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Introduo Cromatografia

Prof Dr Leila Ribeiro


Mtodos Instrumentais de Anlises
Tcnica utilizada para analisar, identificar ou separar os componentes de uma
mistura. A Cromatografia definida como a separao de dois ou mais compostos
diferentes por distribuio entre fases, uma das quais estacionria e a outra
mvel.

Esta separao depende da diferena entre o comportamento dos analitos entre a
fase mvel e a fase estacionria.

A interao dos componentes da mistura com estas duas fases influenciada por
diferentes foras intermoleculares, incluindo inica, bipolar, apolar, e especficos
efeitos de afinidade e solubilidade.
(grego) kroma [cor] + graph [escrever]
Classificao da
Cromatografia























Tcnica em que os componentes de uma mistura se separam de acordo com as
velocidades s quais so transportados por uma fase mvel atravs de uma fase
estacionria


Fase mvel (eluente)
fase que se move (gs de arraste)

gs - cromatografia em fase gasosa GC
lquido - cromatografia em fase lquida LC


Fase estacionria
fase fixa (em coluna ou em superfcie plana)
normalmente um slido ativo pode ser um lquido depositado
num suporte slido inerte (GC)

eluio
processo de passagem atravs da fase estacionria (por ao da fase mvel)
Cromatografia
A amostra transportada por uma corrente
de gs atravs de uma coluna empacotada
com um slido recoberta com uma pelcula
de um lquido.

O mtodo consiste primeiramente na
introduo da mistura de prova ou amostra
em uma corrente de gs inerte,
normalmente hidrognio, hlio, nitrognio
ou argnio, que atuaro como gs de
arraste.

As amostras lquidas vaporizam-se antes da
injeo no gs de arraste.
CROMATOGRAFIA GASOSA
O fluxo de gs passa pela coluna empacotada atravs da qual os
componentes da amostra se deslocam a velocidades influenciadas pelo grau
de interao de cada componente com a fase estacionria no voltil.
As substncias que tm a maior
interao com a fase estacionria so
retidas por mais tempo e, por tanto,
separadas daquelas de menor interao.
medida que as substncias
eluem da coluna, podem ser
quantificadas por um detector e/ou
tomadas para outra anlise.
Os sistemas de injeo mais comuns
para a introduo de amostras de gs
so vlvula amostradora e seringa.
TIPOS DE DETECTORES
Dispositivo que indica e quantifica os componentes separados pela coluna

DETECTOR POR CAPTURA DE ELTRONS (DCE OU ECD)
Supresso de corrente causada pela absoro de eltrons por eluatos
altamente eletroflicos.


DETECTOR POR CONDUTIVIDADE TRMICA (DCT OU TCD)
Variao da condutividade trmica do gs de arraste.


DETECTOR POR IONIZAO EM CHAMA (DIC OU FID)
ons gerados durante a queima dos eluatos em uma chama de H2 + ar.
Sistema de Injeo de Amostra
Os sistemas de injeo mais comuns para a introduo
de amostras de gs em seringa.


As amostras gasosas e lquidas podem ser
injetadas com uma seringa.

Na forma mais simples a amostra
injetada primeiro em uma cmara
aquecida, onde se evapora antes de ser
transferida para a coluna.
As molculas do soluto
transportadas pela fase mvel
tm tempos de reteno
diferentes de acordo com os
respectivos graus de adsoro
na fase estacionria.


O tempo de reteno ou tempo
estequiomtrico, t
r
, o tempo
que decorre entre o ponto de
injeco at meia eluio
(mximo do pico).
Representao de um Cromatograma
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30
Time, min
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30
Time, min
Cromatograma de 80 substncias
(frmacos, drogas de abuso e
praguicidas)
Morfina
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Time, min
5.62
286.1/152.1
286.1/165.2
Morfina
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Time, min
5.62
286.1/152.1
286.1/165.2
1.0e3 cps.
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
Time, min
1.44
19.01 13.84
Paracetamol
Lidocaina
Carbamazepina
Cocaina
Zolpidem
Citalopram
Amitriptilina
Medazepam
Nicotina
Amostra sangue total de indivduo
poli-intoxicado
Ou PC, do ingls "paper chromatography

uma tcnica de partio, utiliza dois lquidos, ou
misturas de lquidos, um atuando como fase mvel
(eluente) e outro, suportado sobre papel, atuando
como fase estacionria.

