Cocos Gram Negativo

Neisseria spp
M. Paz
Microbiologa UMG-2014
Familia Neisseriaceae
Gneros
Neisseria
Patgenos humanos
Kingella
Eikenella
Simonsiella
Alysiella
Gnero Neisseria
nico reservorio: ser humano
Dos especies patgenas
N. gonorrhoeae
Gonorrea
N. meningitidis
Meningitis epidmica/meningitis meningocccica
Muchas especies no patgenas habitantes
del tracto respiratorio.
Gnero Neisseria
Neisser (1879)
Describi al agente causal de la gonorrea
Leistikow & Loeffler (1882)
Cultivo por primera vez
Weichselbaum (1887)
aisl a N. meningitidis de LCR de un paciente
con meningitis purulenta
endmica, epidmica y meningococcemia
estado de portador

Gnero Neisseria: Morfologa
Aerobios
Cocos Gram Negativo
No mviles
Crecen en parejas
No formadores de esporas
Los cocos individuales son pequeos (0.8 x 0.6
m)
Tienen forma de rin (lados planos adyacentes)
Citoplasma y pared celular son similares entre
las dos especies y similitud de ADN de 70%

Gnero Neisseria: Morfologa
Pared celular: tiene una capa densa y una
membrana externa
Meningococos: tienen cpsula de polisacridos
y pocos plsmidos
Gonococos: no cpsula y s contienen
plsmidos
Ambas especies forman colonias convexas,
brillantes y mucoides de 1-5 mm.
Medios de crecimiento: agar chocolate y CO
2
al
5%
Caractersticas de cultivo
Crecen mejor en condiciones aerbicas.
La mayora oxidan carbohidratos, producen
cido pero no gas.
Producen oxidasa.
Susceptibles a cidos grasos y a metales traza
contenidos en la peptona y en el agar (se
contrarresta con sangre, suero, almidn o
carbn)
El agar chocolate es ms adecuado
Caractersticas de cultivo
Baja Resistencia a condiciones fsicas y qumicas
Sufren autlisis
Susceptibles a desecacin
Oxidasa (+)
Oxidan rpidamente DPD o TPD (dimetil o
tetrametil para fenilendiamina)
Produce un color de rosado a negro en las colonias


Gnero Neisseria: Metabolismo
Organismo Crece en agar
sin sangre
Crece a
22C
Oxida
Glucosa
Oxida
Maltosa
Oxida
Sacarosa
N.
meningitidis
- - + + -
N.
gonorrhoeae
- - + - -
Neisseria meningitidis
Neisseria meningitidis
Usualmente habita en la nasofaringe sin
causar sntomas (microbiota transitoria)
Desde la nasofaringe acceden a la sangre
y causan meningococcemia
Complicacin: meningitis
Meningococcemia grave: fulminante,
fiebre elevada y exantema hemorrgico,
CID y colapso circulatorio (Waterhouse-
Friderichsen)



Mediada por los pili
Colonizacin especfica de receptor de las clulas
no ciliadas de la nasofaringe
Cpsula antifagoctica de polisacrido que le
permite diseminarse en ausencia de inmunidad
especfica.
Efectos txicos mediados por hiperproduccin
de lipooligosacrido
Serogrupos A, B, C, Y, W135 responsables de 90% de
todas las infecciones
Patogenicidad y virulencia de
N. meningitidis
Receptores para las fimbrias bacterianas (ganglisido GD1)
sobre las clulas columnares epiteliales no-ciliadas en la
nasofaringe del hospedero.
Los m.o. son internalizados en vacuolas fagocticas,
evitando la muerte intracelular.
Replicacin intracelular y migracin al espacio subepitelial
donde libera fragmentos de membrana.
Hiperproduccin de endotoxina (lpido A) y se disemina
al ambiente circundante (espacios subepiteliales, torrente
sanguneo): causa la mayora de manifestaciones clnicas
de dao vascular: dao endotelial, vasculitis, trombosis,
CID.
Patogenicidad y virulencia
Epidemiologa
Diseminacin persona-persona va aerosolizacin de
secreciones respiratorias
Ms alta incidencia en nios menores de 5 aos,
personas institucionalizadas y pacientes
inmunodeficientes
Meningitis y meningococcemia: serogrupos B y C
Neumona: serogrupos Y y W135
Infecciones en pases subdesarrollados: serogrupo A
Mayor incidencia en las pocas fras y secas del ao en
todo el mundo (Se presenta en ondas)

