TCNICAS HISTOLGICAS

Conjunto de procedimientos utilizados para el estudio microscpico

(histolgico) de las piezas anatmicas.
No los va a realizar el estudiante, pero debe conocer sus
fundamentos, la ejecucin, la interpretacin de los resultados para
una mejor comprensin del estudio histolgico.
Todas tienen en comn el que requieren de un corte muy delgado
del tejido y montarlo en una lmina de vidrio antes de observarlo
al microscopio.
Dos tcnicas principales: la de la parafina y la de la congelacin.
TCNICA DE LA PARAFINA:
Obtencin de la muestra;
Fijacin;
Deshidratacin;
Aclaracin;
Inclusin;
Seccin; y,
Montaje y tincin.
Obtencin de la muestra
Tomar pequeo fragmento de pocos milmetros de tejido de cadver
(necropsia) o del vivo (biopsia) en un acto quirrgico.
Requiere de movimientos delicados y de aparatos afilados.
Fijacin de la muestra
Objetivo: endurecer el tejido obtenido que es muy blando y detener la
degeneracin postmortem.
Se coagulan las protenas aldehdo frmico al 4%.
Los fijadores son antispticos matan cualquier germen presente.
deshidratacin de la muestra
Consiste en reemplazar el agua del tejido con la parafina lquida.
Lavado de la muestra con alcoholes de grado ms superior cada
vez, hasta llegar al grado absoluto.
aclaracin de la muestra
Es la eliminacin del alcohol y la inclusin de la parafina en su reemplazo.
Se emplea el xilol como solvente.
inclusin de la muestra
Es la introduccin de la muestra en parafina lquida se reemplaza
al xilol.
seccin de la muestra
Corte muy delicado de la muestra, una vez
que se ha enfriado.
Se emplea el MICRTOMO que permite
obtener una cinta de cortes sucesivos.
Montaje y tincin de la muestra
Montaje de las cintas del espcimen sobre un portaobjetos para
someterlo a tincin.
Se invierten los pasos de la tcnica, lo cual permite pintar el tejido
con colorantes solubles en agua.
TCNICA DE LA CONGELACIN:
Consiste en la solidificacin del fragmento corriente de bixido de
carbono hielo seco.
Criostatopermitelacongelacindelamuestraycorteaigual
temperaturaabreviaeltiempodepreparacindelcorte.
Es una tcnica ms usada que la anterior.
Tcnicas de coloracin
Igual que las tcnicas histolgicas, debieron atravesar por
varias etapas histricas hasta llegar a perfeccionarse.
Se usan dos tipos de colorantes: uno cido cuya afinidad es
por los elementos citoplasmticos y uno bsico cuya
afinidad es por los elementos nucleares.
Tcnicas que permiten diferenciar los distintos componentes
de las clulas y de los tejidos.
Hay varios tipos de tcnicas: hematoxilina-eosina, del cido
perydico de Schiff, de tricrmico de Masson, de Van Gieson, de
azul alcin, de reticulina, de Azn, de Giemsa, de azul de toluidina
(metacromasia), de plata y oro, de alumbre de cromo, de azul de
isamina, de Nissl, de azul de metileno, de Sudn negro y osmio,
tricrmica de Mallory, y de Feulgen.
Los colorantes de hematoxilina y eosina:
La combinacin ms empleada de colorantes. Un corte teido con este
mtodo se denomina un corte de H y E (o simplemente HE).
La hematoxilina es un colorante bsico, proporciona color azul purpreo a los
constituyentes tisulares con los cuales se combina (ncleos, ribosomas, y
retculo endoplsmico rugoso debido al alto contenido de ADN y ARN). Los
tejidos que se tien en color azul con la hematoxilina son basfilos.
La eosina es un colorante cido, da color rosa o rojo a los constituyentes
tisulares con los cuales se combina los tejidos que se tien en color rosa o
rojo con la eosina se dice que son aidfilos o eosinfilos (mayora de protenas
citoplasmticas y citoplasma).
