UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA PESQUERA Y DE ALIMENTOS - EPIP

ENZIMAS

2014 - B

Prof. Nestor Gomero Ostos

Enzimas .
Definicin
Molculas proteicas encargadas de
la catlisis de reacciones qumicas
en los seres vivos

Esta definicin se modific con

descubrimiento de las ribozimas

RIBOZIMAS,
son enzimas?
Thomas Cech, col.
1982.
Establecen
molculas de RNA
con capacidad
cataltica,
comportndose
como enzimas muy
activas en el auto
procesamiento del
rRNA transcrito

Accin de una
ribozima

Enzimas.
Definicin
Macromolculas
biocatalizadoras de
reacciones qumicas en seres
vivos
5

Por qu son necesarias las

enzimas en sistemas
biolgicos?
A temperatura y pH de seres vivos,
reacciones qumicas no se realizan por s
solas.
Insuficiente energa para actividades
musculares, generacin de impulsos
nerviosos y otras actividades para
soportar la vida

Hay que acelerar la velocidad de las

reacciones

Cmo se aumenta la
velocidad de reaccin?

Elevando temperatura
Disminuyendo la energa de
activacin
Enzimas aceleran la velocidad de
reaccin por medio de disminuir la
energa de activacin

ES

Energa de
Activacin
(Ea)

Cantidad de energa
mnima para que
sustrato (S) alcance
el estado de
transicin (E-S) y
luego se transforme
en producto (P).

Reaccin catalizada por

una enzima
ES

Estado de Transicin
(E-S)
E-S

Estado intermedio
en el que enlaces
de (S) estn
suficientemente
distorsionados
para su conversin
en (P)

E+S
E+P

E+S

E-S

E+P

La velocidad de una enzima

se mide en razn a:
Concentracin

de sustrato
que desaparece por unidad
de tiempo.
Concentracin de
producto que se forma por
unidad de tiempo.

En la prctica......
Grfica de MichaelisMenten

Vmax

----------------------------------------------------------

Grfica de Lineweaver-Burk
1/v = Km/Vm x 1/[S] + 1/Vm
Suponiendo:
1/Vm = 2
Vm =

Por qu determinar
Km ?
Establece

el valor aprox. de la
concentracin de sustrato en la clula.
Identificacin de isoenzimas
Mide afinidad de la enzima por
determinado sustrato
A mayor valor de Km, la afinidad de
la enzima por el sustrato es baja.

Glucosa
Hexoquina
sa
Glucoquinasa

ATP

AD
P
Km hexoquinasa =
Glucosa-6- 0.1 mM
P
Km glucoquinasa =
10 mM

[glucosa]

sangre

= 4 - 5 mM

Despus de ingerir dieta rica en

carbohidrato, [glucosa] sangre, se eleva.
Glucosa es transportada al hgado
para ser convertida en Glu-6-P.

Clasificacin
Clase 1. Oxido-reductasas
Procesos de xido-reduccin.
Ej: Deshidrogenasas, peroxidasas

Clase 1. Oxido-reductasas
2e

LACTAT
O

PIRUVAT
O

 Peroxidasa.- Utilizan como oxidante H2O2

en lugar de oxigeno. Ejm NADH Peroxidasa a,
citocromo oxidasa
NADH+H

+ H2O2 ------- NAD

+ 2H2O

Catalasa.- Transforma dos molculas de

H2O2 en dos molculas de agua con
desprendimiento de oxigeno.
H2O2

H2O2 --------2H2O

O2

Prof. Nestor Gomero Ostos

Clase 2. Transferasas
Transferencia de
grupos
funcionales:
amino, acilo,
fosfato, glucosilo,
grupos
monocarbonados
Ej:
transaminasa,
quinasas.
Glucosa + ATP

Glucosa-6P + ADP
Hexoquinasa

Clase 3. Hidrolasas
Catalizan la ruptura de enlaces qumicos con la
participacin de las molculas de agua

Lactasa
Lactosa + H2O

glucosa + galactosa

 Clase 4. Liasas
Catalizan reacciones en las cuales se forman o
eliminan grupos H2O, NH3, CO2 para formar o
eliminar doble enlace, respectivamente.