Diagnstico
Muestras: LCR, sangre y aspirados petequiales
Frote de Gram: difcil cuando hay pocos m.o
(centrifugar y obtener sedimento para la tincin)
Cultivo: en agar chocolate o TM en jarra con
candela a 37C
Identificacin: Oxidasa y pruebas de oxidacin
de carbohidratos

Cultivo
Medio selectivo de Thayer Martin
Agar chocolate con Vancomicina (inhibe a Gram +),
Colistina (inhibe a Gram -), Nistatina (inhibe hongos)
y Trimetoprim (inhibe a Proteus spp que ocasiona
swarming)
Las colonias requieren 48-72 horas para crecer.

Medio alternativo: Agar Lewis Martin agar
(similar al TM, pero usa anisomicina en lugar
de nistatina, para inhibir mejor a Candida
albicans).

Cultivo en jarra con candela
Cultivo de N. meningitidis
Despus de la diseminacin de
organismos virulentos de la nasofaringe:
Meningitis
Septicemia (meningococcemia) con o sin
meningitis
Meningoencefalitis
Neumonia
Artritis
Uretritis
Enfermedades asociadas con
Neisseria meningitidis
Infecciones por MGC
Sntomas: fiebre alta, escalofros, dolor
muscular y rash petequial (tpico de
infecciones por MGC)
Enfermedad puede ser crnica, moderada
o fulminante.
Tipo fulminante: Sndrome de W-F con CID,
hemorragia dentro de la piel, glndulas
adrenales y otros rganos.
Muerte rpida por la toxemia generalizada y
el shock.
Rash Petequial

Sndrome de Waterhouse-
Friderichsen
Prevencin y Tratamiento
Inmunidad pasiva por lactancia
Droga de eleccin: penicilina
Drogas alternativas: cloranfenicol, ceftriaxona y
cefotaxima.
Quimioprofilaxia para contactos: rifampicina o
sulfadiazina
Inmunoprofilaxia: vacuna (no efectiva para el
serogrupo B)


Prevencin y Tratamiento
Vacunas de polisacrido conjugado para nios
menores de 2 aos (18 meses).
Serogrupos A, C, Y y W-135
No se muy inmunognica ni confiere inmunidad
prolongada
Vacuna conjugada con el toxoide diftrico
Autorizada para 11-55 aos

Neisseria gonorrhoeae
Neisseria gonorrhoeae
nico hospedero natural: humano
Portador asintomtico es el mayor
reservorio.
Edad ms afectada: 15-24 aos
Patogenia: gonorrea
Uretritis
Cervicitis

Fcilmente transmitido por contacto sexual
Diplococos Gram-negativo achatados por el lado de
unin.
Fastidiosos, capnoflicos y susceptibles a temperaturas
fras, a la desecacin y a cidos grasos.
Requiere medios pre-calentados complejos
El medio debe llevar almidn soluble para neutralizar la
toxicidad de los cidos grasos
Crece mejor en atmsfera hmeda suplementada con CO
2

Produce cido de la oxicacin de glucosa, pero no de
otros azcares.
Generalidades de Neisseria
gonorrhoeae
Diagnstico, tratamiento y
prevencin
Tincin de Gram es precisa en muestras masculinas.
Cultivo: diagnstico definitivo
Biologa molecular
Tratamiento: Cefixima, Ceftriaxona, Ciprofloxacina y
ofloxacina en casos no complicados. Penicilina debe
evitarse porque ya se presenta mucha resistencia.
Doxiciclina y Azitromicina en casos complicados con
Chlamydia sp.
Profilaxia de conjuntivitis neonatal: nitrato de plata 1%
Prevencin: educacin (ETS)
NO HAY VACUNA
Crecimiento de GC enMTM
Oxidasa positivo
Prueba de Oxidasa en placa
Prueba de Oxidasa en papel
Identificacin Bioqumica
Para diferenciar entre las especies de
Neisseria y B. catarrhalis.
Pruebas de utilizacin de carbohidratos.
Oxidacin de Carbohidratos
Se usa un Agar Cistina-Triptosa (CTA) con
azcares. Requiere una inoculacin grande e
incubacin sin CO
2
y observacin por 24-72
horas.
Resultados: GC: + para glucosa solamente

