UNIVERSIDAD CENTRAL DE

VENEZUELA
FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA LUIS RAZETTI
CATEDRA DE FISIOLOGA

EL SISTEMA DE PREALIMENTACIN
GLICINRGICO EN EL CIRCUITO DE
COMPUERTA
ESPINAL
PARA LA
Yan
Lu, Hailong Dong, Yandong
Gao, Yuanyuan
Gong,
Yingna Ren,ALODINIA
Nan Gu, Shudi Zhou,
Nan Xia, Yan-Yan Sun,
MECNICA
Ru-Rong Ji, and Lize Xiong

PROFESOR:
ANTONIO
DALESSANDRO
MARTINEZ
GRUPO 14
EQUIPO 2

INTEGRANTES:
VERNICA
GRILLO
CARLOS
HERNNDEZ
ERIKA
HERNNDEZ

DEFINICIONES

http://scielo.isciii.es/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S037848352005000300006

DOLO
La Asociacin Internacional para el Estudio del Dolor defini el dolor
Rcomo una experiencia sensitiva y emocional desagradable, asociada a
una lesin tisular real o potencial.

CLASIFICACIN
DEL DOLOR
SEGN
PATOGENIA

NEUROPTICO: producido por estmulo directo del sistema nervioso

central o por lesin de vas nerviosas perifricas.
NOCICEPTIVO: causado por la estimulacin de un sistema nervioso
intacto que funciona normalmente.
PSICGENO: interviene el ambiente psico-social que rodea al
individuo.

SEGN
PATOGENIA

SOMTICO: se produce por la excitacin anormal de nocioceptores

somticos superficiales o profundos (piel, musculo esqueltico, vasos,
etc.).
VISCERAL: se produce por la excitacin anormal de nocioceptores
viscerales. Este dolor se localiza mal, es continuo y profundo.

DEFINICIONES
DOLOR
NEUROPTICO

La Asociacin Internacional para el Estudio del

Dolor (IASP) define como dolor iniciado o causado
por una lesin primaria, disfuncin o perturbacin
transitoria, del sistema nervioso perifrico o central

ALODINIA
MECNICA

Sensacin de dolor
desencadenada por
estmulos mecnico
que normalmente no
causan dolor. P. ej:
dolor despus de una

Los nociceptores son

receptores que se activan ante
un potencial dao del tejido.
Von Frey (1890) Explica que la transmisin de las diferentes
modalidades cutneas eran fijas, es decir, mecanismo de lnea
marcada, tomando como base los diferentes receptores
anatmicos cutneas.
Melzack y Wall (1965) `Los receptores responden en base al
umbral de activacin ms que a una modalidad de estmulo.

NOCICEPTOR
ES

Burgess y Perl (1973) demostraron que las fibras mielnicas de

pequeo tamao que inervan la piel se activan por dao a sta, lo
que las denomin fibras mecanorreceptivas de alto umbral.
Posteriormente Perl fue describiendo que las fibras C responden
ante
diferentes
modalidades
(mecnico,
trmico,
pH)
denominndolos nociceptores polimodales.
Luego se encontr que estas fibras hacen sinapsis con las clulas
marginadas del asta dorsal para luego viajar los axones por el
fascculo espinotalmico contralateral que se dirigen hacia la
corteza cerebral.
Mendell y Wall (1966) existe una poblacin de nociceptores que
son pertidrgicos y contribuyen con el fenmeno Windup, que

ORGANIZACIN ANATMICA
DEL ASTA DORSAL Y SUS
AFERENCIAS

Szentagothai (1972) explica que las fibras grandes

entran a la mdula espinal hacia las capas ms
profundas, luego estas se curvan para dirigirse hacia
la parte ms ventral de la sustancia gelatinosa. En
cambios las fibras pequeas entran dorsalmente para
luego dirgirse hacia la sustancia gelatinoso.

HISTORIA
Para (1950), se estuvo analizando a pacientes con
Herpes Zoster, los cuales presenten alodinia, es decir
dolor insoportable en respesta a una estimulacin suave
de la zona afectada. Encontrando que la fraccin de
fibras grandes (tctiles) que inervan las reas afectadas
se encontraron disminuidas, a partir de esto se sugiri
que las fibras grandes (tctiles) normalmente inhiben
los efectos de las fibras pequeas (dolor) y que esta
inhibicin se reduce en los nervios enfermos.
Frank y Fuortes (1956), demostraron que existe una
inhibicin presinptica entre las fibras aferentes largas y
las motoneuronas.