H2 O

Fumarasa

Clase 5. Isomerasas
Catalizan isomerizaciones de diversos tipos ptica,
geomtrica, funcional, de posicin, etc (cis-trans,
ceto-enol, aldosa-cetosa)

Clase 6. Ligasas
Ligan o separan compuestos y para ello utilizan
energa o liberan energa

PropionilCoA

DmetilmalonilCoA

Nombre sistemtico: Grupo transferido

ATP: hexosa fosfotransferasa

Aceptor

Donador
Nmero sistemtico
Enzyme
Comission

Grupo

Subgrupo

EC 2.7.1.1

Enzima

Sub-subgrupo

Nombre comn: Hexokinasa

Algunos enzimas necesitan de una o ms

sustancias de naturaleza no proteica para
llevar a cabo su actividad cataltica

Iones metlicos que actan como

cofactores enzimticos
Son generalmente cationes mono o divalentes
1) En algunos enzimas el ion
metlico constituye el
verdadero centro cataltico. El
ion suele presentar por s solo
una cierta actividad cataltica,
que se ve incrementada
cuando forma parte de la
enzima.

2) A veces el ion metlico no

forma parte del sitio activo
sino que se encuentra en un
lugar del enzima muy alejado
del mismo, actuando
como agente estabilizador de
la conformacin nativa del
enzima.

Sitio cataltico de
enzima
carboxipeptidasa

3) En otras enzimas el
ion metlico constituye
un grupo puente para
unir el sustrato al sitio
activo.

26

COENZIMAS
Actan generalmente
como transportadores
intermediarios de grupos
funcionales, de
determinados tomos o
de electrones, los cuales
son transferidos de una
sustancia a otra en la
reaccin enzimtica
global.

A veces los coenzimas se hallan

ntimamente unidos a la molcula
proteica constituyendo un
verdadero grupo prosttico.
En otros casos la unin es dbil y
el coenzima acta en realidad
como un sustrato ms de la
enzima.

Coenzimas
derivadas de
niacina:
NAD++, NADH +
H++, NADP++,
NADPH + H++

Oxidado:
NAD+

Reducido:
NADH
+
H+

Coenzimas
NAD+, NADH + H+

29

Coenzimas derivadas de vitamina

riboflavina:
Flavina monofosfato (FMN), flavinadenina dinucletido (FAD, FADH22)

30

Coenzimas derivadas de tiamina:

Tiamina pirofosfato (TPP)

TiaminaPP

Tiamina (vit.
B-1)

Tiamina-pirofosfato
(TPP)

Coenzima derivada de
vit. B66:
piridoxal fosfato

Enzima
Aminotransfera
sa
PiridoxalP
Glutama
to

cetocid
o

Alfa
cetoglutar
ato

aminoci
do

32

Coenzima derivada de
cido pantotnico:
Coenzima A

AcetilCoA

Vit. B-12
(Cianocobalamina)
Complejo hexacoordinado de
cobalto
Es coenzima de enzimas que
catalizan la transferencia
de grupos metilo (-CH3)

- Metionina sintetasa (sintasa)

- Metil malonil CoA mutasa

VITAMINA

COENZIMA
DERIVADA

FUNCIN

Tiamina (B1)

Pirofosfato de
tiamina

Descarboxilacin y
transferencia de grupos acilo.

Riboflavina (B2)

Flavina
mononucletido
Flavina y adenina
dinucletido
Nicotinamida y
adenina dinucletido

cido Nicotnico

Nicotinamida y
adenina dinucletido
fosfato

TPP
FMN
FAD
NAD+
NADP+

Piridoxina, piridoxal
y piridoxamina (B6)
cido Pantotnico
Biotina
cido Flico
Cobalamina (B12)

Portadores de hidrgeno y
electrones en oxidoreducciones
Portadores de hidrgeno y
electrones en oxidoreducciones
Transferencia de grupo amino
y decarboxilacin

Coenzima A
Enlazada
covalentemente a
carboxilasas
Tetrahidrofolato
Coenzima de
cobalamida