Arriba a la izquierda se observa una clula heptica, coloreada con HE, donde el ncleo muestra un borde color
azul, dependiente del DNA y sensible a la hematoxilina. El citoplasma se pinta de rosado, por la protena que se
tie con la eosina. Los espacios vacos dependen del depsito de glucgeno. Arriba a la derecha se observa la
misma clula tenida con la tcnica de PA-Schiff (que tie algunas macromolculas e hidratos de carbono de color
carmes) y hematoxilina. La protena del citoplasma se tie de rojo. La imagen de abajo muestra a varias clulas
epiteliales sinuadas sobre tejido conectivo laxo, teidas con la tcnica de PA-Schiff y hematoxilina. Dos de las
clulas que se ven son caliciformes y secretan moco (que es una glucoprotena).
La reaccin del cido perydico de Schiff (PAS):
Tie carbohidratos complejos de un color rojo oscuro,
tradicionalmente descrito como magenta.
Las clulas que tien sus carbohidratos con este compuesto, se
dice que son PAS positivos.
Ejemplos: clulas caliciformes de los aparatos respiratorio y
gastrointestinal; membranas basales y bordes en cepillo de los
tbulos renales, el cartlago y algo del colgeno.
Tricrmico de Masson:
Se llama tambin de tejido conectivo se emplea para
demostrar principalmente colgeno como tejido de
soporte.
Esta tcnica produce tres colores: azul (ncleo y
estructuras basfilas); verde o azul (colgeno); y rojo
brillante (citoplasma, msculos, eritrocitos y queratina).
De Van Gieson:
; Coloracin de tejido conectivo.
; Colgeno de color rojo, ncleos azules, eritrocitos y
citoplasma amarillentos.
; En combinacin con tincin elstica se tie de negro
/ azul (vasos sanguneos y piel).
De azul alcin:
Tincin de mucinas, empleada en unin con mtodos
como la H-E o el de Van Gieson.
Tincin de color azul (como del cartlago) o verdoso (en
combinacin con el de Van Gieson).
Tincin de reticulina:
+ Tincin en negro / azul.
+ Demuestra las fibras de reticulina del tejido de
sostn.
Tcnica de Azn:
O Mtodo de tejido conectivo.
O Demuestra detalles citolgicos finos (epitelio).
O Ncleos rojo brillante; colgeno, membrana basal y
mucinas azul; msculo y hemates de naranja a
rojo.
Tcnica de Giemsa:
- Mtodo estndar de tincin de clulas
sanguneas y mdula sea
- Ncleos de color azul oscuro a violeta;
citoplasma de color azul plido y eritrocitos de
color rosa plido.
Tcnica de azul de toluidina:
Tie principalmente componentes
cidos en varios tonos de azul.
Se emplea en muestras finas
includas en resina.
Algunos componentes cambian la
coloracin a rojo (metacromasia).
Corte de trquea teido con hematoxilina-eosina, que muestra un
ejemplo de metacromasis. La ancha zona, intensamente rojo vilcea
de la mitad inferior de la imagen es cartlago hialino, cuya sustancia
basal se tie por metacromasia.
Mtodo de plata y oro:
E Mtodo muy popular a fines del siglo XIX.
E Ocasionalmente se lo usa para demostrar estructuras finas (prolongaciones
celulares, placas motoras, uniones intercelulares).
E Coloracin: negra, marrn o dorada.
Alumbre de cromo / hematoxilina:
+ Mtodo raramente empleado y similar al de H-E.
+ Ncleos de color azul; citoplasma de color rojo.
+ Se tien las clulas secretoras de glucagn del
pncreas en rosa y las secretoras de insulina en
azul.
Mtodo de azul de isamina /eosina:
Tambin similar al de H-E; el componente azul es
ms intenso.
Mtodos de Nissl y de azul de metileno:
Tcnicas que emplean colorante bsico para teir el
retculo endoplsmico rugoso de las neuronas.
El RER en grumos es llamado sustancia de Nissl.
Mtodo de Sudan negro y osmio:
Tien estructuras que contienen lpidos (como la mielina) de color negro-pardo.
Una variacin tie los lpidos de color rojo.
Corte congelado de tejido adiposo, teido con
rojo Sudn para los lpidos de los adipositos.
