PROCEDIMIENTO:

A) Evaluacin de la coordinacin motora: prueba rotarod

Se ajusta el rotarod a una vel. de 16 rpm
Se entrena a los ratones .
Colocar a c/ratn en el rotarod dejando que el cilindro gire por 2 min., si se can deben
ponerse de nuevo, hasta que se mantengan por ese tiempo.
Dividir a los 30 ratones en 6 grupos de 5 individuos c/uno.
Administrar a c/grupo de ratones las dosis que se indican en la tabla.
Llevar a cabo la prueba de rotarod a c/ ratn registrando el tiempo que permanecen en
movimiento cte. sobre el cilindro, hasta un mximo de 120 s.
Repetir el procedimiento con c/ ratn cada 10 min. drate 30 min.
B)EVALUACION DE LA ACTIVIDAD EXPLORATORIA.
El cilindro debe estar limpio.
Colocar un pedazo de papel mas grande que el dimetro del cilindro .
Despus de los 35 min. despus de haber administrado el diacepam o la solucin salina
introducir al animal al cilindro.
Poner el cronometro durante 5 min y registrar el numero de levantamientos.
Limpiar el cilindro y cambiar el papel.
Hacer el mismo procedimiento con cada ratn.
El ratn control es el que recibi la sol. salina.
C) EVALUACION DE LA ACTIVIDAD MOTORA POR MEDIO DE LA PRUEBA DE CAMPO
ABIERTO.
Despus de que el ratn paso por la prueba del cilindro de exploracin , se debe colocar el
ratn en medio de la caja de acrlico.
Se cuenta el numero de cuadros que el ratn recorre, teniendo en cuenta que deben estar
las 4 patas dentro del cuadro durante 2 min.
Al terminar el lapso del tiempo se debe limpiar el acrlico.
Continuar el procedimiento con todos los dems ratones.
La reduccin del nmero de cuadros recorridos es indicativo de la perdida de actividad
motora.
D)EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANSIOLITICA POR MEDIO DEL TABLERO DE
HOYOS.
Despus de que el ratn ha pasado por la prueba de campo abierto , se coloca el ratn en
medio del tablero de hoyos, por 2 min y se cuanta el numero de hoyos que explora el ratn
metiendo la nariz. Quitar el ratn y limpiar.
Continuar con el mismo procedimiento con todos los ratones.
La reduccin de numero de hoyos explorados es indicativo de actividad ansioltica.
E)EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTICONVULSIVANTE
Despus del tablero de hoyos se le administra por va intraperitoneal PTZ una dosis de
120mg/kg del lado contrario al diacepam.
Posterior a la administracin, iniciar con el cronometro e introducir en una caja de acrlico
Medir el tiempo en el cual se administra la primera convulsin clnica y la primera tnica.
Si no presenta convulsiones despus de 30 min se considera un ratn protegido.
Registrar si hay muerte en esos 30 min,
Repetir el procedimiento con los dems individuos.
Anlisis de resultados
Las benzodiacepinas no sustituyen el GABA, pero al parecer aumentan sus efectos sin
activacin directa de receptores de GABA o abriendo los conductos de cloruro asociados. El
aumento en las conductancia en los iones de cloruro inducidas por la interaccin de
benzodiacepinas con GABA hace la forma de un incremento en la frecuencia de
acontecimiento de apertura de conductos. Este efecto se debe en parte al aumento a la
afinidad del receptor por GABA.
El espectro de acciones farmacolgicas inducido por los frmacos que modulas las acciones
de GABA es influido por la composicin de la subunidades ensambladas en la formacin del
receptor GABA
A
.
El diacepam facilita la accin de GABA
A
y acta como modular alosterico positivo de la
funcin del receptor. El sitio de unin se encuentra ntrelas subunidades y . Acta
deprimiendo la conduccin nerviosa en ciertas neuronas del SNC, donde produce desde una
leve sedacin hasta hipnosis o coma.