CoASH

Transferencia de acilos
Carboxilacin

TH4

Transferencia de un carbono
Reordenamientos,
transferencia de metilos

Inhibicin Enzimtica

1968 Introduccin en
mercado de BACTRIM
(combinacin de
trimetoprimsulfametoxasol).
De qu manera este medicamento ejerce una
accin antibacteriana y antiparasitaria?
36

Trimetoprim (TMP) y
sulfametoxazol (SMX) actan de
forma sinrgica.
Trimetoprim inhibe de forma
competitiva la enzima
dihidrofolato reductasa.
TMP-SMX inhibe 50,000 veces
ms la dihidrofolato reductasa
bacteriana que la de los
mamferos

Caractersticas de la
inhibicin enzimtica

Disminuir o bloquear la velocidad de reaccin,

unindose a la enzima.
Son especficos.
Alteran grupos importantes para la funcin
cataltica, o
Alteran ligeramente conformacin de la
enzima sin llegar a desnaturalizarla.

Aplicaciones

Son el fundamento de
frmacos antivricos,
antibacterianos y
antitumorales

Tipos Inhibicin

Inhibicin Permanente
Unin IRREVERSIBLE por enlaces
covalentes, provocando modificacin
qumica de grupos en centros de fijacin y
sitio activo de la enzima.

Inhibicin permanente

Gas sarn
Compuesto organofosforado
inhibe la actividad de
ACETILCOLINESTERASA

Los organofosforados forman un ster estable

con el OH de la SER ubicada en el sitio activo de
la enzima, bloquendola e inactivndola.

Tipos de inhibicin
reversible

Competitiva
Acompetitiva
No competitiva

Inhibicin Competitiva

I y S compiten por
sitio cataltico.
I y S son de
estructura qumica
parecida
Afecta el valor de
Km.
Vm permanece
inalterable

FdUMP

UMP

Fluorouracil

dTM
P

DNA

Timidila
to
7, 8
5, 10-metilen
tetrahidrofol sintasa dihidrofola
to
ato
Serina
hidroximetil
transferasa

Glicin
a
Serin
a

Dihidrofol
ato
reductasa

Tetrahidrofolat
o

Inhibici
n

NADPH
+ H+

Metotrex
ato
NADP
+

Accin Bioqumica de
Agentes

METOTREXATO

c.
flico

Las posiciones 7 y 8
llevan hidrgeno en el
DIHIDROFOLATO

Inhibicin No
competitiva
I se une tanto a la
enzima como al
complejo E-S.
K no se altera
m

Vm vara. Disminuye
a medida que
aumenta [I].
I, podra impedir la
conformacin
tridimensional del
sitio cataltico.

Anlogo de Estado de
Transicin (AET)

El inhibidor no es
estrictamente anlogo
del substrato, sino del
Estado de Transicin
(E-S) de la reaccin.

La afinidad de las
enzimas por los AET es
enorme, del
orden nM o pM, con lo
que la fijacin es tan
fuerte que
puede considerarse
irreversible
47

Anlogo de Estado
de Transicin (AET)
Sustr
ato

O2N

N+ CH3
CH3

Anlogo de
un E-S
O
-

O2N

O2N

ES

Produc
tos

H3C

O-

H3C

CH3

O
OH

HO

N+ CH3

H3C
O

N+ CH3
CH3

O2 N

OP

H3 C

N+ CH3
CH3

Sistema reninaangiotensina (RAS) o sistema

renina-angiotensinaaldosterona (RAAS)
Angiotensingeno
Renina

Angiotensina I

Sistema hormonal que ayuda

a regular a largo plazo
lapresin sanguneay
elvolumen
extracelularcorporal.

Enzima convertidora
de Angiotensina, ECA

Angiotensina II
(aumento de presin
arterial)
49

Anlogos de Estado de
Transicin: Captopril

R
HN

CH COO-

C O
R'

C H
NH

HO C
C
O
Estado de transicin
de la ECA

CH COO-

C O
H3C C H
H C
H
S
Captopril

50