Coloracin tricrmica de Mallory:
Utiliza varios colorantes, todos cidos
tien distintas estructuras tisulares.
Se desconoce el fundamento qumico de
la unin entre los colorantes y los
componentes tisulares debido a la no
especificidad de estos mtodos.
Se obtienen interesantes observaciones
de los tejidos.
Fotomicrografa de la cpsula de un rgano coloreado por el mto-
do de Mallory. Se observa una tincin selectiva; las numerosas
fibras colgenas del tejido conectivo, se colorean de azul intenso.
Mtodo de Feulgen:
Mtodo especfico para la
determinacin
histoqumica de DNA,
sobre la base del
contenido de desoxirribosa
en el DNA.
Se eliminan los grupos
purnicos del DNA por
medio de una hidrlisis
cida suave. De esta
manera se abre el anillo
de la desoxirribosa y se
forma un grupo aldehdo,
que reacciona con el
reactivo de Schiff, con
aparicin del color rojo
caracterstico en el sitio
que corresponde al DNA.
Fotomicrografa de un preparado del extremo de la raz de
la cebolla, teida con el mtodo de Feulgen, especfico para
DNA, ya que solo se tie de rojo, la cromatina del ncleo
que contiene DNA.
LA METACROMASIA:
Cuando se tien ciertos componentes tisulares, como por ejemplo, la
matriz cartilaginosa, con el colorante azul de toluidina, se modifica el color
azul a prpura o rojo violceo por unin con el tejido;
Los colorantes capaces de sufrir esta transformacin se denominan
colorantes metacromticos;
Pertenecen a este tipo de agentes ciertos colorantes bsicos, de los cuales
los ms importantes son los derivados tiaznicos azul de toluidina y tionina.
Fotomicrografa de un corte de trquea teido con hematoxilina-
eosina, que muestra un ejemplo de metacromasis. La ancha zo-
na, intensamente rojo violcea de la mitad inferior de la imagen
es cartlago hialino, cuya sustancia basal se tie por metacroma-
sia.
01. ( ) Las tcnicas histolgicas permiten el estudio de las piezas anatmicas.
02. ( ) Fijar una muestra quiere decir aplicar las coloraciones adecuadas de acuerdo a lo que
se quiere observar.
03. ( ) De los colorantes que se emplean en el laboratorio de histopatologa, uno es cido
para los elementos nucleares y otro es bsico para los elementos citoplasmticos.
04. ( ) La tcnica de radioautografa permite que el MO tenga un poder de resolucin de una
micra y el ME de 0,1 micras.
05. ( ) Al igual que la tcnica de Van Gieson, la coloracin tricrmica de Masson se emplea
mejor, para ver los tejidos conectivos.
06. ( ) La principal caracterstica de los colorante metacromticos es que son aquellos que
principalmente se emplean para colorear las grasas.
07. ( ) Aclarar una muestra de tejido es reemplazar el agua del tejido con parafina lquida.
08. ( ) Entre tantos mtodos de coloracin existentes, en el caso de la coloracin tricrmica
de Mallory no se conoce el fundamento qumico de unin entre colorantes y
componentes tisulares.
09. ( ) El tomar una pequea muestra para estudio histolgico se lo puede hacer por
necropsia o por biopsia.
10. ( ) El criostato lo es a la tcnica de congelacin, como el micrtomo lo es a la tcnica de
la parafina.
11. ( ) La reaccin del cido perydico de Schiff tie carbohidratos complejos de un color
magenta oscuro.
12. ( ) Una gran cantidad de tcnicas de coloracin pintan los hemates de naranja o rojo.
01. V
02. F (es endurecer el tejido y detener la degeneracin postmortem)
03. F (el cido es para el citoplasma y el bsico para el ncleo)
04. V
05. V
06. F (la principal caracterstica de ellos es que al emplear una coloracin especfica,
los tejidos cambian a otra coloracin)
07. F (aclarar es eliminar el alcohol e incluir parafina en su reemplazo; reemplazar el
agua con parafina es deshidratar la muestra, para lo cual se emplea alcohol)
08. V
09. V
10. V
11. V
12. V
Tcnicas de observacin
Permite identificar:
El sitio exacto de la clula donde se sintetiza un producto;
Los componentes qumicos que lo forman;
Los desplazamientos de la sustancia dentro de la clula; y,
Las localizaciones del organismo despus de salir de la clula.