Azcares en CTA
Epidemiologa de la Gonorrea
Serio subregistro
Diferencia epidemiolgica entre hombres y
mujeres
Mayor reservorio: portador sintomtico
Transmisin sexual
No hay inmunidad protectora para la reinfeccin
(en parte por la diversidad antignica de las
cepas)
Mayor riesgo de enfermedad diseminada en
pacientes inmunocomprometidos.
Mujeres Hombres
Riesgo post-exposicin (1 contacto) es
de 50%
Riesgo post-exposicin (1 contacto) es
de 20%
Frecuentemente asintomtica y sin dx Mayora: sintomtico (95%)
Principal reservorio es la portadora
asintomtica
Principal reservorio es la portadora
asintomtica
Infeccin genital primariamente en el
cervix, pero tambin son colonizados la
vagina, la uretra y el recto.
Infeccin genital restringida a la uretra
con descarga purulenta y disuria
Infecciones ascendentes en 10-20%:
salpingitis, abscesos tubo-ovricos,
enfermedad inflamatoria plvica,
infertilidad por infeccin crnica.
Complicaciones raras: epididimitis,
prostatitis y abscesos periuretrales.
Infecciones diseminadas ms comunes:
septicemia, infeccin de la piel y
articulaciones (1-3%)
Infecciones diseminadas muy raras
Puede infectar al infante durante el
parto: conjuntivitis, oftalmia neonatorum
Ms comn en hombres
homosexuales/bisexuales que en la
poblacin heterosexual
Bacterias fimbriadas se adhieren al epitelio de la
membrana mucosa intacta
N. gonorrhoeae tiene capacidad de invadir
membranas intactas o piel con abrasiones.
Adherencia al epitelio mucoso
Penetracin y multiplicacin antes de pasar a travs de
las clulas epiteliales de la mucosa
Establecimiento de la infeccin en la capa subepitelial
Sitios ms comunes de inoculacin:
Cervix (cervicitis) o vagina en la mujer
Uretra (uretritis) o pene en el hombre
Patogenia de Neisseria gonorrhoeae
Factores de virulencia asociados a
Neisseria gonorrhoeae
Gonorrea
Ophthalmia neonatorum
Significancia clnica del GC
Infecciones complicadas
Ocurren ms frecuentemente en mujeres
Diseminacin del crvix a las trompas de
falopio
Endometritis
Salpingitis
Peritonitis (EIP)
Ocurre en 10-20% de mujeres infectadas
Sntomas: dolor abdominal bajo, flujo
cervical y vaginal anormal, tero blando.
Puede resultar en infertilidad o en
embarazo ectpico.
Salpingitis
GONOCOCCEMIA
Presencia de N. gonorrhoeae en el
torrente sanguneo que puede llevar al
desarrollo de una infeccin gonocccica
diseminada (IGD).
Ocurre en aprox 0.5-3% de pacientes con
gonorrea.

Manifestaciones clnicas
Cuadro bifsico:
Fase temprana
Tenosinovitis
Artralgias
Dermatitis
Fase localizada
Artritis sptica
Complicaciones: osteomielitis, meningitis,
endocarditis, sndrome de dificultad
respiratoria y shock sptico fatal
Pacientes a riesgo
Mujeres embarazadas o menstruando
Personas con inmunodeficiencias
Deficiencia de complemento
Enfermedad por VIH
Lupus Eritematoso Sistmico
Fisiopatologa
Diseminacin del gonococo desde un sitio
primario como el endocrvix, la uretra, la
faringe o el recto hacia la sangre y luego a
un rgano final.
Usualmente son infectados mltiples sitios
Articulaciones y piel
Depende de cambios fisiolgicos del
paciente y de factores de virulencia del
GC
Cambios fisiolgicos
Cambios en el pH vaginal
Menstruacin
Embarazo
Puerperio
Edad con ms incidencia:
Hombres con 20-24 aos
Mujeres de 15-19 aos
Factores de virulencia
Pili y fimbrias: adherencia a las
superficies mucosas
Evasin de la fagocitosis
Protenas de membrana externa (P1, P2 y
P3)
Lipooligosacrido (LOS): resistencia a la
bacterilisis
Cepas productoras de Proteasas de IgA
ayudan a la supervivencia del GC en las
mucosas
Diagnstico diferencial
Manifestaciones cutneas de hepatitis
Meningococcecia
Artritis reactiva
Artritis psoritica
Sfilis
Dermatitis (acanthosis nigricans)
Diagnstico
Recuento de leucocitos: Leucocitosis
10,000-15,000/L
VSE: medianamente elevada
Cultivo positivo: usualmente de sitios de
mucosas: faringe, uretra, crvix o recto.
Los hemocultivos son negativos en su
mayora (slo 20-30% son +)
Mtodos moleculares (PCR)
Tratamiento
Hospitalizacin para tratamiento inicial
Antibiticos intravenosos por 24-48 horas
Luego se cambia a terapia oral.
Terapia emprica inicial: cefalosporinas de
tercera generacin ceftriaxona-
Cambio a Penicilina G o ampicilina si es
susceptible.

