ACTIVIDAD ENZIMTICA

Factores que Influyen en la Actividad

de la Enzima
1. Concentracin de Enzima
2. Concentracin de sustrato
3. pH
4. Temperatura
5. Presencia de Inhibidores
Efecto de la Concentracin de Enzimas
Efecto de la Concentracin del Sustrato
Efecto del pH del medio
El sitio activo de la enzima esta frecuentemente compuesto de
grupos ionizables que deben estar en la forma inica
adecuada para mantener la conformacin, unir los sustratos o
catalizar la reaccin.
La actividad de la enzima debe ser medida al pH ptimo
Efecto de la Temperatura
Aunque la elevacin de la temperatura incrementa la velocidad de una reaccin
catalizada por enzimas, esto es verdad slo dentro de limites estrictos de
temperatura.
(BRIGGS-HALDANE)
E + S ES
k
1
k
2
k
3
E + P
[E
t
] = [E] + [ES]
V
i
= k
3
[ES]
V
max
= k
3
[E
t
]
V
f
= k
1
[E] [S] = k
1
([E
t
]- [ES]) [S]
V
d
= k
2
[ES] + k
3
[ES] = (k
2
+ k
3
) [ES]
En el estado estacionario puesto que d[ES]/dt = 0, V
f
= V
d
; por lo tanto,
k
1
([E
t
]- [ES]) [S] = (k
2
+ k
3
) [ES]
([E
t
]- [ES]) [S] k
2
+ k
3

=
[ES] k
1
= k
m
y dividiendo/[ES],
[ES]
[E
t
] [S]
=
K
m
+ [S]
Como V
i
/k
3
= [ES] y V
max
/k
3
= [E
t
],
V
i

V
max
[S]
=
K
m
+ [S]
La velocidad de produccin
de una forma particular de
la enzima es exactamente
igual a su velocidad de con-
versin en otra forma inter-
mediaria de la enzima.
Cintica de Michaelis-Menten
GRAFICA DE LINEWEAVER-BURK
Inhibicin enzimtica
Inhibicin Reversible

Inhibicin Irreversible
Inhibicin enzimtica Reversible
Inhibidores reversibles
Inhibicin competitiva
Inhibicin mixta
Inhibicin no competitiva

Inhibicin Competitiva
Quimioteraputicos: metotrexato
Estatinas
Inhiben a la HMG-CoA reductasa
Inhibicin no Competitiva
Indinavir, nelfinavir, ritonavir y saquinavir
Inhibicin Mixta
1/V
i
Inhibicin enzimtica Irreversible
Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima.
Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos funcionales reactivos como
aldehdos, haloalcanos o alquenos. Estos grupos electroflicos reaccionan con las
cadenas de aminocidos para formar uniones covalentes. Los residuos modificados
son aquellos que contienen en sus cadenas laterales nuclefilos como por ejemplo un
grupo hidroxilo o un grupo sulfhidrilo.
Esquema de la cintica enzimtica de los
inhibidores irreversibles
Diisopropilfluorofosfato
Penicilina
Penicilina (en blanco) unida a una
transpeptidasa bacteriana.
Inhibe la sntesis de la pared bacteriana
Aspirina
Inhibe la sntesis de Prostaglandinas
Regulacin de la Actividad enzimtica
Conservacin de la Homeostasia
El conocimiento de los factores que afectan las
velocidades de las reacciones catalizadas por
enzimas, es esencial para entender el mecanismo
de la homeostasia en las clulas normales y para
comprender la base molecular de alguna
enfermedad.
CIERTAS ENZIMAS SON REGULADAS POR EFECTORES ALOSTRICOS
Respuestas cinticas
0
5
10
15
20
0 2 4 6 8 10 12
Concentracin de S
V
e
l
o
c
i
d
a
d

I
n
i
c
i
a
l
REGULACION ALOSTERICA DE LA PFK-1
Regulacin por Fosforilacin-
Desfosforilacin
La sntesis de ciertas enzimas como precursores inactivos tienen
ventajas en la regulacin