Una de las ms empleadas actualmente es la RADIOAUTOGRAFA.
Se basa en dos principios fundamentales: en una radiacin
ionizante y en un precursor biolgico con marca radiactiva.
Radiacin ionizante tiene el mismo efecto sobre una emulsin
fotogrfica que la luz visible.
Marca radiactiva es el reemplazo de un tomo de una molcula
determinada por su istopo radiactivo correspondiente.
El producto radiactivo inyectado a un animal, finalmente
se transformar en una sustancia que ir a formar parte
de los tejidos que requieren de l y, con una
coloracin especial se observa dichos tejidos.
Se puede obtener un poder de resolucin de una micra con el MO y
de 0,1 micras con el ME.
Una importante aplicacin, es el marcado de ncleos
celulares y por ende el estudio de la histognesis (desarrollo
de clulas embrionarias indiferenciadas a clulas
especializadas de un tejido).
LA MICROSCOPA
Tcnica para observar materiales diminutos utilizando un microscopio.
Basados en el microscopio comn se han desarrollado varios tipos
de microscopios:
Simple,
ptico o compuesto,
De campo oscuro,
De contraste de fases,
De interferencia,
De luz polarizada,
De fluorescencia (o de inmunofluorescencia),
De barrido confocal,
De luz ultravioleta,
Operatorio,
Esterescpico,
Polarizante,
De reflexin,
De rayos X,
Microscopio electrnico.
MICROSCOPIO SIMPLE:
Lente de aumento muy potente, provisto de un sostn que
permite mantenerlo cmodamente de modo que se observe
sobre una platina agujereada (de modo que pueda ser
iluminada desde debajo por un espejo inclinable) una
preparacin colocada en la platina.
El microscopio ptico (MO)
Partes mecnicas:
OEl pie o estativo, formacin pesada que proporciona estabilidad al
aparato, y de la cual sube el brazo, en cuyo extremo superior se
encuentran el tubo ptico con el sistema de lentes y el ocular.
OEl tubo ptico termina en el sistema de revlver de cuatro lentes
objetivos.
ODe la parte inferior del brazo y por debajo del tubo ptico, nace la
platina, movible de acuerdo a las necesidades baja o sube cuando
se acciona el tornillo macromtrico, o se desplaza a uno u otro lado
para precisar el enfoque, cuando se acciona el tornillo micromtrico; en
la parte media presenta un orificio para el paso de la luz emitida por
una lmpara situada en el pie o estativo.
OPor debajo del condensador, hay un filtro llamado diafragma, que al
abrirlo y cerrarlo regula el paso de la luz.
Componentes pticos:
Tres sistemas de lentes: condensador, objetivo y ocular.
El condensador concentra el haz de luz que ilumina el objeto estudiado.
El objetivo aumenta el objeto y proyecta la imagen sobre el ocular.
El ocular aumenta aun ms la imagen y la proyecta sobre la retina del ojo del
observador.
El objetivo est constitudo por un conjunto de
lentes situados en el extremo inferior del tubo
ptico y accionados por un sistema de revolver,
lo cual permite cambiarlos a voluntad. Existen
cuatro tipos de lentes, denominados
respectivamente 4 X, 10 X, 40 X y de inmersin
(de 100 X y que para utilizarlo se requiere de
una gota de aceite de cedro, colocada en el
portaobjetos sobre el espcimen), de acuerdo al
poder de cada uno.
Por debajo de la platina, se encuentra una lente llamada condensador,
destinado a concentrar los rayos luminosos a travs el orificio de la platina.
Esquema de un microscopio ptico: (1) ocular, (2) posi-
cin del ojo del observador, (3) portaobjetivos en revl-
ver, (4) objetivo, (5) platina portaobjetos, (6) condensa-
dor, (7) regulacin del condensador, (8) colector, (9) lm-
para, (10) base, (11) regulacin macromtrica, (12) regu-
lacin micromtrica.