HISTORIA
Mendell y Wall (1964) investigaron los efectos
presinapticos de las fibras amielnicas cortas y de las
fibras mielnicas largas. Las fibras amielnicas bloquean la
conduccin de las fibras largas, provocando una
disminucin de la excitabilidad, es decir, ocasionan una
hiperpolarizacin. Estas neuronas presinpticas que
median sto es solo un pequeo grupo de neuronas de la
sustancia
Wall gelatinosa.
posteriormente propone que estas neuronas
presinapticas, se encuentran a nivel de la sustancia
gelatinososa, y que actan ms como un sistema
modulador que como un sistema de proyeccin hacia la
corteza cerebral, ya que a travs del tracto de Lissauer se
dirige a otras neuronas en la lmina II del mismo
segmento u otros segmentos adyacentes. Al lesionar el
Tracto de Lissauer se observa que se alteran las
conexiones axoaxnicas.

HISTORIA
Melzack y Wall (1965) reconstruyeron la teora de
Von Frey, aceptando que existe la posibilidad de que
los receptores individuales pueden tener una
anatoma
especfica
correlacionada
con
la
sensibilidad haca un estmulo especfico. Sin
embargo ellos argumentaron a favor de que a nivel
del SNC se decodifica como una experiencia
somatosensorial, es decir, tomaron como base la
propuesta de Goldscheider que explica que esta
suma central es necesaria para generar patrones de
impulsos interpretados
como la
dolor.
El equilibrio entre
entrada de
pequeas y grandes fibras, son los que
determinan la salida de las clulas T a
travs de la puerta y no la actividad de
una clase especial de fibras que

TEORA DE MELZACK
Y WALL
TEORA DE LA
COMPUERTA

Propone que las neuronas inhibitorias de la lmina II del

Asta Dorsal acta como una "compuerta de control" para
prevenir la convergencia entre seales inocuas y
nociceptivas. En condiciones neuropticas la informacin
mecanorreceptora inocua podra tener acceso y excitar a la
va FIBRAS
nociceptiva. LMINAS
Fibras A-delta y C --- I II
Fibras A-Beta ---------- IIi
Supresin de la actividad de
-IV
las neuronas inhibitorias, por
antagonistas
de
los
receptores de glicina o GABA,
inducen alodinia tctil. As
como la lesin parcial del

Fibras
AB

Fibras
C

HISTORIA
Wall y Sweet (1967) estudiaron 8 pacientes:
4 con dao de nervio perifrico. reaparece dolor
a los 30 mins.
4 sin dao de nervio perifrico reaparece dolor
en 5-10minutos
En ambos casos la estimulacin de las fibras
aferentes largas result en un alivio del dao al
cerrar la puerta de control. Y la reaparicin del dolor
es por la reapertura de la comporta por las fibras
cortas. Por lo tanto a partir de este momento la
Posteriomente
Burke yha
colegas,
puerta de control
sido reafirm:
el blanco en los
tratamientos
Fibras aferentes
despolarizan
a las
para larga
este tipo
de patologas
interneuronas- cerrando la compuerta.
hiperalgsicas.
Fibras aferentes cortas, hiperpolarizan a las
interneuronas abriendo la compuerta.

HISTORIA
Melzack (finales de la dcada de 1980). Propone la
teora de la neuromatriz, segn la cual existen
circuitos cerebrales intercomunicados para recibir
los estmulos perifricos y que pueden activarse por
reas vecinas sin necesidad de que exista una lesin
externa que produzca la activacin de las vas
nociceptivas. Adems propone al dolor como un
componente multidimensional, donde actan:
Motivacin (lmbico) le da un componente
afectivo.
Sensorial discriminativo
Cognitivo Evaluativo.

HISTORIA
Melzack y Torgerson (1983) en base a la teora de la
neuromatriz pudieron clasificar el dolor.

HISTORIA
Para 2002 Moore, Kohno, et al. Propone que la perdida de la
inhibicin
postsinptica
mediada
por
los
receptores
GABArgicos (siendo los principales en la compuerta, ms que
Gly) en la superficie del asta dorsal de la ME, no se da por la
perdida de las conexiones de las fibras sensoriales, sino que es
necesario que se mantengan estas conexiones ya que el
cambio ocurre es a nivel de la alteracin en la liberacin de
GABA.
En la seccin total del nervio hay ausencia de la perdida de
las neuronas de la lmina II
En la seccin parcial se encontr apoptosis de las
interneuronas GABArgicas mediante la tcnica TUNEL que
dio positivo, sin embargo no expresan el marcador neural
NeuN y por inmunoreactividad las neuronas GABArgicas no
pudieron ser identificadas como muertas por lo que se
requiere mantener en investigacin.
Lo que s se demostr fue que se disminuye la liberacin
de GABA y por lo tanto al no unirse a los receptores
GABAa y GABAb no median la inhibicin abriendo la
compuerta. Esta disminucin es por perdida de enzima

HISTORIA

Erika
Polgr,
David
I.
Hughes, Ahmad Z. Arham,
and Andrew
J. Todd
LA PRDIDA DE NEURONAS EN LAS LMINAS
I-III
DEL AD

