Fosforilacin Oxidativa

Combustin directa de la
glucosa
Gran
energa de
activacin
superada
por el
calor del
fuego
e
n
e
r
g

a

l
i
b
r
e

Oxidacin a nivel celular
Pequeas energas de activacin
superadas por la temperatura
corporal
Molculas
transportad
oras
activadas
Toda la
energa
se
libera
como
calor
AZUCAR +
O
2
AZUCAR +
O
2
Proceso mediante el cual se genera ATP
como resultado de la transferencia de
electrones desde el NADH o el FADH
2
al
O
2
, a travs de una serie de
Transportadores de electrones
Ubicacin:
En las mitocondrias de las clulas eucariotas
aerbicas
En la membrana plasmtica (la ms interna) de
las clulas procariotas aerbicas
E. Kennedy y A. Lehninger (1948)
Las Mitocondrias contienen:
Cadena respiratoria
Enzimas del CAT
Enzimas oxidativas de los cidos grasos
Produccin de
ENERGIA
qumica: ATP
La principal funcin de la Mitocondria es la
conversin de energa potencial de los alimentos en
ATP.
MEMBRANA EXTERNA: Relativamente PERMEABLE
canales que regulan el transporte, oxidadasas,etc
MEMBRANA INTERNA: MUY IMPERMEABLE
Cadena Respiratoria,
Fosforilacin oxidativa,
ciertas deshidrogenasas, transferasas
MATRIZ:
Ciclo de Krebs,
oxidacin de cidos grasos
ciertas enzimas del ciclo de la urea.
La Fosforilacin Oxidativa es el proceso por el cual se
sintetiza ATP como resultado de la transferencia de
electrones desde el NADH o el FADH2 al O2 a travs de
una serie de transportadores de electrones conocida como
Cadena Respiratoria
La Oxidacin y la Sntesis de ATP estn acopladas
mediante el Flujo de Protones a travs de la membrana
mitocondrial interna
Principales Componentes Qumicos
Citocromos
Hierro Sulfo Protenas
Ubiquinona
CITOCROMOS David Keilin 1925
Protenas transferidoras de electrones, slo clulas
aerbicas. Son HEMOENZIMAS
Experimentan cambios reversibles de valencia
Fe(II)/Fe(III) durante su ciclo cataltico
Deben ser rpdos y especficos al paso de
electrones a travs de complejos acoplados protena-
protena y a distancias relativamente grandes (> 10)
Otras hemoenzimas son Catalasas y Peroxidasas
Grupo Prosttico HEMO: Hay tres tipos de
grupos HEMO y son A,B y C dependiendo de los
sustituyentes de las cadenas laterales. El HEMO
C es el nico que es enlazado covalentemente a
una protena por medio de residuos de Cisteina
Hemo c
protena
Hemo en citocromo c
Hemo en citocromo c
protena
Citocromos
Citocromo c
HIERRO con 6 enlaces de coordinacin:
4 coordinan con los N del tetrapirrol
2 con los aa de la Protena (His 18 y Met 80)
Conservacin de la
estructura de los
citocromos c
Cit c de mitocondria
de corazn de Atn
Cit c2
Rhodospirillum rubrum
Cit c550
Paracoccus denitrificans
HIERRO SULFO PROTEINAS
Protenas con Hierro no Hemnico
Centros Hierro Azufre: Son grupos prostticos que
contienen 1-4 atomos de hierro, acomplejados a una
combinacin de Azufre y Cisteina-Azufre.
Actan como transportadoras de electrones,
experimentando transiciones reversibles Fe(II)
Fe(III)
Las protenas de transferencia de electrones pueden
contener multiples centros Fe-S.
Hierro
Azufre Inorgnico
Azufre de la Cistena
2 Fe 2 S
4 Fe 4 S
1 Fe
Centros Hierro-Azufre
Centro 2Hierro-2Azufre
De la Ferredoxina
Coenzima Q - Ubiquinona
DIAGRAMA DE CADENA
RESPIRATORIA
Componentes de la Cadena de Transporte
Electrnico Mitocondrial
Complejo I: NADH-Q reductasa
NADH deshidrogenasa
Complejo II: Succinato-Q reductasa
Succinato deshidrogenasa
Complejo III: Q- citocromo c oxidoreductasa
Citocromo reductasa
Complejo IV: Citrocromo oxidasa
Cit c
Componentes de la Sntesis de ATP
Complejo V: ATP sintasa

COMPLEJO I
Cataliza la oxidacin del NADH mediante una serie de
etapas. En el hombre este complejo incluye incluye 43
protenas.
Transferencia Inicial de e
-

NADH + H
+
+ FMN NAD
+
+ FMNH
2

Reoxidacin en centros Fe-S
FMNH + (Fe-S)
ox
FMN + (Fe-S)
red
+ H
+

Los e
-
pasan a travs de una serie de centros Fe-S en el
Complejo I, y son transferidos a la Coenzima Q.
La coenzima Q acepta 2 e
-
y lleva 2 H
+
para producir QH
2

Rotenona,
Amital
Espacio intermembrana
Espacio interior
Origen del NADH a partir de
deshidrogenasas NAD dependientes
Piruvato Acetil CoA
Isocitrato - Cet Glutarato
Cet Glutarato- Succinil CoA
Malato Oxal Acetato
Glutamato - Cet Glutarato
3 Hidroxiacil CoA - Cetoacil CoA
CAT
GLUCOLISIS ETAPA
AEROBICA
OXIDACION
ACIDOS GRASO

FADH
2

e-
COMPLEJO II
Este complejo enzimtico transfiere electrones
del succinato a la coenzima Q.
En esta etapa no se produce translocacin de
protones a travs de la membrana.
El FAD del complejo II es reducido a FADH
2

durante la oxidacin de succinato a fumarato
(ciclo de Krebs).
FADH
2
es re-oxidado por la transferencia de
electrones a travs de centros Fe-S del complejo
II a coenzima Q, produciendo QH
2
.
La coenzima Q acepta 2 e
-
y lleva 2 H
+
para producir QH
2

Otras Enzimas Flavn deshidrogenasas
Acil (graso) CoA trans Enoil CoA
Glicerofosfato Fosfato de dihidroxiacetona

COMPLEJO III
Cataliza la transferencia de electrones desde QH2
al citocromo c, bombeando Protones a travs de la
membrana membrana mitocondrial interna.

