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Acta Botanica Brasilica

Ana Carolina Boeno Diniz, Leandro Vieira


Astarita e Eliane Romanato Santarm
Alterao dos metablitos secundrios em plantas de
Hypericum
perforatum L. (Hypericaceae) submetidas secagem e
ao congelamento
Introduo
A presena de molculas bioativas em plantas de
interesse medicinal.

Crescente popularidade dos medicamentos
fitoterpicos.

Espcies de grande interesse farmacutico: Hypericum
perforatum L., conhecida como hiprico.
Introduo
Usada na medicina popular por sua ao cicatrizante,
diurtica, bactericida, analgsica e antiinflamatria.

Os extratos de H. perforatum tm sido utilizados nos
tratamentos de depresses leves e moderadas e nos
distrbios do sono.

Efeito antidepressivo: maior interesse e vrios estudos
clnicos demonstraram que o hiprico to efetivo
quanto os antidepressivos sintticos.
Principais grupos de constituintes bioativos
relacionados s propriedades medicinais de Hypericum
perforatum:
naftodiantronas (hipericina e pseudohipericina)
efeito citotxico e indutor de apoptose em linhagens de
clulas neoplsicas: tratamento do cncer
flavonides (rutina, quercetina, quercitrina,
isoquercitrina e hiperosdeo) atividade
antioxidante,
floroglucinis (hiperforina e adhiperforina)
Introduo
Hiperforina, hipericina e alguns flavonides (rutina)
podem estar atuando na ao antidepressiva.

Eficcia dos extratos de hiprico no est diretamente
relacionada a apenas um constituinte.

A temperatura utilizada no processo de secagem do
material vegetal pode alterar os teores dos metablitos
de interesse.
Secagem e o armazenamento podem promover
rearranjos, oxidaes e redues das molculas
bioativas.

OBJETIVO: quantificar os flavonides e a hipericina
em plantas cultivadas de Hypericum perforatum, bem
como avaliar o efeito de diferentes temperaturas de
secagem, do congelamento e do perodo de estocagem
das amostras sob baixas temperaturas na concentrao
destes compostos nas partes areas das plantas.
Mtodo e materiais
As temperaturas avaliadas foram 25, 30, 50 e 70 C.

As amostras foram mantidas em estufa at atingirem
massa constante (de trs a cinco dias).

Aps a secagem, o material vegetal foi separado em
amostras de 1 g, com quatro repeties por tratamento
e estocado em temperatura ambiente para posterior
anlise.
Mtodo e materiais
Controle: amostra de material fresco (quatro repeties
de 1 g cada).

Comparar o contedo de compostos secundrios das
amostras desidratadas com as amostras de material
fresco: foi aplicado um fator de converso de massa
fresca (MF) em massa seca (MS), com base na
expresso MS/MF.


Mtodo e materiais
Avaliao efeito do congelamento do material vegetal
na quantidade dos compostos secundrios: as amostras
foram congeladas em N2 lquido.

O perodo de armazenamento das amostras sob baixas
temperaturas (-20 C) tambm foi analisado e a
extrao da hipericina e dos flavonides foi realizada
10, 20 e 30 dias aps o congelamento.

Cada tratamento consistiu de quatro repeties de 1 g
de massa fresca, separadas antes do congelamento.
Mtodo e materiais
Compostos do metabolismo secundrio analisados nas
amostras de hiprico foram:
flavonides rutina, quercetina, quercitrina, apigenina e
canferol;
naftodiantrona hipericina.

Utilizando-se cromatografia lquida de alta eficincia
(CLAE), no sistema Gilson (Gilson Medical Eletronics,
Frana), modelo 321, coluna fase reversa MetaSil ODS (5
m; 1504,6 mm), utilizando detector UV/VIS, ajustado
em 258 nm e em 590 nm, para flavonides e hipericina,
respectivamente, e operado temperatura ambiente (25 2
C).
Mtodo e materiais
As concentraes de flavonides e hipericina obtidas
pela anlise cromatogrfica foram submetidas
transformao raiz quadrada (x + 1) e posteriormente
aos testes de normalidade (Shapiro-Wilk) e de
homogeneidade (Bartlett). Comparaes mltiplas
foram feitas pela anlise da varincia e comparaes
binrias pelo teste de Tukey, ambos a 0,05 de
significncia, com auxlio do programa estatstico
SPSS v.11.
Resultados e discusso

Resultados e discusso

Resultados e discusso
A rutina e a quercitrina foram encontrados em maior
concentrao, enquanto apigenina e canferol livres
foram detectados em concentraes menores.

As variaes observadas podem ser conseqncia das
diferenas nas condies ambientais, da variabilidade
gentica ou das partes da planta utilizadas para a
anlise.

Resultados e discusso
A anlise dos extratos hidrolisados: apigenina, o
canferol e a quercetina encontravam-se principalmente
na forma conjugada.

O canferol e a quercetina so os flavonis mais
freqentemente encontrados na forma conjugada a
carboidratos.

Estratgia de adaptao e sobrevivncia das plantas
relacionada proteo contra a radiao UV-B.
Resultados e discusso
A hipericina foi a molcula encontrada em menor
concentrao

As concentraes variam amplamente de acordo com a
origem do material

Kazlauskas & Bagdonait relataram que as partes
areas vegetativas de hiprico apresentam teores de
hipericina menores do que o das flores.

Resultados e discusso
Dificuldade de florescimento de plantas de hiprico na
regio sul do Brasil

Cultivo comercial desta espcie para obteno de
hipericina pode no ser vivel nesta regio.

O processo de secagem pode alterar o perfil dos
metablitos secundrios das plantas medicinais.
Resultados e discusso
Temperatura: fator determinante para a manuteno
das propriedades teraputicas das plantas de hiprico.

Amostras dessecadas a 25 C tiveram os teores de
rutina e quercitrina livres, de rutina, apigenina e
quercetina glicosiladas e de hipericina alterados.

Utilizao de temperaturas entre 35 e 45 C tem sido
relatada como ideal para a desidratao de plantas
medicinais.
Resultados e discusso
Temperaturas mais elevadas permitem a secagem mais
rpida do material vegetal, inibindo mais rapidamente
a ao das enzimas ou a atividade microbiana.

Temperaturas acima de 60 C podem modificar o
contedo metablico das clulas.

Secagem a 50 C: a manuteno dos nveis de rutina
livre, de quercetina e quercitrina glicosiladas e de
hipericina, quando comparadas ao material fresco.
Resultados e discusso
A temperatura de 70 C causou diminuio nos nveis
da maioria dos compostos analisados.

Nos estudos de compostos secundrios produzidos
pelas plantas, o material vegetal congelado e
armazenado sob baixas temperaturas.

Para a anlise do contedo de flavonides, submeter as
amostras extrao, imediatamente aps o
congelamento.


Resultados e discusso
Estocagem das amostras sob baixas temperaturas pode
ser vivel quando o flavonide alvo do estudo for
quercetina ou canferol.

Por outro lado, tanto o congelamento quanto a
estocagem a -20 C causaram reduo significativa nos
nveis de hipericina.
Concluso
Dependendo da temperatura utilizada, o processo de
secagem de amostras de Hypericum perforatum pode
alterar as concentraes dos flavonides livres e
glicosilados e de hipericina.

O mesmo efeito foi observado quando o material vegetal
foi congelado e armazenado sob baixas temperaturas.

A reduo na concentrao de hipericina devido secagem
ou ao congelamento e armazenamento a -20 C representa
uma limitao para o preparo de medicamentos
fitoterpicos a partir de H. perforatum.

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