El aumento total resultante del microscopio se determina en
dimetros con la letra X mediante el producto del aumento del
objetivo por el aumento del ocular (eventualmente se debe
multiplicar por un factor que depende del tubo); as por
ejemplo, el empleo del objetivo de 10 X y del lente de 10 X,
dar un aumento total de 100 X (10 x 10).
Sobre la platina y por encima de su orificio, se colocan unas
l-minas de vidrio llamadas portaobjetos, unas laminillas ms
delgadas cubreobjetos - cubren el preparado. El portaobjetos
es sujetado por unas pinzas que le aseguran a la misma
platina.
El poder de resolucin: distancia mnima que debe existir entre dos puntos
del objeto para que se visualicen separados.
La calidad de una imagen (claridad y riqueza de detalles) depende del poder de
resolucin de un microscopio.
El poder de resolucin depende de la longitud de onda de la luz
utilizada y de las aberturas numricas del objetivo y del condensa-
dor (el ocular slo acta aumentando la imagen del objetivo, no me-
jora el poder de resolucin). El mximo poder de resolucin que se
puede obtener es de 0,2 , pero con los preparados de rutina habi-
tuales rara vez se excede de 0,5 .
Existe una relacin inversa entre la longitud de onda de la luz empleada por un
microscopio y el poder de resolucin del mismo.
El microscopio de campo oscuro
(MCO)
Utilizado para analizar partculas pequeas, que presentan muy
escaso contraste con la microscopia ptica o que se encuentran en
el lmite del poder de resolucin o por debajo de ste;
Se emplea un condensador especial, el cual impide que llegue luz
directa al objetivo;
Imgenes se observan luminosas sobre un fondo oscuro (del mismo
modo que las partculas de polvo se visualizan por la dispersin que
realizan de la luz de un rayo de sol);
En histologa se utiliza para identificar a la espiroqueta de la sfilis, el
Trepone-ma pallidum.
Aspecto microscpico de polen de Lilium
candidum observado con MCO.
El microscopio de contraste de fases
Se basa en las propiedades fsicas de la luz;
Las ondas luminosas difieren por la longitud que condiciona el color, por la amplitud y
por la fase;
Longitud) luz azul, longitud de onda inferior a la luz roja;
Amplitud intensidad de la luz (mayor amplitud mayor intensidad);
Luz que atraviesa un tejido no coloreado es reducida de intensidad;
Diversa composicin de tejidos determinan diferentes caminos de los rayos luminosos
adopten diversas fases;
Con el MCF diferentes fases diferentes luminosidades permiten preciar detalles
Es posible transformar en visibles componentes de las clulas vivas que, de otra mane-
ra, slo se observaran en tejidos muertos y teidos
Fibroblastos; derecha con MCF.
El microscopio de interferencia
Funcionamiento basado en MCF;
MCF instrumento cualitativo, MI es posible
obtener datos cuantitativos;
Diferencias de intensidad sirven para medir ndice de
refraccin y grosor de preparaciones histolgicas.
Clula pilosa del odo medio captada con MDI.
El microscopio de luz polarizada
Luz polarizada plana, luz que slo vibra en un plano.
Los componentes cristalinos y fibrosos del material biolgico poseen una
orientacin caracterstica de las molculas.
Cuando se ilumina un objeto con esta luz, se divide en dos componentes
con distinta velocidad, es decir, desfasados entre s. Se habla de
estructuras birrefringentes o anistropas.
La birrefringencia de un objeto depende de una estructura regular
determinada. En las clulas y los tejidos puede ser una disposicin
asimtrica regular de molculas o iones.
En consecuencia, mediante el microscopio de luz polarizada es posible
obtener informacin respecto a la estructura a nivel molecular.
Mire ejemplo
Microfotografa de cristales de cido peridico, observados con microscopio de
luz polarizada.

Cristales de Vit. B observados con al
microscopio con luz polarizada.
