Benemrita Universidad Autnoma de Puebla

Licenciatura: Qumico Farmacobilogo.

Departamento de Qumica Orgnica
Seminario 4: Cromatografa
Vctor Daniel Tolentino
Jennifer Ana Gmez Porras

Cromatografa
Seminario 4
Jennifer Ana Gmez Porras, Vctor Daniel Tolentino

Objetivo:

Conocer y entender los fundamentos bsicos de

una cromatografa, para posteriormente en la
prctica aplicarlos.

Cromatografa
Proviene de la races griegas: chroma:
color y graphein: escribir
Bautzado por Mikhail Tsweett
Permite separar, identificar y determinar
diferentes componenetes.

Fundamentos
Fase Estacionaria:
Fase fija, su funcin es en retrasar el
paso de los componentes de la
muestra
Fase Mvil:
Fase que se encuentra en un estado
fsico, y consiste en desplazar a
travs de la fase estacionaria la
mezcla en donde se encuentra el
analito

Tipos de fases ms utilizadas

Tipo

Fase estacionaria

Fase mvil

lquidoslido inerte como gel de slice o

slido
disolventes
almina

intercambio
soluciones
inico
resina cambiadora
acuosas

lquidolquido
lquido adsorbido en un soporte slido lquido

gas-lquido pelcula de lquido adsorbida sobre un

gas
soporte slido

Adsorcin y Absorcin
Adsorcin: Los tomos o molculas
de una sustancia que se encuentra
en determinada fase, son retenidas
en la superficie de otra sustancia,
que se encuentra en otra fase.
Absorcin: a absorcin es la
retencin de una sustancia por las
molculas de otra ya sea en estado
lquido o gaseoso.

Coeficiente de Reparto
Supongamos que el soluto S se distribuye entre las fases 1 y 2. El coeficiente de
reparto, K, es la constante de equilibrio de la reaccin:

Intercambio Inico
Implica la transferencia de iones en la disolucin
con carga opuesta, que son atrados a la fase
estacionara por fueras electrostticas

Afinidad
Tendencia que dos o ms elementos o compuestos qumicos presentan para
combinarse entre s.
Seleccin debida a interacciones especificas entre una clase de molculas de
soluto y una segunda molcula que est unida covalentemente (inmovilizada) a
la Fase estacionaria.

Antes de la Cromatografa

Clasificacin de Cromatografas

Clasificacin de fases estticas

Cromatografa slido-lquido
Cromatografa de lquido-lquido
Cromatografa lquido-gas

Tipos de sistemas mvil-fase usados

Tipo

fase estacionaria
fase mvil

lquido-slido
slido inerte como gel de slice o almina
disolventes

intercambio
inico
resina cambiadora
soluciones acuosas

lquido-lquido
lquido adsorbido en un soporte slido
lquido

pelcula de lquido adsorbida sobre un

gas-lquido
gas
soporte slido

Tcnicas:
Cromatografa de intercambio inico
Cromatografa de exclusin
Cromatografa de afinidad
Cromatografa de adsorcin
Cromatografa de particin
Cromatografa de fase reversa
Cromatografa de adsorcin
Cromatografa en papel

Cromatografa de Particin
La separacin de los componentes de una mezcla sobre una fase estacionaria
constituida por un soporte slido inerte cubierto por una pelcula lquida que es
fuertemente retenida por dicha fase.
La separacin se efecta por medio de una fase fluida mvil que es el solvente de
desarrollo que es inmiscible con el lquido del soporte estacionario y que
transporta los componentes a lo largo de la F. E.

Cromatografa de Adsorcin
Fase estacionaria solida de carcter
polar adsorbente
Fase mvil liquida eluyente.
Separacin
de
componentes
mediante las interacciones polares
de los componentes de la misma
con las fases estacionarias y
mviles.

Cromatografa de Capa Fina

Determina grado de pureza
Nos permite comparar muestras
Realizar el seguimiento de una reaccin
Fase estacionaria generalmente de :
SiO2
Al2O3
Celulosa
Poliamidas

Eleccin de fase estacionaria y mvil

Precio
Pureza
No utilizar compuesto voltiles
Evitar que contengan trazas de metales (Catalizadores
No utilizar mezclas de eluyentes

Preparacin de la Cuba
Rodear cubar con papel absorbente
Colocar el solvente de desarrollo, esperar que se monje el papel
Tapar la cuba y dejar de 5 a 10 min

Visualizacin del cronograma

Mtodos qumicos
Yodo
H2SO4
Permanganato de potasio
Fsicos
Luz UV
Especficos
Ninhidrina
Verde de bromocrestol
Etc.

Determinacin del Rf
Se puede determinar para cada una de las manchas el valor deRf(factor de
retencin), o la distancia que cada compuesto se desplaza en la placa.

Cromatografa de Intercambio Inico

Se basa en la afinidad de los iones en solucin por los sitios de polaridad opuesta
que se encuentran en la fase estacionaria.

Se aplica a compuestos inicos

Solubles en agua
Separar cidos y bases orgnicas

Cromatografa de Columna

En Conclusin