mRNA

tRNA
rRNA
Experimentado para conocer el rol del
ARN
Procesos de transcripcin y
traduccin en la clula
TRANSCRIPCIN
La transcripcin es el proceso por el cual se sintetiza ARN a partir de una hebra
molde de ADN
El concepto de ARN fue acuado por Franois Jacob
y Jacques Monod en 1961.

Las molculas de ARN son largas copias de
secuencias de 500 a 10.000 nucletidos de una cadena
simple de ADN.

ARN macromolcula formada por nucletidos
unidos por enlaces fosfodister en direccin 3! a 5!

Al igual que el ADN cada molcula de ARN tiene un
extremo 5! y uno 3!

Existe un ARNm correspondiente a cada gen o grupo
de genes que se van a expresar.
Existen tres clases de ARN
RNA mensajero (mRNA):
Codificar protenas, la informacin que porta est
codificada en forma de tripletes de nucletidos o codones,
indican qu aminocido formarn la nueva protena.

RNA de transferencia (tRNA):
Utilizados en la sntesis proteica como adaptadores entre el
ARNm y los aminocidos.

RNA ribosomal (rRNA):
Se sintetizan a partir de genes ribosomales ubicados en los
nuclolos. Poseen estructuras complejas de doble y simple
hebra y forman parte de los ribosomas.
Proceso de sntesis de una molcula de RNA
a partir de DNA
TRANSCRIPCIN
COMPONENTES
BASICOS DE LA
TRANSCRIPCION
DNA molde
RNA
polimerasa
NTP: ATP
UTP
GTP
CTP
Direccin 5-3
Precursores de la Transcripcin
Una cadena de ADN molde

En Escherichia coli, la ARN pol tiene un elevado peso
molecular (450Kb), y se adhiere a ella el factor sigma
(s).

Ribonucletidos trifosfatados: ATP, GTP, CTP y UTP.
Proporcionan la energa pero se utilizan como
monmeros en la sntesis del ARN. Se aaden uno por
vez al extremo 3! de la cadena en crecimiento de ARN.

Lugar:
Procariontes: ocurre a nivel de citoplasma.
Eucariontes: se realiza en el nuclolo.
5GATTACAGTACAGTGATCAGTACAGTACGTACATGTA 3
3CTAATGTCATG TCACTAGTCATGTCATGCAT GTACAT 5
What is the molecular basis
of transcription?
Bases moleculares de la transcripcin
5GATTACAGTACAGTGATCAGTACAGTACGTACATGTACGGG 3



3CTAATGTCATGTCACTAGTCATGTCATGCATGTACATCCC 5

3

....
3
...
1
2
SEPARACION DE LAS HEBRAS DE DNA
5
5GATTACAGTACAGTGATCAGTACAGTACGTAACGGG 3


5GAUUACA
3CTAATGTCATGTCACTAGTCATGTCATGCATTCCC ...5

HEBRA CODIFICANTE
HEBRA MOLDE o
TEMPLADO
SINTESIS de RNA en DIRECCION 5- 3
5GATTACAGTACAGTGATCAGTACAGTACGTAACGGG 3


5GAUUACAGUACAGUGAUCAGUACAGUACGUAACGGG 3
3CTAATGT CA TGTCACTAGTCATGTCATGCATTCCC 5

HEBRA CODIFICANTE
HEBRA MOLDE
SINTESIS EN DIRECCION 5- 3
RNA


ADN Hebra codificante
RNA POLIMERASA
Opera igual que la ADN polimerasa movindose de 3! 5! a
lo largo de la cadena molde de ADN sintetizando una nueva
cadena complementaria de nucletidos, en direccin 5! 3.

La cadena de ARN es antiparalela a la cadena molde de ADN.

No requiere de ARN cebador para comenzar la sntesis de ARN,
ya que es capaz iniciar una nueva cadena uniendo dos
ribonucletidos.

Para iniciar transcripcin la enzima se une al ADN en una
secuencia especfica denominada promotor, lugar exacto donde
comenzar la transcripcin y direccin hacia la cual avanzara la
enzima.

Carece de al capacidad nuclesidica que utiliza la ADN
polimerasa para cortar los nucletidos mal emparejados
ARN polimerasa
ETAPAS DE LA
TRANSCRIPCION
INICIACION


ELONGACION


TERMINACION
GEN

Secuencia completa de
nucletidos necesaria para la
sntesis de un producto funcional
( polipptido o RNA )
inicio
promotor
ESTRUCTURA DE UN GEN . Secuencias
reguladoras y secuencias codificantes
ARN
polimerasa
En una regin localizada unos 35 nucletidos aprox.
ro arriba del nucletido en el que comienza la
transcripcin, hay una secuencia conocida como caja
TATA (zona rica en adenina y timina). Es importante
para determinar con precisin el sitio donde se inicia la
transcripcin.
Promotor en procariontes
FASES DE LA TRANSCRIPCIN
La transcripcin ocurre en tres fases: iniciacin, elongacin y
terminacin.
La ARN polimerasa
contiene una
subunidad
denominada factor
sigma(en
procariontes), que
reconoce al promotor
sobre el ADN. Una
vez que ha
comenzado la
trascripcin , el factor
sigma es liberado y la
enzima continua
sintetizando sin l al
ARN.
Iniciacin
FACTOR SIGMA JUEGA
PAPEL CLAVE
EN LA TRANSCRIPCION EN
PROCARIONTES
RECONOCIMIENTO SECUENCIA PROMOTORA
ESPECIFICA