El microscopio de fluorescencia
Florescencia fenmeno determinadas sustancias absorben ener-
ga radiante de determinada long de onda y emiten luz con diferente
long de onda y mayor que la absorbida;
Algunos componentes biolgicos (la vitamina A) tienen fluorescencia
natural y se denominan autofluorescentes, mientras que otros ad-
quieren la fluorescencia despus de un tratamiento con determina-
dos colorantes fluorescentes, por ejemplo fluorescena, que emite
una intensa fluorescencia verdosa al ser irradiada con luz azul;

En el microscopio de fluorescencia se ilumina el preparado con
intensa luz de la longitud de onda capaz de activar el colorante
fluorescente empleado;

Se utiliza en campo inmunolgico (enfermedades autoinmunes).
Mire ejemplo
Las estructuras fluorescentes se destacan
en color sobre fondo oscuro como fuentes
luminosas;
Es posible visualizar estructuras de
dimensiones mucho ms pequeas que el
poder de resolucin del microscopio
comn.
Neurona de retina captada con MDF.
El microscopio de barrido confocal
Limitacin de la microscopia de fluorescencia radica en
la necesidad de que todo el espesor del preparado emita
fluorescencia;
Luz emitida por fluorescencia desde zonas del
preparado ubicadas por encima y por debajo del plano
focal puede restar nitidez a la imagen;
Con microscopio de barrido confocal se impide esta
tendencia, dado que se excluye la luz no emitida por el
plano focal;
Preparado se ilumina por un rayo lser que barre todos
los puntos del plano focal;
Se logra obtener la informacin necesaria para formar
una imagen bidimensional, que se registra sobre una
pantalla de televisin;
Al recoger con una computadora una serie de imgenes
de distintos planos focales es posible reconstruir una
imagen tridimensional del objeto.
Clulas productoras de insulina
captadas con MBC.
El microscopio de luz ultravioleta
; Con el empleo de luz ultravioleta con longitud de onda de alrededor
de 250 nm (casi la mitad de la luz visible que se utiliza habitualmente
en el microscopio ptico), es posible duplicar el poder de resolucin;
; El microscopio de luz ultravioleta, cuyo sistema ptico suele estar
construdo en cuarzo, permite el paso de la luz ultravioleta, que es
invisible;
; La formacin de la imagen se registra en una pelcula fotogrfica;
; Principal importancia del microscopio de luz ultravioleta: cidos
nucleicos absorben la luz ultravioleta se pueden detectar con
facilidad.
Microscopa electrnica
CEl microscopio electrnico representa un verdadero logro en cuanto a
incrementos del aumento y del poder de resolucin;
CSe reemplaza la luz visible, de longitud de onda de alrededor de 500
nanmetros, por un haz de electrones de longitud de onda del orden
de 0,005 nanmetros;
CComo los electrones no pueden atravesar las lentes de vidrio, es
necesario reemplazarlas por bobinas electromagnticas
(denominadas lentes electromagnticas), en cuyos campos
electromagnticos o electrostticos modifican el trayecto del haz de
electrones.
Se han inventado varios tipos de ME vamos a
analizar dos:
ME de transmisin; y,
ME de barrido.
El microscopio electrnico de transmisin (MET):
ME en vez de los rayos luminosos utiliza haces de
electrones producidos por un filamento incandescente;
Electrones llevan cargas negativas y pueden por tanto ser
refractados o concentrados por lentes electromagnticas;
Cortes ultrafinos obtenidos se colorean con una solucin
que contenga tomos pesados tetrxido de osmio;
Se pueden alcanzar aumentos de orden de 100.000-200.000
se pueden distinguir dos puntos que se encuentren a la
distancia de 5-10 millonsimas de milmetros.
Desventajas:
Electrones son absorbidos muy fcilmente por la materia;
Electrones no pueden recorrer en el aire ninguna distancia til, son
detenidos por las molculas del aire es preciso hacer el vaco ms
absoluto;
Muestras a examinar al microscopio electrnico deben colocarse en
soportes especiales;
Las muestras biolgicas deben ser extraordinariamente delgadas;
Tcnica de la coloracin negativa no es utilizable en muchas muestras.