Ocorre a reteno das substncias devido s
diferentes afinidades para com as fases
estacionria e mvel. A origem dessa denominao
prende-se ao fato de que, inicialmente, essa
tcnica era empregada apenas na separao dos
componentes de materiais coloridos

Utiliza-se papel normal ou papel de filtro (mais
utilizado) como suporte da fase estacionria.
Cromatografia em Papel (CP)
Cromatografia Camada Delgada CCD

Cromatografia planar, tambm chamada de camada fina, ou TLC ("Thin Layer
Chromatography")
Mtodo rpido (20-40 min.)
Uso de diversos agentes cromognicos
Maior sensibilidade que Cromatografia de Papel (10
-9
g)
Grande gama de compostos pode ser analisada
Mtodo simples e barato
F.M. - sistema de solventes
F.E - Adsorventes (slica, alumna, celite, amido)
Mtodos de deteco: fsico-qumicos
Princpio: Adsoro (polaridade)
Utiliza-se uma coluna de vidro aberta na parte
superior e munida de uma torneira na
extremidade inferior, por onde sai o lquido
(eludo).

Dentro da coluna encontra-se a fase
estacionria constituda por um enchimento
slido no caso da cromatografia de adsoro,
ou por uma fase lquida no caso da
cromatografia de partio.

A fase mvel lquida em ambos os casos.
Cromatografia em Coluna
Cromatografia Lquida De Alta Eficincia HPLC
(CLAE, em ingls: High Performance/Pressure Liquide Chromatography, HPLC)
Se distingue por usar a fase mvel alta presso (da o "pressure" da sigla em
ingls).
O uso de presses elevadas permite uma reduo no dimetro das partculas da
fase estacionria promovendo uma separao mais eficiente dos componentes da
amostra
Os componentes de um cromatgrafo lquido
so: bomba, coluna cromatogrfica, detector
e o registrador.
um mtodo utilizado para separao de
espcies inicas ou macromolculas e
compostos termolbeis (compostos que
decompem com o efeito da temperatura).
RESUMO
Espectrometria de
Massas
A espectrometria de massa um mtodo
para identificar os diferentes tomos que
compe uma substncia.

Um espectrmetro de massa bombardeia
uma substncia com eltrons para produzir
ons, ou tomos eletricamente carregados

Os ons atravessam um campo magntico
que curva suas trajetrias de modos
diferentes, dependendo de suas massas.
Espectrometria de Massas
O campo separa os ons em um padro chamado espectro de massa. A
massa e a carga dos ons podem ser medidas por sua posio no espectro.

Os cientistas identificam assim os elementos e istopos presentes na
amostra.
Inlet
Ionizao
Analyzer
Analisador/Filtro de MASSA
Ion Detection
Detector
Interpretao
dos resultados
Source
+
Introduo da Amostra
Molculas estado de vapor (gasoso)
Slido
Lquido
Vapor
Deteco dos
ons
Gerao de ons
(molculas carregadas)
Separao dos ons atravs
da massa/carga (m/z)
Espectro de Massa
Espectrometria de Massas
AULA PRTICA:

Cromatografia Camada Delgada CCD

Anlise Cromatogrfica de Pigmentos
Avaliar a separao de pigmentos pela tcnica da CCD.

Estudar o emprego de tcnicas cromatogrficas para separao e anlise de
substncias em funo de sua estrutura qumica e do fenmeno de adsoro
cromatogrfica.
O parmetro mais importante a ser considerado em CCD o fator de
reteno (R
f
), o qual a razo entre a distncia percorrida pela
substncia em questo e a distncia percorrida pela fase mvel.

Os valores ideais para R
f
esto entre 0,4 e 0,6.
mvel fase pela percorrida distncia
substncia pela percorrida distncia

f
R
COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos
cromatogrficos. 5 ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993.

LOUGH, W.J. e WAINER, I.W. High Performance liquid chromatography:
fundamental principles and practice. Blackie Academic and Professional, 1995.

CHAVES, M.H.; Anlise de extratos de plantas por CCD: uma metodologia
aplicada disciplina Qumica Orgnica. Qumica Nova, v. 20, n. 5, p. 560-
562, 1997.

ANDRADE, J.B.; PINHEIRO, H.L.C.; LOPES, W.A.; MARTINS, S.; AMORIM,
A.M.M. e BRANDO, A.M. Determinao de cafena em bebidas atravs de
cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE). Qumica Nova, v. 18, n. 4, p.
379-381, 1995.

NETO, F.R.A.; CGAR em anlise de resduos. Qumica Nova, v. 18, n. 1, p.65-67,
1995.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS