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Dra.

Ana Baca Padilla


Mdico Patlogo Clnico

PATOGENOS DE TRANSMSIN
SEXUAL
BACTERIANAS
Neisseria gonorrhoeae
Treponema pallidum
Chlamydia trachomatis
Haemophilus ducreyi
Calymmatobacterium

granulomatis
Ureaplasma ureayticum
Micoplasma hominis
Micoplasma genitalium
Gardnerella vaginalis
Salmonella
Shiguella
Campylobacter
Estreptococo grupo B
Mobilumcus

PROTOZOOS
Trichomonas vaginalis
Entamoeba histolytica
Giardia lambia
Otros
VIRUS
VIH
Herpes simple
Papiloma humano
Hepatitis tipo A, B, C y D
Citomegalovirus
Epstein Barr
Molluscus contagioso
Enterovirus
ECTOPARASITOS
Phtirus pubis
Sarcoptes scabiei

HERPES VIRUS
Enfermedad causada por el VHS-2 y el VHS-1
Causa ms frecuente de lceras genitales
Infeccin de por vida
Presencia de Ac. Especficos
Infeccin actual
Potencial para recidiva

Criterio Diagnstico
Clnico: presencia de vesculas
Hallazgo Virolgico: ante sospechas (cultivo, PCR)
Anticuerpos
Especficos
VHS-2
confirma

infecciones pasadas

CHLAMYDIASIS
Bacteria intracelular
Cultivos celulares para aislamiento.
Transmisin:
Exclusivamente sexual

perinatal.
Sntomas principales

Hombres: secrecin uretral escasa y disuria


Mujeres: secrecin vaginal, disuria, sangrado

poscoital o intermenstrual.
Otros
como salpingitis,
epididimitis y conjuntivitis.

uretritis,

vaginitis,

Exploracin Fsica: Signos inflamatorios y

secrecin mucoide o mucopurulenta,


veces exploracin normal.

CHLAMYDIA
Cultivo: Celular.
Identificacin del Organismo:
Cultivo detecta de 70 a 80% de infecciones.
Pruebas Serolgicas: Los anlisis de anticuerpos:

(IFI).
Pruebas de ELISA de captura de antgeno
Pruebas rpidas

Diagnostico de la infeccin
VIH
Mtodos directos

Deteccin del virus o alguno de


componentes (protenas o Ac. Nucleicos)

sus

Mtodos indirectos

Reconocen
los
anticuerpos
especficos
producidos por el sistema inmune como
respuesta a la infeccin

Mtodos Indirectos
Se dividen en:
Pruebas de Screening

Diseadas con mxima sensibilidad


Pruebas Confirmatorias
Alta especificidad

Mtodos Indirectos
Pruebas de Screening o tamizaje
Las tcnicas inmunoenzimaticas (EIA)
metodologa simple
alta sensibilidad
nivel de automatizacin
realizar gran numero de pruebas

Mtodos Indirectos
Pruebas de Screening o tamizaje
Pruebas de ELISA
Pruebas Rpidas

Mtodos Indirectos
Clasificacin de pruebas de ELISA
Tipo de EIA
1ra Generacin

Tipo de Antigeno de Fases Slida


Lisado viral VIH-1

2da Generacin Protenas recombinantes y peptidos sintticos de


VIH-1 y VIH-2
3ra Generacin

Pptidos/protenas recombinantes de VIH-1 y


VIH-2 y antgeno VIH-1 del grupo O (outlayer o
marginal) (IgG, IgM y IgA).

4ta Generacin

Pptidos recombinantes/sintticos de VIH-1 y


VIH-2 y VIH-1 "O", y anticuerpos para detectar el
antgeno p24

Mtodos Indirectos
Pruebas de Confirmacin
Western Blot
Inmuno-fluorescencia Indirecta

Mtodos Directos
Basados en la deteccin de Virus o alguno de
sus componentes.
Cultivo Vrico
Determinacin de Antgeno p24
Demostracin de genoma vrico (tcnicas

moleculares)

Mtodos Directos
a) Cultivo Celular

Cultivo de clulas mononucleares de


sangre perifrica.
Criterio de positividad:
Demostracin de efecto citoptico
Deteccin de productos vricos Ag-p24
Deteccin de transcriptasa reversa.