Representa uno de los ltimos progresos ya que permite conseguir una
imagen de la muestra biolgica en tres dimensiones;
Haz de electrones producido es concentrado por un sistema de lentes
electromagnticas;
Haz muy fino (primario) cepilla, barre superficie del objeto en una
fraccin de segundo;
Impacto de los electrones del haz primario sobre la superficie en examen
induce la emisin de electrones secundarios son recogidos por un
sistema de revelado y transformados en seales elctricas;
Seales son amplificadas por un aparato apropiado y enviadas a un tubo
de rayos catdicos;

Inconveniente: slo se pueden alcanzar los 100.000 aumentos.
El microscopio electrnico de barrido (MEB):
IMGENES OBTENIDAS CON ME (1)
Muestras del inmenso poder de apreciacin que se puede tener con
el ME. Izquierda: clula cancergena entre glbulos rojos de la san-
gre humana; derecha: bacteria de la cavidad oral.
IMGENES OBTENIDAS CON ME
Izquierda: aspecto microscpico de la estructura trilaminar de la
membrana del pulmn humano (250.000X); derecha: virus
bacterifagos teidos negativamente con acetato de uracilo.
IMGENES OBTENIDAS CON ME (2)
01. ( ) El microscopio ptico est formado por piezas mecnicas y por partes pticas.
02. ( ) En el MO, la platina se encuentra entre el tubo ptico y la fuente de luz.
03. ( ) El portaobjetos es asegurado en la platina por una pinzas que dependen del
estativo.
04. ( ) La luz polarizada permite obtener informacin de la estructura molecular de las
sustancias.
05. ( ) El microscopio de reflexin puede funcionar con radiaciones de cualquier longitud
de onda y por lo tanto, lograr poderes de resolucin bastante grandes.
06. ( ) En el microscopio electrnico, el campo electrosttico puede alterar las
caractersticas del haz de electrones que se produce.
07. ( ) La distancia mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que ellos se
visualicen separados, se llama longitud de onda.
08. ( ) La diferencia entre un microscopio comn y uno de campo oscuro, es que ste
ltimo utiliza un condensador especial que impide que llegue la luz directa al
objetivo.
09. ( ) El microscopio de barrido confocal ya no requiere del uso de la fluorescena.
10. ( ) El objetivo del MO concentra el haz de luz y permite ver al objeto con el ocular.
11. ( ) Adems de otros factores, el aumento del lente ocular tambin se toma en cuenta
para determinar el poder de resolucin de un microscopio.
12. ( ) La fluorescencia es el fenmeno que permite absorber energa radiante de
determinada longitud de onda y volver a emitir luz con menor longitud de onda que
la absorbida.
CUESTIONARIO (2)
IMGENES OBTENIDAS CON ME
01. V
02. V
03. F (las pinzas estn en la misma platina)
04. V
05. V
06. V
07. F (se llama poder de resolucin)
08. V
09. V
10. F (el objetivo aumenta el objeto y proyecta su imagen sobre el ocular)
11. F (solo se toma en cuenta la longitud de onda de la luz empleada y las aberturas
del objetivo y del condensador)
12. F (la luz que se vuelve a emitir es mayor que la absorbida)
RESPUESTAS:
IMGENES OBTENIDAS CON ME
01. ( ) Los aparatos y sistemas son producto de la formacin de tejidos y rganos.
02. ( ) La obstetricia y la ginecologa se relacionan con la histolgica ya que la
comprensin de los estados patolgicos, de la fisiologa normal y de los
tratamientos cientficos que se puedan aplicar a las estructuras anatmicas
femeninas se entienden mejor por el estudio microscpico de ellas.
03. ( ) La esplacnologa es el estudio de los distintos aparatos y sistemas del
cuerpo.
04. ( ) La histologa se relaciona con la histopatologa, toda vez que para poder
apreciar los estudios anormales, se hace indispensable el conocimiento de los
estudios normales.
05. ( ) El microscopio ptico est formado por piezas mecnicas y por partes
pticas.
06. ( ) En el MO, la platina se encuentra entre el tubo ptico y la fuente de luz.
07. ( ) El portaobjetos es asegurado en la platina por una pinzas que dependen del
estativo.
