Universidad Autnoma Metropolitana

Agrobacterium
tumefaciens
Dra. Mara Anglica Gutirrez Nava

Gmez Acosta Miguel Angel

La biologa molecular y
la ingeniera gentica
en plantas se inician
con el descubrimiento
y el estudio de A
tumefaciens.

Bacteria (Gram
negativa) presente
en la rizsfera.

Agente causal de
la enfermedad
conocida como
agalla en corona.
Esta bacteria,
produce el
crecimiento de
tumores en los
tejidos de los
vegetales
atacados.
A. tumefaciens es
organismo capaz
de transformar
genticamente
una clula vegetal.

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Tras la transferencia el TDNA se integraba en el

genoma nuclear de la
planta y su expresin
induca el fenotipo
tumoral.

Responsable de la formacin de
la crown gall era la
transferencia de un fragmento
de DNA llamado T-DNA que a su
vez se localizaba en un
plsmido al que se denomin Ti
(inductor de tumores).

El ori permite que el plsmido Ti sea mantenido de forma estable en A

tumefaciens.
Existen tres elementos genticos necesarios para la transferencia del T-DNA a la
planta, (regiones presentes en los plsmidos de Agrobacterium) :
Bordes flanqueantes del T-DNA:
A la izquierda y derecha del T-DNA existen dos direct repeats de unos 24-25pb
que flanquean y definen el T-DNA. Estos bordes son secuencias en cis necesarias
para la transferencia y normalmente todo el DNA contenido entre los mismos es
transferido a la planta
Genes vir.
Genes de virulencia o regin vir codificada por el plsmido Ti en una regin de 35
kb localizada fuera del T-DNA, (existen 25 genes vir reunidos en 7 operones)
Genes codificados por el cromosoma bacteriano.
Estos genes son necesarios para la unin de la bacteria a la clula vegetal
daada.

GENop
Responsable de la sntesis de opinas.
GENES onc
Son genes del plsmido T-DNA responsables de la
codificacin de enzimas que intervienen en la sntesis
de hormonas vegetales y por lo menos un aenzima
clave en la biosntesis de la opina.

Ingeniera gentica de plantas usando

T-DNA
El uso de T-DNA en la ingeniera gentica de plantas se basa en cuatro puntos:
1.- Localizacin y delecin de los genes que gobiernan la formacin del tumor.
2.- El desarrollo de marcadores tiles para detectar aquellas clulas vegetales
que haban sido transformadas por Agrobacterium.
3.- El desarrollo de vectores y procedimientos genticos que permitan
introducir genes forneos en el T- DNA .
4.- El desarrollo de varios sistemas de cultivo de tejidos que permitieron la
infeccin eficiente y la regeneracin de plantas transgnicas completas a partir
de clulas vegetales transformadas con el inserto de inters.

Transferencia del T-DNA

 El proceso bsico de
transformacin vegetal
utilizando A. tumefaciens

 Transformacin de plantas. El
conocimiento de las bases moleculares por
las cuales A. tumefaciens transfiere su
ADN-T al genoma de la planta ha sido
fundamental para el desarrollo de la
ingeniera gentica de plantas.
Los primeros reportes cientficos de
plantas transgnicas son del ao 1983 con
el desarrollo de plantas de tabaco, de
Nicotiana plumbaginifolia, de petunia y
girasoles resistentes al antibitico
kanamicina.

Estas primeras plantas fueron usadas en

investigaciones posteriores logrando producir
plantas transgnicas con caractersticas
(resistencia) comerciales importantes.

Gracias por tu atencin.