Mtodos Directos
a) Cultivo Celular

Tcnica ms especfica para diagnstico


Para estudios de variabilidad gentica
Epidemiologa molecular
Patognesis vrica
Resistencia a frmacos

Mtodos Directos
b) Antigenemia de p24

Su deteccin mediante reaccin EIA


Marcador de infeccin aguda
Su deteccin es variable (anti-p24

neutralizantes)
til en tamizaje de donantes
Confirmacin de crecimiento en cultivos
virales
Infeccin de recin nacidos

Mtodos Directos
c) Tcnicas Moleculares

Reaccin de Cadena de Polimerasa (PCR)


Usos diagnsticos
Diagnstico de VIH en Recin Nacidos hijo

de madre seropositiva
Pacientes con patrones serolgicos atpicos
Usos en Bancos de Sangre, periodo de
ventana 7 das).

Diagnstico de infeccin
Crnica
Los anticuerpos frente al VIH aparecen
entre 4 a 8 semanas despus de la
exposicin
Uso de pruebas serolgicas EIA y WB/IFI
Prueba EIA repetida reactivas ms una
pruebas IFI positiva
Falsos positivos son raros (frecuente
error tcnico).

Diagnstico de infeccin
Crnica
Sujetos sin exposicin: Alta Sensibilidad y alto
Valor Predictivo Negativo,
negativo: NO SE CONFIRMA

un

resultado

Sujetos con exposicin:


Resultado negativo: no descarta la infeccin
Periodo de Ventana: pruebas no reactivas
Test actuales: periodo de ventana 10 a 14
das
En casos de sospecha de falso negativo EIA
y sntomas clnicos: realizar carga viral.

Diagnstico de infeccin
Crnica
Pacientes con prueba EIA reactivo y
una sola Banda de WB: Indeterminado
Seroconversin
Infeccin avanzada
Infeccin por VIH-2
Pacientes
con
alo-anticuerpos
(gestantes, transfus)
Pacientes con auto-anticuerpos (LES,
neoplasia)

Diagnstico de infeccin
Crnica
Pacientes con WB indeterminado

Realizar PCR: determinacin cualitativa ADN


viral
PCR Positivo: infeccin confirmada
PCR Negativo: infeccin descartada

Sifilis
Es una enfermedad infecciosa aguda o
crnica
de
manifestaciones
clnicas
diversas
Etiologa: Treponema pallidum,

Es un microorganismo mvil que, se


encuentra en el lmite de resolucin
ptica
de
los
microscopios
convencionales

Epidemiologa
Transmisin:
Sexual: primaria, secundaria y latente
temprana.
Transplacentaria: en el embarazo
Nosocomial: transfusiones

Periodo de
Incubacin
En un tiempo de 10 das a 3 meses
Los anticuerpos detectables aparecen de 1 a
4 semanas de la formacin del chancro

Manifestaciones
clnicas
Sfilis Primaria: Chancro
Ulcera, nica indolora, indurada, de fondo
limpio, generalmente en genitales.
Adenopata regional.

Manifestaciones
Sfilis Secundaria:
clnicas
Manifestaciones proteicas mediada
complejos.

por

inmuno-

Presentacin habitual erupcin cutnea.


Ppulo escamosa generalizada sin prurito en plantas y
palmas.
Placas mucosas, condilomas planos.
Linfoadenopata

Manifestaciones
clnicas
Sfilis Terciaria:

Lesiones Viscerales tales como:


Gomas, Neurosfilis, Cardiosfilis.