08. ( ) La luz polarizada permite obtener informacin de la estructura molecular de
las sustancias.
09. ( ) El microscopio de reflexin puede funcionar con radiaciones de cualquier
longitud de onda y por lo tanto, lograr poderes de resolucin bastante grandes.
10. ( ) En el microscopio electrnico, el campo electrosttico puede alterar las
caractersticas del haz de electrones que se produce.
CUESTIONARIO:
IMGENES OBTENIDAS CON ME
11. ( ) La distancia mnima que debe existir entre dos puntos del objeto para que
ellos se visualicen separados, se llama longitud de onda.
12. ( ) La diferencia entre un microscopio comn y uno de campo oscuro, es que
ste ltimo utiliza un condensador especial que impide que llegue la luz directa al
objetivo.
13. ( ) El microscopio de barrido confocal ya no requiere del uso de la
fluorescena.
14. ( ) El objetivo del MO concentra el haz de luz y permite ver al objeto con el
ocular.
15. ( ) Adems de otros factores, el aumento del lente ocular tambin se toma en
cuenta para determinar el poder de resolucin de un microscopio.
16. ( ) La fluorescencia es el fenmeno que permite absorber energa radiante de
determinada longitud de onda y volver a emitir luz con menor longitud de onda
que la absorbida.
17. ( ) Las tcnicas histolgicas permiten el estudio de las piezas anatmicas.
18. ( ) Fijar una muestra quiere decir aplicar las coloraciones adecuadas de
acuerdo a lo que se quiere observar.
19. ( ) De los colorantes que se emplean en el laboratorio de histopatologa, uno es
cido para los elementos nucleares y otro es bsico para los elementos
citoplasmticos.
CUESTIONARIO:
IMGENES OBTENIDAS CON ME
20. ( ) La tcnica de radioautografa permite que el MO tenga un poder de
resolucin de una micra y el ME de 0,1 micras.
21. ( ) Al igual que la tcnica de Van Gieson, la coloracin tricrmica de Masson se
emplea mejor, para ver los tejidos conectivos.
22. ( ) La principal caracterstica de los colorante metacromticos es que son
aquellos que principalmente se emplean para colorear las grasas.
23. ( ) Aclarar una muestra de tejido es reemplazar el agua del tejido con parafina
lquida.
24. ( ) Entre tantos mtodos de coloracin existentes, en el caso de la coloracin
tricrmica de Mallory no se conoce el fundamento qumico de unin entre
colorantes y componentes tisulares.
25. ( ) El tomar una pequea muestra para estudio histolgico se lo puede hacer
por necropsia o por biopsia.
26. ( ) El criostato lo es a la tcnica de congelacin, como el micrtomo lo es a la
tcnica de la parafina.
27. ( ) La reaccin del cido perydico de Schiff tie carbohidratos complejos de un
color magenta oscuro.
28. ( ) Una gran cantidad de tcnicas de coloracin pintan los hemates de naranja
o rojo.
CUESTIONARIO:
IMGENES OBTENIDAS CON ME
01. V
02. V
03. F (lo es de los rganos)
04. V
05. V
06. V
07. F (las pinzas estn en la misma platina)
08. V
09. V
10. V
11. F (se llama poder de resolucin)
12. V
13. V
14. F (el objetivo aumenta el objeto y proyecta su imagen sobre el ocular)
15. F (solo se toma en cuenta la longitud de onda de la luz empleada y las aberturas
del objetivo y del condensador)
16. F (la luz que se vuelve a emitir es mayor que la absorbida)
17. V
18. F (es endurecer el tejido y detener la degeneracin postmortem)
19. F (el cido es para el citoplasma y el bsico para el ncleo)
20. V
RESPUESTAS:
IMGENES OBTENIDAS CON ME
21. V
22. F (la principal caracterstica de ellos es que al emplear una coloracin especfica,
los tejidos cambian a otra coloracin)
23. F (aclarar es eliminar el alcohol e incluir parafina en su reemplazo; reemplazar el
agua con parafina es deshidratar la muestra, para lo cual se emplea alcohol)
24. V
25. V
26. V
27. V
28. V
RESPUESTAS: