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CONTROL DE CALIDAD EN EL
LABORATORIO DE PARASITOLOGA
5QM 2
PARASITOLOGA
Rama de la biologa que estudia el fenmeno del
parasitismo.
Estudia a los organismos parsitos y la relacin de
ellos con sus hospederos (defi nitivo o intermediario)
y el medio ambiente.
PARASITO
Organismo vivo que crece y se desarrolla, dentro o
sobre el hospedero, causndole dao.
(NOM-032-SSA2-2002 Para la vigilancia epidemiolgica,
prevencin y control de enfermedades transmitidas por
vector)
Cestodos
Platelmitos
Helmitos
Clasificacin
de los
parsitos
Trematodos
Nematelmito
s
Artrpodos
Protozoos
Cavidades
abiertas
Clasificacin
segn el
hbitat en el
hospedero.
Tisulares
Intestinales
Hematicos
En genitales
Trychomonas
vaginalis
Vive en tejidos.
Trychinella sp.
Viven en
intestino.
Taenia solium
Se encuentran
en sangre.
Plasmodium
sp.
Accidental
Necesidad
Facultativo
Obligatorio
Temporal
Modalidades del
parasito
Duracin
Peridico
Permanent
e
Ectoparsit
o
Endoparsit
o
Intracelular
Ubicacin
Extracelular
Errtico
Hiperparsi
to
FASE PREANALTICA
Nombre completo
Edad
Sexo
Telfono
Direccin
Estudio que se va a realizar
Si padece enfermedades
Si toma algn medicamento
Etc..
TOMA DE MUESTRA
Excepcio
nes
Nombre completo
Edad
Sexo
Fecha y hora del la recoleccin de la muestra.
Prueba requerida
Estado de nutricin*
Procedencia geogrfi ca del paciente*
Ingesta de medicamentos
Presunto diagnostico.
Duracin de la enfermedad.
Persona que tomo la muestra.
Nota: presentar otros resultados de exmenes de laboratorio.
Alteraciones en el aumento
de volumen, mayor
cantidad de material no
digerido y frecuentemente
coloracin gris verdosa y
ausencia de olor. Puede
presentarse diarrea con
heces mucosas y aumento
notable de moco
Evitar ingestin de sales de
bismuto, aceite mineral y
otros.
Medicamentos opacos
no absorbibles:
Compuestos
farmacuticos con
carbn vegetal, sales de
magnesio, etc.
Productos opacos
radiolgicos.
Sustancias grasas:
aceites, laxantes,
supositorios.
RECIPIENTE
La muestra debe depositarse en un recipiente
pequeo, seco, limpio, y de cierre hermtico que
puede proporcionar el laboratorio clnico, marcar el
frasco antes de recolectar la muestra.
OBTENCIN DE LA MUESTRA
Se toma una porcin del tamao de una nuez.
De 1 a 2 gramos o de 5 a 10 ml.
Deben tomarse por lo menos 3 muestras en diferentes
das.
Pueden administrarse: purgante salino, (Na SO y NaCO)
TRANSPORTE
CONSERVACIN
Enviar la muestra
en un recipiente
estril si se va a
procesar en el
plazo de 1 2
horas despus de
su emisin.
De no ser as, la
muestra debe
refrigerarse no mas
de 8 horas.
Solucin formol al
5-10% (trofozoitos)
Alcohol polivinlivo
(quistes y
trofozoitos de
protozoarios)
Acetato de sodioformol. Acta como
fi jador (conserva la
morfologa
parasitaria)
USO DE FIJADORES
Los
fi jadores
sirven
para
conservar
protozoarios, sin que se modifi quen las
estructuras internas, sobre todo cuando las
muestras
no
pueden
ser
procesadas
inmediatamente.
PAF
(fenolalcohol-formaldehido),
MIF
(mertiolato-yodo-formol),
Formol,
SAF
(acetato sdico-cido actico glacial-formol)
Albmina de Mayer.
QUISTE
Unquistees un estado dereposoo inactividad de
unmicroorganismo, protistaso raramente un animal
invertebrado, que ayuda al organismo a sobrevivir a
condiciones
ambientales
desfavorables.
Puede
considerarse
como
un
estado
deanimacin
suspendidaen el cual los procesos metablicos de la
clula son ralentizados y cesan actividades como la
alimentacin y locomocin.
TROFOZOTO
Untrofozotoes la forma vegetativa activada
que
se
alimenta
generalmente
porfagocitosis y se reproduce, a diferencia
delquisteque
es
la
forma
vegetativa
infectante y de resistencia, en elciclo de
vidade losmicroorganismos protozoarios.
MUESTRAS INADECUADAS
Heces con mas de 2 horas sin
refrigeracin.