Las benzodiacepinas ejercen efectos inhibitorios en los reflejos polisinpticos y la transmisin
internuncial, y en dosis altas pueden deprimir la transmisin en las uniones neuromusculares
esquelticas. Algunas acciones selectivas de este tipo que causan relajacin muscular
pueden demostrarse en animales por medio de las diferentes pruebas como el cilindro de
exploracin, el campo abierto y el tablero de exploracin (hoyos). Cada una de estas es para
identificar algo distinto como por ejemplo con el cilindro de exploracin se puede interpretar
el grado de sedacin , con el campo abierto la ansiedad y el tablero de hoyos lo ansioltico
del animal con el que se esta trabajando . Se llevaron acabo las pruebas de Rotarod y
miorrelajacin para observar el curso temporal respecto al tiempo del frmaco en actuar en
su sitio de unin. Ya que el diacepam es un frmaco con alta liposolubilidad por lo que los
efectos sern relativamente rpido. Adems de observarse los efectos sedantes afectando
la coordinacin motora.
El orden de cada una de las pruebas realizadas se llevo a cabo de esa manera, ya que
comenzando con la miorrelajacin o con el Rotarod se comprueba el comienzo de el efecto
del frmaco sobre los animales asegurando su buena administracin y posteriormente la
observacin de sus acciones en el organismo.-
El PTZ es un antagonista no competitivo de receptores GABAA .El modelo de induccin
qumica de convulsiones por PTZ es til para evaluar las convulsiones clnico-tnicas, ya
que son muy similares a las que presentan los humanos , es ampliamente utilizado en la
evaluacin de la actividad anticonvulsivante de nuevos molculas debido a que se busca que
dichos compuestos funcionen como antagonistas al PTZ.
La mayora de las evidencias indican que el PTZ interacciona con el sitio de unin a
picrotoxina e el receptor GABA bloqueando el canal de Cl- . aunque el efecto del PTZ en el
cerebro es inespecfico, se sugiere que expresin de las crisis inducidas por este frmaco ,
este mediada por estructuras cerebrales como la neo-corteza ,mientras que la extensin
tnica se modula en regiones del diencfalo y tallo cerebral, incluyendo la formacin reticular,
el bulbo y la sustancia gris central.
La aplicacin sistmica de dosis bajas de PTZ (20 mg/kg), producen crisis de ausencia,
mientras que dosis mayores a 50 mg/kg producen crisis convulsivas del tipo clnico-tnicas
generalizadas . La administracin sistmica de dosis altas de PTZ en ratas produce un
patrn tpico convulsivo. El patrn conductual consiste en inicialmente en movimientos
faciales, piloereccin y cola erguida, seguida de espasmos musculares
provenientes de la musculatura del cuello y tronco que se propagan a las extremidades,
posteriormente el animal pierde la postura y se desencadena la fase clnica que es
caracterstica por una serie de movimientos involuntarios bruscos seguidos de la crisis tnica
que es una hiperextensin de las extremidades. Por lo anterior la administracin de PTZ se
considera un modelo idneo para el estudio de crisis tnico-clnicas generalizadas; sin
embargo, este modelo no permite diferenciar los frmacos efectivos en las crisis tnico-
clnicas y las crisis de ausencia.
Conclusin
Por medio de la realizacin de esta practica se llego a la conclusin que el principio activo de
diazepam pertenece al grupo de los tranquilizantes benzodiazepnicos, sustancias que tienen
propiedades ansiolticas y antineurticas, psicosedativas y antiagresivas, sedantes,
miorrelajantes (del msculo estriado y uterino), anticonvulsivantes y potencializadoras de
hipnticos, anestsicos y analgsicos. Se sabe actualmente que estos efectos se basan en un
refuerzo de la accin del cido gama-aminobutrico (GABA), principal neurotransmisor
inhibidor, en el cerebro.
Grupo: 6 Equipo. 3
Lozano Lopez Lizette.
Barranco Jasso Dea Carla Luz.
Morales Garca Laura Adriana
Hiptesis: