UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA

INSTITUTO DE BIOMEDICINA
SERVICIO DE DERMATOLOGA
FICHA BIBLIOGRFICA
Dra. Patricia Patio Guinand
EL RECEPTOR DE
GLUCOCORTICOIDES SE LOCALIZA EN
LOS LIGANDOS ADHERENTES EN LA
MEMBRANA PLASMTICA DE LOS
QUERATINOCITOS
Olivera Stojadinovic, Andrew Sawaya, Irena Pastar, Marjana Tomic-Canic
http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0063453
30 de abril de 2013
INTRODUCCIN
Glucocorticoides son considerados como la piedra angular
del tratamiento dermatolgico
Sus efectos estn mediados por una familia de receptores
de glucocorticoides (GR) que actan con un factor de
transcripcin
GR presente en el citoplasma unido a la protena Hsp90
Unin del receptor con el glucocorticoide ocasiona
activacin del receptor y liberacin de Hsp90 con
translocacin al ncleo para regular transcripcin
INTRODUCCIN
Se estudiaron los mecanismos a travs de los cuales GR regula
la transcripcin de genes importantes para la fisiopatologa de
las enfermedades de la piel y su tratamiento
Este artculo explica los efectos no genmicos del GR: son
efectos ms rpidos y no incluyen la transcripcin gentica
Se ha pensado que los efectos no genmicos de GR estn
mediados por interacciones entre receptores acoplados a la
protena G y GR de la membrana
La localizacin de GR y el mecanismo exacto del efecto no
genmico en la piel es desconocido







INTRODUCCIN
En el siguiente artculo se investig si el GR est localizado
en la membrana plasmtica y si las protenas acopladas a
la membrana estn asociadas
Se encontr que GR se localizan en la membrana
plasmtica de los queratinocitos. Tambin interactan con
catenina, formando parte de los ligandos adherentes
Es la primera observacin de GR de membrana asociados
a ligando adherentes y catenina






LIGANDOS ADHERENTES
Complejo de protenas que se
encarga de la unin entre clulas
Protena de unin entre las cadherinas y los filamentos de actina del
citoesqueleto.
CATENINA
OBJETIVO
DETERMINAR LA LOCALIZACIN DE LOS
RECEPTORES DE GLUCOCORTICOIDES (GR)
EN QUERATINOCITOS HUMANOS.
MATERIALES Y MTODOS
La piel se obtuvo de tejidos que se descartaron
de procedimientos quirrgicos
Cumpli con aprobaciones institucionales en la
Universidad de Miami. Human subject research
office
No se requiri consentimiento informado.





MATERIALES Y MTODOS
INMUNOCITOQUMICA
Se obtuvieron las imgenes, por cmaras y
microscopios especializados
MATERIALES Y MTODOS
WESTERN BLOTS E INMUNOPRECIPITADOS

MATERIALES Y MTODOS
RESULTADOS
PRIMER PASO determinar la localizacin de GR en los
queratinocitos
Se trataron con DEX y AC localizacin celular
A travs de la inmunohistoqumica
AC especial -catenin marcar la membrana plasmtica
Se encontr GR en el citoplasma y en el ncleo de los
queratinocitos (pequea fraccin en la membrana
plasmtica)
Se encontr una localizacin conjunta con -catenin
SUGIERE GR estn asociados con ligandos adherentes
(AJ)
Figure 1. Co-localization of the GR and -catenin to the plasma membrane of
keratinocytes.
Inmunofluorescencia
en los queratinocitos:
muestra la lozalizacin
conjunta de GR y -
catenin en la
membrana plasmtica.
Verde: GR
Rojo: -catenin
Amarillo: fusin
RESULTADOS
SEGUNDO PASO se realiz fraccionamiento celular y
Western Blot: se descubri la presencia de GR en varios
compartimientos celulares
Se comprob la pureza de las fracciones:
H3 se encontr slo en el ncleo
IkBA se encontr slo en el citoplasma (NFkB)
Se encontr GR en los tres compartimientos
RESULTADOS
TERCER PASO inmunoprecipitacin CONJUNTA:
Para probar las interacciones GR y AJ (-catenin)
Se utilizaron AC especficos GR
Para destruir las comunicaciones entre protenas de GR y la
fraccin membranosa
Se consigui GR adherido a -catenin
RESULTADOS
CONCLUSION INICIAL
RECEPTORES DE LOS GLUCOCORTICOIDES
LOCALIZADOS EN LA MEMBRANA PLASMTICA DE LOS
QUERTINOCITOS (COMO UN ELEMENTO DE LOS
LIGANDOS ADHERENTES) ESTAN ASOCIACIADOS CON -
CATENIN
DISCUSIN
Primera evidencia de localizacin de GR en la
membrana plasmtica de los queratinocitos
Descubrir nuevas vas de sealizacin de los
glucocorticoides en la piel
Importante para comprender los rpidos efectos de
los glucocorticoides
Esta revisin concuerda con estudios previos
donde los GR se encontraban en el citoplasma y el
ncleo
DISCUSIN
En la ausencia de glucocorticoides hay sntesis de
cortisol en los queratinocitos
En ausencia de terapia esteroidea persisten fracciones
del receptor en el ncleo y membrana plasmtica lo
que media efecto GENMICO Y NO GENMICO
respectivamente

DISCUSIN
La presencia de GR en la membrana plasmtica asociada
a -catenin se mantiene gracias a los ligandos
Tratamiento esteroideos aumentan la asociacin con -
catenin en la membrana plasmtica indicando que la
terapia, cambia el complejo GR--catenin
INTERROGANTE son iguales los GR en la membrana
que en el citoplasma y ncleo IMPORTANTE para
terapias esteroideas prximas y sus efectos secundarias


DISCUSIN
Existe otro componente catenin otro componente de AJ
Acta como corepresor de GR mediando regulacin de
los queratinocitos, en la curacin de las heridas
Se ha mostrado recientemente que la sntesis de
colesterol participa en las sealizaciones mediadas por
glucocorticoides en la epidermis, revirtiendo la inhibicin
de la curacin de las heridas
PRXIMAS INVESTIGACIONES
Identificar el rol de los efectos NO GENMICOS de los GR
en condiciones dermatolgicas como psoriasis y heridas
crnicas




CONCLUSIN
LA LOCALIZACIN DE GR EN LA MEMBRANA PLASMTICA
ES UNA NOVEDAD Y TIENE IMPLICACIONES
SIGNIFICANTIVAS EN EL ENTENDIMIENTO DE LOS
MECANISMOS POR LOS CUALES EJERCE SUS EFECTOS
NO GENMICOS EN LA PIEL Y EL POTENCIAL DE
TRATAMIENTO PARA VARIAS PATOLOGAS
DERMATOLGICAS