Manifestaciones
clnicas
Sfilis Latente: infeccin asintomtica
Detectable slo en el anlisis serolgico
Sfilis Latente Temprana: menor 1 ao
Sfilis Latente Tarda: mayor a 1 ao

Diagnstico por
Laboratorio
Identificacin del treponema
Microscopio de campo oscuro
Deteccin inmunolgica y genetica
Histologa

Serologa
Pruebas no treponemicas (no especficos)
Pruebas Treponemicas (especficos)

Pruebas No
Treponemicas
VDRL
RPR

Utilidad
Tamizaje en poblacin
Evaluacin de la eficacia de tratamiento
Seguimiento

VDRL Venereal Disease Research


Laboratory
En Suero y LCR
Lectura Microscpica
Los Componentes del Antgeno son:
Cardiolipina al 0.03%
Colesterol al 0.9%
Lecitina purificada para producir una
reactividad estndar

VDRL Venereal Disease Research


Laboratory
Nomenclatura del Reporte
No Reactivo: Sin grumos
Reactivo Dbil: Grumos pequeos
0 DIL: se presentan en el suero sin diluir y
1 DIL cuando es visible hasta la dilucin 1:2)

Reactivo: Grumos medianos o grandes

RPR

Rapid Plasma Reagin

Nomenclatura del Reporte:


v No Reactivo: Sin Grumos
v Reactivo:
v
v

1 DIL: se presenta en el suero sin diluir y


2 DIL visible hasta la dilucin 1:2

v Grumos

bien definidos, ya sea Grandes,


Medianos o Pequeos.

Evolucin de la Respuesta
Serolgica No Treponmica
post-tratamiento antibitico
SIFILIS PRIMARIA

Se negativiza mximo de 6 meses.


SIFILIS SECUNDARIA

Se negativiza en promedio 12 meses.


SIFILIS LATENTE

Se negativiza en tiempos de 12 a 18 meses

Pruebas Treponmicas
Utilidad para diagnstico y confirmacin
FTA Abs

Pruebas
Treponmicas-PT
FTA-200 usaba una dilucin 1 : 200 del suero.
Altamente especfico pero no muy sensible
FTA-Abs:

usa la espiroqueta Reiter para


remover Ags comunes. Mas especfica y ms
sensible

FTA-Abs de doble tincin usa microscopio de

luz incidente y es la prueba gold standard

Otras Pruebas:
ELISA IgM : Basado en la captura del Ac IgM.

til en la Sfilis neonatal.


ELISA IgG.
Western Blot: gran valor en S, congnita. Alta

sensibilidad y especificidad.

GONORREA
La

gonorrea es la enfermedad
transmisible ms frecuente.
Agente: Neisseria gonorrhoae.

sexualmente

Diagnstico:
En el varn, la muestra debe ser tomada con
hisopo de rayn o dacrn insertado en el meato
uretral y rotado 5 veces, inmediatamente debe
ser sembarado en agar chocolate o en Thayer
Martn, as como extendido en un portaobjetos
para gram y el mismo hisopo empleado para
investigar chlamidia.

El exudado uretral con gram que demuestra la


presencia de diplococos gram negativos
intracelulares, basta para el diagnstico; tiene
una sensibilidad de 94% ms y una
especificidad mayor de 95%.
En la mujer se toman muestra de la uretra,

cervix (y del recto); la sensibilidad es menor


50%, lo mismo que la especificidad y se
requiere cultivo 80-90%.

URETRITIS NO GONOCOCICA
Principalmente por Clamidia trachomatis, compite

con la Neisseria gonorhoae como primer agente de


enfermedad sexualmente transmitible.
Diagnstico:
Como mtodos diagnsticos se tiene el cultivo en
clulas, que est fuera del alcance de la mayora de
laboratorios; la deteccin de antgenos por mtodos
inmunolgicos
(inmunofluorescencia
con
sensibilidad 79-85% en poblacin de alto riesgo; la
tcnica ELISA con sensibilidad 60 a 80%,
especificidad 97-99% en poblacin de alto riesgo

Las muestras se toman con hisopo sea de la

mucosa cervical en mujeres y uretral en


varones. Por biologa molecular se emplea la
deteccin de RNA ribosmico por hibridacin o
DNA, con sensibilidad mayor al 70% y una
especificidad de 97-99%, tambin deteccin
de DNA por PCR en orina o secrecin vaginal.

HERPES GENITAL
Agente: Herpes S2 (HSV2).

Diagnstico:
Examen directo (S: 50%) de lesin y
demostracin de antgeno por PCR. Serologa
por ELISA. Cultivo.
Componentes del TORCH.