Moraxella catarrhalis
Moraxella catarrhalis
Diplococo gram-negativo
Aerobio y oxidasa positivo
Ha sido objeto tanto de cambios en la nomenclatura y
clasificacin taxonmica como de su consideracin de
comensal o patgeno.
Actualmente, es aceptado como el tercer patgeno ms
importante en el tracto respiratorio humano despus de
Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae.
En los ltimos 20 aos, esta bacteria ha emergido como
un importante patgeno causante de infecciones en el
tracto respiratorio superior de nios y ancianos, e
infecciones del tracto respiratorio inferior en adultos con
enfermedad pulmonar obstructiva crnica (EPOC).
Aproximadamente, el 90% de las cepas son productoras
de -lactamasas.
Moraxella catarrhalis
Micrococcus catarrhalis
Neisseria catarrhalis
En 1970, basndose en la diferencia en el
contenido de cidos grasos y mediante estudios
de hibridacin de ADN se demostr la escasa
homologa que exista entre N. catarrhalis y las
llamadas "verdaderas" especies de Neisseria,
estando, ms cercana al gnero Acinetobacter.
As pues, fue reclasificada y transferida al
gnero Moraxella
Moraxella catarrhalis
Actualmente, el gnero Moraxella engloba cocos
y bacilos cortos relacionados genticamente
Bovre propone su divisin en dos subgneros:
Branhamella, que englobara los cocos y
Moraxella para los bacilos cortos.
Algunos autores prefieren el nombre de
Branhamella catarrhalis
Las otras especies de Moraxella son bacilos cortos,
mientras que M. catarrhalis son diplococos
M. catarrhalis es un importante patgeno del tracto
respiratorio humano, mientras que las especies de
Moraxella rara vez causan infeccin en humanos.
Patogenia de Moraxella catarrhalis
En nios:
Otitis media
Sinusitis
Bacteremia
Meningitis
En adultos:
exacerbaciones en pacientes con EPOC
neumona en ancianos
infecciones nosocomiales.
Factores de virulencia de Moraxella
catarrhalis
LOS (Lpido A)
Peptidoglucano
Protenas de la membrana externa
Fimbrias
Cpsula
Protenas reguladores del hierro
Resistencia al complemento
Diagnstico de Moraxella
catarrhalis
Muestras clnicas: Gram, Cultivo y pruebas bioqumicas
Crece en medios comunes, como agar sangre y agar
chocolate,
Colonias redondas, opacas, convexas y de color gris.
Los criterios ms usados para su identificacin son los
siguientes:
Ausencia de pigmentacin en agar sangre (no hemoltica).
Produccin de oxidasa y catalasa.
Produccin de DNAasa.
Hidrlisis de la tributirina.
Ausencia de produccin de cido a partir de glucosa, maltosa,
sacarosa y fructosa.
Reduccin de nitratos y nitritos.
Tratamiento de Moraxella
catarrhalis
Las cepas de M. catarrhalis son
uniformemente sensibles a las quinolonas,
amoxicilina-clavulnico, cefalosporinas,
ticarcilina, piperacilina, macrlidos,
cloranfenicol y aminoglucsidos.
Se han comunicado casos aislados de
cepas resistentes a las tetraciclinas,
eritromicina, fluoroquinolonas, macrlidos,
piperacilina y a algunas cefalosporinas