin -Biolstica
Agrobacterium tumefaciens
Microinyeccin de DNA
Electroporacin
Biolstica
Las plantas que muestran resistencia vertical pueden ser totalmente resistentes a un patgeno Las plantas que muestran resistencia horizontal nunca es totalmente resistente o totalmente susceptible Fcil de manejar en programa de mejoramiento gentico Confiere una resistencia permanente, no se pierde
La resistencia no es para siempre, ya que los patgenos mutan La uniformidad gentica no se desea, a veces es catastrfica por una epifitia Usar medios de control qumico tambin Madriz K. 2002. Mecanismos de defensa en las interacciones planta-patgeno. Manejo integrado de plagas. 63: 22-32. De Wit, PJGM. 1997. Pathogen avirulance and plant resistance: a key role for recognition. Trends in plant science. 2: 452-458. Bentez A. 2005. Mejora clsica y mejora biotecnolgica. Tcnicas principales de biotecnologa vegetal. Avances recientes en biotecnologa vegetal e ingeniera gentica de plantas. Cap 2 y 3: 9-52. Ed. revert
Serrano M, Piol M.T. 1991. Cultivo de tejidos y clulas. Cap. 6: 65-76. Biologa del Agrobacterium tumefaciens. Cap. 14: 163-176. Agrobacterium tumefaciens como vector de genes. Cap. 15: 177-186. Mtodos de transformacin directa. Cap. 19: 207- 214. Biotecnologa begetal. Ed. Ciencias de la vida. Agrios G. N. 1996. Gentica de las enfermedades de las plantas. Fitopatologa. Cap 6:118-148. Ed. Noriega.