Astarita e Eliane Romanato Santarm Alterao dos metablitos secundrios em plantas de Hypericum perforatum L. (Hypericaceae) submetidas secagem e ao congelamento Introduo A presena de molculas bioativas em plantas de interesse medicinal.
Crescente popularidade dos medicamentos fitoterpicos.
Espcies de grande interesse farmacutico: Hypericum perforatum L., conhecida como hiprico. Introduo Usada na medicina popular por sua ao cicatrizante, diurtica, bactericida, analgsica e antiinflamatria.
Os extratos de H. perforatum tm sido utilizados nos tratamentos de depresses leves e moderadas e nos distrbios do sono.
Efeito antidepressivo: maior interesse e vrios estudos clnicos demonstraram que o hiprico to efetivo quanto os antidepressivos sintticos. Principais grupos de constituintes bioativos relacionados s propriedades medicinais de Hypericum perforatum: naftodiantronas (hipericina e pseudohipericina) efeito citotxico e indutor de apoptose em linhagens de clulas neoplsicas: tratamento do cncer flavonides (rutina, quercetina, quercitrina, isoquercitrina e hiperosdeo) atividade antioxidante, floroglucinis (hiperforina e adhiperforina) Introduo Hiperforina, hipericina e alguns flavonides (rutina) podem estar atuando na ao antidepressiva.
Eficcia dos extratos de hiprico no est diretamente relacionada a apenas um constituinte.
A temperatura utilizada no processo de secagem do material vegetal pode alterar os teores dos metablitos de interesse. Secagem e o armazenamento podem promover rearranjos, oxidaes e redues das molculas bioativas.
OBJETIVO: quantificar os flavonides e a hipericina em plantas cultivadas de Hypericum perforatum, bem como avaliar o efeito de diferentes temperaturas de secagem, do congelamento e do perodo de estocagem das amostras sob baixas temperaturas na concentrao destes compostos nas partes areas das plantas. Mtodo e materiais As temperaturas avaliadas foram 25, 30, 50 e 70 C.
As amostras foram mantidas em estufa at atingirem massa constante (de trs a cinco dias).
Aps a secagem, o material vegetal foi separado em amostras de 1 g, com quatro repeties por tratamento e estocado em temperatura ambiente para posterior anlise. Mtodo e materiais Controle: amostra de material fresco (quatro repeties de 1 g cada).
Comparar o contedo de compostos secundrios das amostras desidratadas com as amostras de material fresco: foi aplicado um fator de converso de massa fresca (MF) em massa seca (MS), com base na expresso MS/MF.
Mtodo e materiais Avaliao efeito do congelamento do material vegetal na quantidade dos compostos secundrios: as amostras foram congeladas em N2 lquido.
O perodo de armazenamento das amostras sob baixas temperaturas (-20 C) tambm foi analisado e a extrao da hipericina e dos flavonides foi realizada 10, 20 e 30 dias aps o congelamento.
Cada tratamento consistiu de quatro repeties de 1 g de massa fresca, separadas antes do congelamento. Mtodo e materiais Compostos do metabolismo secundrio analisados nas amostras de hiprico foram: flavonides rutina, quercetina, quercitrina, apigenina e canferol; naftodiantrona hipericina.
Utilizando-se cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE), no sistema Gilson (Gilson Medical Eletronics, Frana), modelo 321, coluna fase reversa MetaSil ODS (5 m; 1504,6 mm), utilizando detector UV/VIS, ajustado em 258 nm e em 590 nm, para flavonides e hipericina, respectivamente, e operado temperatura ambiente (25 2 C). Mtodo e materiais As concentraes de flavonides e hipericina obtidas pela anlise cromatogrfica foram submetidas transformao raiz quadrada (x + 1) e posteriormente aos testes de normalidade (Shapiro-Wilk) e de homogeneidade (Bartlett). Comparaes mltiplas foram feitas pela anlise da varincia e comparaes binrias pelo teste de Tukey, ambos a 0,05 de significncia, com auxlio do programa estatstico SPSS v.11. Resultados e discusso
Resultados e discusso
Resultados e discusso A rutina e a quercitrina foram encontrados em maior concentrao, enquanto apigenina e canferol livres foram detectados em concentraes menores.
As variaes observadas podem ser conseqncia das diferenas nas condies ambientais, da variabilidade gentica ou das partes da planta utilizadas para a anlise.
Resultados e discusso A anlise dos extratos hidrolisados: apigenina, o canferol e a quercetina encontravam-se principalmente na forma conjugada.
O canferol e a quercetina so os flavonis mais freqentemente encontrados na forma conjugada a carboidratos.
Estratgia de adaptao e sobrevivncia das plantas relacionada proteo contra a radiao UV-B. Resultados e discusso A hipericina foi a molcula encontrada em menor concentrao
As concentraes variam amplamente de acordo com a origem do material
Kazlauskas & Bagdonait relataram que as partes areas vegetativas de hiprico apresentam teores de hipericina menores do que o das flores.
Resultados e discusso Dificuldade de florescimento de plantas de hiprico na regio sul do Brasil
Cultivo comercial desta espcie para obteno de hipericina pode no ser vivel nesta regio.
O processo de secagem pode alterar o perfil dos metablitos secundrios das plantas medicinais. Resultados e discusso Temperatura: fator determinante para a manuteno das propriedades teraputicas das plantas de hiprico.
Amostras dessecadas a 25 C tiveram os teores de rutina e quercitrina livres, de rutina, apigenina e quercetina glicosiladas e de hipericina alterados.
Utilizao de temperaturas entre 35 e 45 C tem sido relatada como ideal para a desidratao de plantas medicinais. Resultados e discusso Temperaturas mais elevadas permitem a secagem mais rpida do material vegetal, inibindo mais rapidamente a ao das enzimas ou a atividade microbiana.
Temperaturas acima de 60 C podem modificar o contedo metablico das clulas.
Secagem a 50 C: a manuteno dos nveis de rutina livre, de quercetina e quercitrina glicosiladas e de hipericina, quando comparadas ao material fresco. Resultados e discusso A temperatura de 70 C causou diminuio nos nveis da maioria dos compostos analisados.
Nos estudos de compostos secundrios produzidos pelas plantas, o material vegetal congelado e armazenado sob baixas temperaturas.
Para a anlise do contedo de flavonides, submeter as amostras extrao, imediatamente aps o congelamento.
Resultados e discusso Estocagem das amostras sob baixas temperaturas pode ser vivel quando o flavonide alvo do estudo for quercetina ou canferol.
Por outro lado, tanto o congelamento quanto a estocagem a -20 C causaram reduo significativa nos nveis de hipericina. Concluso Dependendo da temperatura utilizada, o processo de secagem de amostras de Hypericum perforatum pode alterar as concentraes dos flavonides livres e glicosilados e de hipericina.
O mesmo efeito foi observado quando o material vegetal foi congelado e armazenado sob baixas temperaturas.
A reduo na concentrao de hipericina devido secagem ou ao congelamento e armazenamento a -20 C representa uma limitao para o preparo de medicamentos fitoterpicos a partir de H. perforatum.