CHANCROIDE
Agente: Haemophylus ducrei.

Diagnstico:
Examen directo cocobacilo gram negativo.
Cultivo en medio selectivo.

HEPATITIS B
Agente: HBV

Diagnstico:
Fase aguda:
- Antgeno de superficie.
- Anticuerpo Anti Core IgM.
- Antgeno e.
Fase convalescencia. Anti HBs, anti e.
Hepatitis crnica: Antgeno de superficie y e.
Epdiemiolgico: Anticore total.

HIV: Virus de Inmunodeficiencia


Humana
ELISA
Deteccin de Anticuerpos:
Perodo de ventana 2 semanas a 4 meses. Antes
son seronegativos. Es importante trabajar con la
ltima generacin de reactivos. Sensibilidad >
99.5%.
Especificidad:

Tener cuidado con los falsos


positivos: Poblacin de bajo riesgo. Causas:
Anticuerpos a antgenos clase II, autoanticuerpos,
hepatopata,
vacunacin
anti
influenza,
infecciones virales aguda.

Resultados: Se determina el valor de corto con

los controles. Se informa: no reactivo, reactivo,


zona gris o indeterminado (reactivo dbil).
Si sale reactivo se repite por duplicado con nueva

muestra. Se considera reactivo definitivo con dos


resultados reactivos (+) y va al WB.
Si sale no reactivo (-), se repite en 3 a 6 meses si

est clnicamente indicado.


Requiere consentimiento del paciente y previa

consejera, excepcin los donantes.

Western Blot
Confirmacin del ELISA.
ELISA + WB: Falso positivo 1 en 100,000.
Detecta anticuerpos especficos.
Criterios de interpretacin son diversos. Dos

de tres: p24, gp 120; 160; gp 41

Se informa:
Indeterminado: Una banda. Control en 4 a 6
semanas. Si sigue saliendo indeterminado
infeccin por VIH improbable, pero repetir a
los 3 y 6 meses.
Negativo: ninguna banda. Repetir en 3 a 6

meses si clnicamente est indicado. Hacer


p24 deteccin de RNA viral (PCR).
Orientacin por test.

p24
Protena del core.
Medida por ELISA

de captura (usando
anticuerpos en fase slida).
Positivo en 30% de pacientes, hasta 50%.
Niveles ms altos al inicio y al final (al llegar
al SIDA).
Importante en diagnstico en seronegativos y
RN.
Monitoreo: debe disminuir.

Carga Viral
Mide copias de RNA viral por ml. de plasma.
Metodologa aprobada por la FDA: PCR Reaccin

de polimerasa en cadena.
RNA RT DNA PCR- en miles de copias. Se
detecta por ELISA.
Se compara con un standar.
Sensibilidad: 40 copias/ml., positivo en 98% de
pacientes.
Resultado en logaritmos.
Diagnstico en seronegativos. RN.

INICIO Y MONITOREO DE
TRATAMIENTO
LINFOCITOS CD4+
Son las clulas blanco del VIH.
Disminuye progresivamente con la infeccin.
Se cuantifica por Citometra de flujo.
Es el mejor indicador del estado inmunolgico

del paciente infectado.


Criterio para inicio: <500 ul.
Criterio de xito: aumento progresivo.
Criterio de fracaso: cada persistente
recuente de clulas CD4+
Control cada 3 a 4 meses de diagnstico.

del

Carga Viral
Control 3-4 meses del diagnstico.
Inicio de tratamiento: >20,000 copias/ml.
Criterio

de xito: cada significativa, 4


semanas de iniciada la terapia. La carga viral
debe ser indetectable a los 6 meses del
tratamiento (menos de 500 copias de virin
n/mmc.

Pronstico
Se emplea la carga Viral y Linfocitos CD4.
CD4: Conforme los valores son menores el

pronstico es peor < 200.


Carga viral: a mayor carga, peor es el

pronstico.