Tres tomas en el mismo da.
CONSISTENCIA/FORMA
Duras: estreimiento
Fluidas o lquidas: diarrea
Aspecto de agua de arrroz: clera
Aspecto de pur de guisante: tifus
Aspecto de papilla: insufi ciencia gstrica
Aspecto de mantequilla: esteatorrea
Pegajosas: melenas
Pastosa y espumosa: dispepsia de
fermentacin
Acintadas: estenosis de coln o recto
CONSISTENCIA/FORMA
Los tipos 1 y 2 indican
estreimiento; los 3 y
4 son heces ideales,
en especial el 4 ya
que es mas fcil de
detectar los parsitos;
los tipos 5,6 y 7
tienden a diarrea o
clera.
Melenas
Diarrea
(restos no
digeridos)
COLOR
Amarilllo: dieta lctea, esteatorrea, diarrea
Verde: dieta vegetariana
Marrn oscuro: dieta crnica
Blanco: acolia
Rojas: hemorragias de origen bajo
Negras: hemorragias de origen alto y
preparados de hierro
CANTIDAD
Normalmente 80-200 g/da
Disminuida: estreimiento y tumoracin del
intestino grueso
Aumentada: diarrea o mal absorcin
intestinal y en el megacolon congnito
TEST DE GRAHAM
Se le dan al paciente 3 portaobjetos con un
trozo de cinta adhesiva transparente adherida
en una de las caras.
Se le indica que la muestra se debe de tomar a
primera hora de la maana, antes de realizar el
aseo y de defecar, ya que la hembra de este
parsito, deposita sus huevos durante la noche,
en los bordes del ano.
Es importante seguir las instrucciones pues de
lo contrario, los huevos seran arrastrados y no
se observaran en la muestra, dando lugar a
falsos negativos.
CONTROL DE CALIDAD
Para asegurar la calidad del estudio se debe seguir algunos
parmetros sobre la muestra
Evitar el uso de cremas ungentos en la regin anal.
No ingerir laxantes, previo a la recoleccin
La temperatura debe ser controlada ya que de no ser as no
se observara nada
Debe tenerse un estudio minucioso y dedicarle al menos 10
minutos para descartar la presencia de parsitos
FASE ANALTICA
TCNICA DE FAUST
(MTODO CUALITATIVO)
E s u n a t c n i c a d e f l o t a c i n d e l a s m a s u t i l i z a d a s e n l o s e x m e n e s
c o p ro p a r a s i t o s c p i c o s
F u n d a m e n t o : l a d i f e r e n c i a d e d e n s i d a d e s e n t r e e l r e a c t i v o u t i l i z a d o e n e s t a
tcnica sulfato de zinc con una densidad de 1.180 grados Baum lo cual
p r o v o c a q u e a l g u n a s e s t r u c t u r a s p a ra s i t a ri a s d e m e n o r d e n s i d a d f l o t e n
P e r m i t e l a s e p a r a c i n d e q u i s t e s p r o t o z o a r i o s , o o q u i s t e s d e c o c c i d i o s , h u e v o s
d e h e l m i n t o s d i c h o s e l e m e n t o s p a r a s i t a r i o s s e r e c u p e r a n e n l a p a rt e s u p e r f i c i a l
y el resto de la materia fecal se queda en el sedimento al fondo del tubo.
ooquiste
CONTROL DE CALIDAD
El laboratorio debe de utilizar al menos una tcnica de
concentracin tiene que ser comprobada su eficacia
utilizando muestras fecales conservadas de la coleccin del
laboratorio.
Las tcnicas de concentracin por flotacin, la densidad de
las soluciones empleadas debe ser controlada
mensualmente. Una concentracin mayor puede provocar
alteracin en las estructuras parasitarias una menor
concentracin no permitir que floten
Las muestras en el portaobjetos debern ser observadas
inmediatamente ya que el reactivo puede formar cristales
MTODO DE STOLL
(MTODO CUANTITATIVO)
Sirve para hacer una evaluacin de la intensidad de
ciertas helmintosis como:
Ascarislumbricoides, Trichuris trichiura, uncinarias y
Strongyloides stercoralis.
