Biologa

Celular
y Molecular

TEMA VI: GENTICA MOLECULAR

CONFERENCIA # 18
TITULO:APLICACIONES DE LA GENTICA
MOLECULAR.
Dr: JOSUE ACOSTA ACOSTA
PROFESOR AUXILIAR

TEMA VI

GENTICA MOLECULAR

PARTE V
Aplicaciones de la Gentica
Molecular.

IDENTIFICAR
el hecho experimental que dio origen a la
Tecnologa del ADN recombinante.

DESCRIBIR
el procedimiento bsico de la Tecnologa
del ADN recombinante.

DEFINIR

el concepto de Enfermedad Molecular.

MENCIONAR
la causa primaria de las enfermedades
moleculares.

SUMARIO

1. Enzimas de restriccin.
2. Recombinacin in vitro.

3. Procedimiento general.
4. Usos en la prctica mdica.
5. Enfermedades moleculares. Causas y
ejemplos.

1953. Watson y Crick proponen el

modelo general de la replicacin del
ADN.

Werner Arber (1929-), Daniel Nathans (19281999) y Hamilton O. Smith (1931-)

Premio Nobel en Fisiologa o Medicina
en 1978.

Los sistemas de restriccin y modificacin

Los sistemas de modificacin y

restriccin.
CH3

CH3

Los sistemas de modificacin y

restriccin.
CH3

CH3

Los sistemas de modificacin y

restriccin.
CH3

CH3

Los sistemas de modificacin y

restriccin.
CH3

Los sistemas de modificacin y

restriccin.
CH3

CH3

Los sistemas de modificacin y

restriccin.

Los sistemas de modificacin y

restriccin.

Los sistemas de modificacin y

restriccin.

Procedimiento para la obtencin de

genes especficos

Enzimas de restriccin.

obtencin de genes por electroforesis

Otra forma de obtener un gen.

La estructura de los genes eucariontes

impedan su expresin en bacterias.

Los genes eucariontes poseen intrones y

las bacterias carecen de las enzimas para
eliminarlos.

Howard Martin Temin (1934-1994) y David

Baltimores (1938-)
Premio Nobel en Medicina y Fisiologa en 1975

ADN polimerasa
dependiente de ARN.

ADNc

Qu es un vector?
Una molcula de ADN capaz de replicarse.

Debe existir un procedimiento para detectar

su presencia.
Debe haber un mtodo para introducirlo en la
clula.

Vectores ms empleados.
Los plsmidos.
Los virus.

Los cromosomas artificiales de levadura.

Los plsmidos.

Los virus.

Los plsmidos

Como se obtiene con los plsmidos

amp-/tet-

amp+/tet+

amp+/tet-

Tetraciclina + cicloserina.

Crecimiento

Crecimiento

amp-/tet-

amp+/tet-

Ampicilina

Crecimiento

Kary B. Mullis, ide un

procedimiento para la
clonacin in vitro del
ADN conocido como
reaccin en cadena de
la polimerasa.

Premio Nobel de Qumica en 1993.

Una experiencia clsica.

La sntesis de la somatostatina.
Hormona de 14 aminocidos.
Se hizo la sntesis artificial del gen.

Secuencia del ADN

TAC-(42 bases de la hormona)-ACTACT

Secuencia del ARN mensajero

AUG-(42 bases de la hormona)-UGAUGA

Contruccin del vector de expresin

Construccin del vector de expresin:

Plsmido de E. Coli.

Promotor
del operon
lac

Gen de la
somatostatina.

Empleo diagnstico.

A1
20 kb

A2
8 kb

12 kb

Problemas de Identificacin.

En la escena de un crimen quedaron

clulas del criminal. Existen dos
sospechosos.

Cul de ellos es el culpable?

ADN de 3 personas

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Sospechoso 1

Muestra

Sospechoso 2

Las modernas biotecnologas pueden

contribuir de forma importante al desarrollo
de la humanidad.
Tambin pueden contribuir a su destruccin.

Todo depende de en manos de quin estn

estas poderosas herramientas.

LAS
ENFERMEDADES

MOLECULARES

1949. Linus Carl

Pauling (1901-1994)
propone el trmino
de
enfermedades
moleculares a partir
de
sus
estudios
sobre la sicklemia.

Premio Nobel de Qumica en 1953.

Premio Nobel de la Paz en 1962.

Una enfermedad molecular es aquella

cuyos sntomas y signos se derivan
de la alteracin estructural de una
molcula, generalmente una protena.

Regin
Reguladora.

Cantidad

Regin
Codificadora.

Actividad

Promotor dbil

Promotor fuerte

Myc

Las mutaciones pueden producir

alteraciones de protenas con funciones
de:
Enzimas.

Defensa.

Receptores.

Contrctiles.

Transportadores.

Estructurales.

Los errores congnitos del

metabolismo.

Sustrato.

Productos
secundarios.

Producto.

Fenilcetonuria.
COOH

H2N-C-H

COOH

NADPH

NADP+

H-C-H

H2N-C-H
H-C-H

O2

H 2O

Fenilalanina hidroxilasa

OH

COOH

H2N-C-H
H-C-H

OH

Melanina.

COOH

H2N-C-H
H-C-H

COOH

C=O
H-C-H

cido
Fenilpirvico

COOH

H-C-H

cido
Fenilactico

Esquema de la Rodopsina

Hemoglobina

Baja presin de O2

Mutacin del gen.

Hemoglobina S
Baja presin de O2
Drepanocitos
Hemolisis
Anemia. Ictero.

Obstruccin vascular.
Infartos.

Conclusiones
El modelo molecular del ADN y el
descubrimiento de las enzimas de
restriccin permitieron un estudio ms
profundo de la estructura de los genes.

Los experimentos de recombinacin in vitro

marcaron el inicio de las Tecnologas del
ADN recombinante.

El procedimiento bsico consiste en:

Fragmentar el ADN y obtener el gen
deseado.
Clonar el gen.
Expresar el gen.

Adems de sus usos productivos estas

tecnologas pueden ser aplicadas en la
solucin de varios problemas mdicos,
como el diagnstico, la identificacin, etc.
Las biotecnologas pueden ser
beneficiosas o dainas segn quienes la
utilicen.

Las enfermedaades moleculares alteran la

cantidad o actividad de protenas
especficas y son debidas a mutaciones en
el ADN.

Cada enfermedad molecular tiene una baja

incidencia pero su conjunto constituye un
problema de salud en muchos pases
incluyendo el nuestro.