ANTICUERPOS
ANTINUCLEARES
IMPORTANCIA:
Los
anticuerpos
antinucleares
(ANA)
son
autoanticuerpos circulantes contra componentes
del
ncleo
presentes
en
enfermedades
autoinmunes.
Ms
frecuente
en
Lupus
Eritematosos Sistmico (LES), pero tambin en:
Polimiositis,
dermatomiositis,
esclerodema,
enfermedad mixta de tejido conectivo, artritis
reumatoidea,
enfermedades
hepticas
y
enfermedades renales.

Tambin se ha detectado ANA en pacientes con

enfermedades
autoinmunes limitadas a rganos
especficos: tiroiditis de Hashimoto, enfermedades de
Graves, hepatitis autoinmune, cirrosis biliar primaria,
colangitis autoinmune primaria o hipertensin
pulmonar primaria. Asimismo en hepatitis C,
endocarditis bacteriana subaguda y tuberculosis.
Sin

embargo tambin pueden encontrarse en


personas normales sobre todo en mujeres y en
ancianos. En individuos sanos con ANA positivos a
valor 1:80 es del 13% a valor 1:160 del 5% y a ttulo
de 1:320 del 3% por lo tanto un ttulo superior a
1:160 se debe considerar significativo.

Patrones de ANA
Se utiliza el microscopio de inmunofluorescencia,
empleando cortes de tejidos o clulas neoplsicas.
Estn presentes en 98% en pacientes con LES, su
negatividad la descarta. Los ncleos celulares son el
blanco, el suero lleva los anticuerpos. Se incuba suero
con clulas, luego se agrega antiglobulina marcada
con fluoresina. Si es positivo se observa fluorescencia
en el ncleo y se pueden encontrar los siguientes
patrones:
Homogneo:
Ms
sensibilidad,
menos
especificidad. Producido por anticuerpos dirigidos
contra el complejo ADN-histona.

Moteado: Fino corresponde al anticuerpo Anti Ro/SSA;

grueso corresponde al anticuerpo anti Sm/RNP.


Perifrico: Ms especfico de LES revela la presencia

de anticuerpo anti DNA o contra los antgenos de la


envoltura nuclear.
Nucleolar: Anticuerpos frente a ARN polimerasa. Se

presenta en el escleroderma.
Adems: Patrn entromrico que se observa en el
Sndrome CREST (Calcinosis, enfermedad de Raynaud,
afectacin esofgica, eclerodactilia, telangiectasia)

Anticuerpo ANTI DNA


Puede ser de doble cadena o simple. El

primero es el ms usado como criterio para


LES. Se agrega el suero que contiene los
anticuerpos, y luego la antiglobulina marcada
con fluorescena. Se emplea la tcnica de
microscopa de inmunofluorescencia. Si es
positiva se observa fluorescencia en el
corpsculo para basal.

ANA Extractable
Los antgenos nucleares pueden extraerse y

determinarse por ELISA la presencia en el


suero de anticuerpos contra alguno de ellos. A
esto se llama ANA extractable.
Este examen se indica cuando el Test de
anticuerpos y antinucleares es positivo y el
paciente tiene sntomas de enfermedad
autoinmune especialmente cuando el patrn
de fluorescencia es moteado. Se usa para
ayuda diagnsticas de LES

Estudio de Enfermedades
Reumatologicas
En sangre:
Deteccion de anticuerpos sericos.
Factor reumatoideo.

No es especfico, se puede encontrar en LES, Polimiositis,

Dermatomiositis.
La tcnica mas usada es aglutinacin por ltex, Elisa, otros.
En Liquido articular:
Recuento celular, Gram Ziehl nelsen, cultivo
Proteina C- Reactiva.

Las especificidades de 80%, la interpretacin

depende del criterio clnico porque se


encuentra en otras enfermedades como
Hepatitis Infecciosas, TBC, sarcoidosis.

P.C. Reactiva
Es producida por el hgado y su nivel se eleva

cuando hay inflamacin en todo el cuerpo, se


puede solicitar para verificar una inflamacin
como A.R., LES, vasculitis para verificar un
tratamiento anti inflamatorio normal vara
de un laboratorio a otro, generalmente no
debe haber P.C.R. detectable en sangre.

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