TCNICA DE RITCHIE
Es una tcnica de sedimentacin la cual se basa en concentrar las
e s t r u c t u r a s p a r a s i t a r i a s e n e l s e d i m e n t o , fi j n d o l a s c o n f o r m a l d e h i d o a l 1 0 %
y u n a ex t r a c c i n d e l a g r a s a p re s e n t e e n l a m u e s t r a c o n t e r
Algunas ventajas de este mtodo es que elimina un las grasas que pueden
s e r u n a i n t e r f e re n c i a , p e r m i t e o b s e r v a r h u e v o s c o m o l o s d e F a s c i o l a
h e p t i c a , s c a r i s l u m b r i c o i d e s , Ta e n i a s o l i u m y e s t r u c t u r a s p a r a s i t a r i a s m u y
p e s a d a s l a s c u a l e s n o s o n p o s i b l e s o b s e r v a r e n l a s t c n i c a s d e fl o t a c i n
CONTROL DE CALIDAD
Como se utiliza formaldehido es necesario utilizar
campana de extraccin o una mascarilla de carbn
activado
El ter es muy voltil e infl amable por lo que no se debe
realizar la tcnica sin la campana de extraccin ni cuando
hay mecheros encendidos
Como la tcnica esta descrita una agitacin vigorosa
debe realizarse con cuidado y proteccin para los ojos ya
que puede proyectarse
Plasmodium
Leishmania
Tripanosoma
CONTROL DE CALIDAD
Se deben realizar dos tipos de preparaciones:
Extensin fi na o frotis fi no, para la identifi cacin morfolgica
del parsito
Extensin gruesa o en gota gruesa, para el diagnstico de las
infecciones pauci-parasitarias.
CONTROL DE CALIDAD
EN REACTIVOS Y
COLORANTES
se
indica
en
las
DETERMINACIN DE LOS
COEFICIENTES MICROMTRICOS
La calibracin del microscopio, permitir hacer
mediciones de las estructuras que se observen, lo
que le facilitar el diferenciar e identifi car clulas,
parsitos y otras estructuras.
La calibracin consiste en la determinar los
coefi cientes micromtricos para cada uno de los
objetivos de manera que cuando se necesitan
saber el tamao de una clula, se establezca el
nmero
de
subdivisiones
con
la
escala
micromtrica que al multiplicarse por el factor del
objetivo se determine el tamao de la misma en
micras.
MICRMETRO OCULAR
1.
2.
La
escala
graduada
del
micrmetro
del
portaobjetos consta de 1mm, dividido a su vez
en porciones de 0.1mm, a su vez dividido en
0.01 mm.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
LA ILUMINACIN KHLER
Fue la primera descrita por August Khler en
1893, y aun es aceptada como el mtodo de
iluminacin en los microscopios modernos.
La iluminacin Khler elimina la iluminacin
dispareja en el campo de observacin para que
todas las partes de la fuente de luz contribuyan a
la iluminacin del espcimen.
el
microscopio
se
enfocar
la
P E LO S V E G E TA L E S ( 1 0 0 X )
STRONGYLOIDES
STRONGYLOIDES
P ELO S U RT I C A N T ES (1 0 0 X )
TROFOZOITO DE GIARDIA
POLENES (400x)
HUEVOS DE TENIA
LEUCOCITOS
POLIMOROFONUCLEAR
ES
QUISTES DE
ENTAMOEBA
HISTOLYTICA
CLULAS EPITELIALES
TROFOZOITO DE
ENTAMOEBA
CRISTALES 100x
COPROTECA
Coleccin de laminillas de diversos parsitos.
El uso es para capacitacin.
Se pueden conseguir en la ATCC.
El costo depende de la cepa
FASE POSTANALTICA
METODOS CUANTITATIVOS
Stoll: se utiliza para saber el grado de infestacin
que presenta un paciente.
Migracin larvaria o de Baermann: Se utiliza para
obtener estados larvarios de nematodos presentes en
heces y secreciones.
MC Master: Se utiliza para detectar y cuantifi car
ooquistes y huevos por gramo de materia fecal.
CALCULO DE RESULTADOS
INVOLUCRA
Emisin del resultado.
Informe de los resultados.
Control de calidad en el informe
Tcnicas cuantitativas y cualitativas.
Control de calidad externo.
FASE POST-ANALTICA.
EMISIN DE RESULTADOS
Para la emisin del resultado en caso de
encontrarse una forma parasitaria, se
escribe el nombre cientfico del parsito,
especificando gnero y especie el nmero
de cruces indicando la cantidad de
especies parasitarias y su forma evolutiva
junto con los datos del paciente.
EJEMPLO
MUESTRA (mL)
FACTOR
DURAS
0.075
200
PASTOSAS
0.075
400
LQUIDAS
0.075
800
EJEMPLO
El resultado se expresa en huevos o larvas
por mililitro de heces (mL); por ejemplo si la
materia fecal es pastosa y se encontraron 4
huevos de uncinarias en toda la preparacin:
4 X 200= 800
Se reportar:
800 h/mL de uncinarias.
Mtodo 2 :
el mtodo +
++
+++
REFERENCIAS
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