POSICIONA RNA POLIMERASA EN EL PROMOTOR

FACILITA LA APERTURA DEL DNA EN CERCANIAS DEL +1
La ARN polimerasa recorre la hebra de ADN hacia
su extremo 5!, sintetizando una hebra de ARNm en
direccin 5! 3!, el crecimiento de la cadena
continua hasta que la polimerasa encuentra una seal
de terminacin.
ADN hebra
codificante
ADN hebra
molde
ARN
transcrito
Elongacin
El proceso finaliza al
encontrarse con una
secuencia
palindrmica rica en
G y C es el trmino
del proceso.
En este punto la
enzima se detiene y
libera el ADN molde
y el transcripto recin
sintetizado.
Luego la enzima se
asocia nuevamente
con un factor sigma
libre y busca a otro
promotor para
reanudar el proceso.
Terminacin
DNA
Cytoplasm
Nucleus
Eukaryotic Transcription
Export
G
AAAAAA
RNA
Transcription
G
AAAAAA
RNA
Processing
mRNA
Transcrito primario
Procesamiento del ARN mensajero
en eucariontes
La transcripcin se produce en el
ncleo, pero la sntesis proteica
tiene lugar en los ribosomas
citoplasmticos.

Antes de que un ARNm sea
traducido, debe ser transportado
fuera del ncleo a travs de
pequeos poros en la envoltura
nuclear.

Debe experimentar varias etapas
de procesamiento el ARN
FASES DE TRANSCRIPCION EN EUCARIONTES
Iniciacion : En las clulas eucariotas, no hay factor sigma, pero en
cambio, existen factores activadores. Estos disocian las
histonas,desenrrollan la doble vuelta de ADN y dejan accesible la
region promotora. La ARN pol II se une a una zona del ADN llamada
promotor con una secuencia CAAT y TATA

B) Elongacion: la sintesis continua en sentido 5 -3, la ARN pol II
polimeriza ribonucleotidos.transcritos unos 20-30 nucleotidos, se aade
al extremo 5del ARNm un resto de metil guanosina trifosfato( protege
de nucleasas y es reconocido como punto de inicio de la traduccion)

C) Finalizacion: la ARN pol reconoce la secuencia de termino TTATTT
(ADN). La enzima poli-A polimerasa adiciona una cola de poli-A al
extremo 3,la cual interviene en la maduracion y transporte fuera del
nucleo.

D) Maduracion: se produce en elnucleo y la hacela enzima RNPpn
que elimina los nuevos intrones formados, que son secuencias no
codificadoras.

Capping en el extremo 5


Poliadenilacin en el extremo 3


Splicing o remocin de intrones


Procesamiento transcrito primario
Capping en el extremo 5
Adicin del CAP. Un nucletido
modificado (CAP) se aade al
extremo 5! del mensajero.

Este casquete es imprescindible
para la unin del ARNm al
ribosoma y protege al ARNm de la
degradacin.
En el extremo 3! del ARNm hay una secuencia seal (AAUAAAA) a la que se
unen factores especficos y la enzima poli-A polimerasa.

Esta enzima estimula el corte en un sitio ubicado 10 a 35 nucletidos hacia el
extremo 3! de la seal. A continuacin la enzima agrega de a uno , una cola
de ribonucletidos de adenina (cola de poli-A) y as se genera el extremo 3!
del ARNm maduro.

Esta cola de poli-A contiene 200 250 nucletidos y parecera que influye:
en la estabilidad
en la capacidad de que los ARNm sean traducidos en el citoplasma
Poliadenilacin en el extremo 3
Splicing o remocin de intrones
Corte y empalme o splicing
El ARNm experimenta un proceso
de corte y empalme de secuencias,
llamadas intrones, y el posterior
empalme de las secuencias
restantes, los exones.
1. Se unen al ARNm inmaduro unas
pequeas partculas de ARN
nucleares asociadas con protenas
denominadas snRNP (small nuclear
ribonucleo-protein particles)
2. Las snRNP se unen a secuencias
cortas ubicadas entre los intrones y
los exones. Luego se aaden ms
protenas y forman con el ARN un
complejo denominado spliceosoma
snRNP
Las snRNP realizan funciones
de reconocimiento de secuencias
llevan a cabo funciones catalticas
El splicing es catalizado por
spliceosomas las secuencias que
se eliminan son los intrones,
mientras que las secuencias que
permanecen y forman parte del
ARNm maduro son los exones
Splicing alternativo
TIROIDES CEREBRO
TIROIDES
CEREBRO
SPLICING ALTERNATIVO TEJIDO ESPECIFICO
El splicing de un transcrito primario puede dar por
resultado diferentes ARNm maduros segn que
secuencias sean eliminadas durante el proceso.

1. Se escinden slo los intrones

2. Se escinden adems de un exn ( en este caso el
exn 3).

Este proceso se denomina splicing alternativo y da por
resultado la sntesis de polipptidos diferentes a partir
de la informacin codificada por un mismo gen

La enorme diversidad de tipos celulares
contiene el mismo genoma
A B C D E F G H I J K L M
250 tipos celulares especializados
Diferentes tejidos y rganos
Diferencias
en la
transcripcin
entre
eucariontes y
procariontes
Proceso de sntesis de una molcula de RNA
a partir de DNA
TRANSCRIPCIN