El centro de hierro-azufre en una de las mitades del
dmero interacta con la Coenzima QH2 enlazada y el
hemo c
1
en la otra mitad del dmero.
Complejo III acta en el bombeo de H
+


Antimicina A
Inhibidor
Se muestran 4 centros
redox fundamentales.
El citocromo b contiene
2 grupos Hemo b
H
y b
L.
La Hierro Sulfo
Protena contiene un
centro 2Fe-2S.
El citocromo c
1

contiene otro grupo
Hemo
Los grupos hemos b se sitan
para proveer una va para la
transferencia de electrones a
travs de la membrana.
. El centro Fe-S extrae un e
-

desde la Co Q, y luego se
acerca ms al hemo c
1

(citocromo c
1
) al cual transfiere
el e
-
. La protena del centro de
hierro-azufre aparece en verde
Complejo III

Hemo b
H
Hemo b
L
Hemo c
1
m
e
m
b
r
a
n
a


Hemo
Citocromo c

COMPLEJO IV
Los 4 e
-
son transferidos de a uno a la vez dentro del
complejo. Los dominios intermembrana del Complejo
IV consiste principalmente de estructuras -helices.
membrana
HIERRO en los Hemo A
y Hemo A
3.
COBRE A (Cu
A
,
consistente de 2 atomos
de cobre adyacentes)
COBRE B
MAGNESIO y ZINC.
El O
2
reacciona en un
centro binuclear,
compuesto de Hemo A
3
,
COBRE B.
Centros Metalicos
Cobre A
Cobre B
Hemos
Monxido
carbono
Hierro
O
2
+ 4 H
+
+ 4 e
-
2 H
2
O
Complejo V: ATP sintasa, ATPasa
Componentes de la Sntesis de ATP
COMPLEJO V: ATP Sintetasa
F
1
: la sub unidad cataltica, hecha de 5 tipos de cadenas
de pptidos con la estequiometra
3
,

3
,

g, d , e.
F
o
: un complejo de protenas integrales de membrana
que media en el transporte de protones (canal de protones)
El complejo F
1
F
o
acopla la sntesis del ATP al transporte
de H
+
hacia la matriz mitocondrial.
Se requiere el transporte de por lo menos 3H
+
por cada
ATP sintetizado.
Complejo V
ATP asa
Matriz
Espacio intermembrana
Conducto de
Protones
Los componentes
funcionales seran (1)
un rotor anillo c y
talloge (2) unidad
esttica: el resto de la
molcula

F1 ATPasa
La subunidad g rompe la simetra del
hexmero
3

3
. Cada subunidad
interacciona diferente con g
F
0
Subunidad c
La subunidad F0
contiene el Conducto
de Protones. Est
formado por un anillo
c de 10-14 unidades
El flujo de protones a
travs del canal
proporciona la fuerza
de rotacin de F
1

MECANISMO DE SINTESIS DE ATP
O
T
L
Las responsables son las 3 subunidades , que pueden estar en 3
estados conformacionales diferentes: T tenso, L relajado, O abierto.
La interconversin entre los 3 estados est dirigida por la rotacin de la
subunidad g.
El estado T contiene fuertemente el ATP recin sintetizado que no se
puede liberar. El estado O puede desprender al ATP. El estado L tiene una
gran afinidad por el ADP y Pi
La ATPasa est guiada por la Fuerza protomotriz
- gradiente de pH
- potencial de membrana
Un potencial de membrana positivo favorece la sntesis
de ATP al provocar una alta concentracin local de H+
en la regin entre F0 y F1
La translacin de 3 H+ a travs de la ATPasa origina la
sntesis de un ATP
Actualmente la estimacin ms correcta de los
H+ bombeados desde la matriz por cada par de e-
es:
NADH-Q reductasa 4 H+
Citocromo reductasa 2 H+
Citocromo oxidasa 4 H+
La sntesis de una molcula de ATP est guiada por el
flujo de 3H+ a travs de la ATPasa.
El transporte de un ATP de la matriz al citosol supone
un costo de un H+ adicional
Cuando se rompe la continuidad de la membrana
mitocondrial y se disipa el gradiente de H+, el sistema
ATPasa funciona en forma inversa
matiz
espacio
intermembrana
mitocondria
ultrasonido

Glucolisis: Glucosa Piruvato (citosol)
[ 1 1 +2 +2] = +2 ATP +2 NADH
Piruvato Acetil CoA (mitocondria)
+2 NADH
Ciclo de cidos Tricarboxlicos
+ 2 ATP (GTP)
+6 NADH
+2 FADH2
+ 4 ATP + 25ATP +3 ATP
(+10 x 2.5) (+2 x 1.5)
+ 32 ATP
Mecanismo de Lanzadera del glicerofosfato
Mecanismo de Lanzadera malato aspartato
(corazn hgado)