NO ES NECESARIA PARA EL DESARROLLO DE ALODINIA

TCTIL

En este estudio, E. Polgr report que no

haba ni prdida de neuronas ni reduccin en
la proporcin de neuronas GABArgicas en
las lminas I-III en la lesin crnica del
modelo de dolor neuroptico. Se prob esa
hiptesis al realizar un anlisis estereolgico
de la densidad de neuronas en las lminas IIII en ratas que se sometieron a una lesin
del nervio 4 semanas previas. Tambin se us
dos acercamientos para buscar evidencias de
muerte neuronal 1 semana despus: dos
marcadores de apoptosis, tincin de TUNEL y
deteccin inmunocitoqumica de caspasa-3
activada (necesaria para la apoptosis).
RESULTA
Ninguno
de estos medios demostraron
DOS apoptticas en el AD de la mdula
neuronas
espinal
La gran mayora de clulas en el AD con grandes niveles de inmunorreactividad de caspasa3 activada, eran astrocitos.

HISTORIA

Erika
Polgr,
David
I.
Hughes, Ahmad Z. Arham,
and Andrew J. Todd (2005)
LA PRDIDA DE NEURONAS EN LAS LMINAS I-III DEL AD NO ES
NECESARIA PARA EL DESARROLLO DE ALODINIA TCTIL

CONCLUSIO
NES
(1) No hubo prdida detectable de
neuronas en las lminas I-III en el
AD
ipsilateral
4
semanas
despus de la operacin.
(2) Ni la tincin de TUNEL o de
caspasa-3 activada proveyeron
evidencia
de
neuronas
degenerativas en el AD 1
semana despus de la lesin.
Aunque clulas TUNEL positivas
(posiblemente
apoptticas)
estuvieron presentes
en la
materia gris y blanca del AD de
la mdula espinal ipsilateral 1

MODELO
ACTUAL -2013

Yan Lu, Hailong Dong, Yandong Gao, Yuanyuan Gong,

Yingna Ren, Nan Gu, Shudi Zhou, Nan Xia, Yan-Yan Sun,
Ru-Rong Ji, and Lize Xiong

MODELO DE TEORA DE LA
COMPUERTA.
Yan Lu, Hailong
Dong, Yandong Gao,
Yuanyuan Gong,
Yingna Ren, Nan Gu,
Shudi Zhou, Nan Xia,
Yan-Yan Sun, RuFIBRAS
LMINAS
Rong
Ji, and Lize
Xiong

Fibras A-delta y C --- I II

Fibras A-Beta ---------- IIi
-IV

Kandel

4ta

Hiptesis del circuito de "control de compuerta" para la

generacin de alodinia mecnica despus de una lesin
del nervio. Hay una conexin pre-existente pero
normalmente silente de las clulas PKC+ a las clulas
TC. Esta conexin est normalmente bajo el control
glicinrgico o GABArgico de un circuito de prealimentacin inhibitorio. La lesin en el nervio resulta en
desinhibicin de las neuronas PKC+ y permite que las

INTERNEURONA
INHIBITORIA PKC+.

METODOL
OGA ANIMAL EN

EXPERIMENTACIN
CIRUGA

REGISTRO
ELECTROFISIOLGICO
S

AGENTES
FARMACOLGICOS

Ratas macho SpragueDawley

Las ratas fueron anestesiadas con
isoflurano y el lado derecho del
proceso transverso de L5 fue
eliminado
para
exponer
los
nervios espinales L4 y L5. El NE L5
fue ligado fuertemente (SNL)
A lo sumo, 2 neuronas fueron
evaluadas por rebanada. El patrn
de disparo de cada neurona se
determin por la aplicacin con
electrodos
de
pulsos
despolarizantes con 1-s desde el
potencial de reposo de -60 mV.
Se determin que la intesidad
necesaria par la activacin de las
fibras
A-beta una
es desolucin
0,1-0,5V;que
ASe utiliz
delta 0,6-1,4V, y las C 2-10V.
contena, estricnina, bicuculina,
CNQX, capsaicina, sustancia P,
TTX y glicina y se aplic mediante
una inyeccin intratecal hacia el
LCR entre L5-L6.

METODOL
OGAANALISIS DEL

COMPORTAMIENTO

INMUNOHISTOQUMICA
CLASIFICACIN DE LA
NEURONAS
ESTADSTICA
CLASIFICACIN DE LA
NEURONAS

Pruebas preoperatorias:
Cmaras de plstico en un piso de
malla.
Mtodo arriba-abajo de Dixon.
Cmaras
de
plastico
sobre
superficie de vidrio.
Aparatos Hargreaves
Reaccin del complejo avidina-biotina
con una etiqueta flourescente que se
utiliza para visualizar las clulas
marcadas con biocitina.
La identificacin de las clulas, se basa en:
Neuronas TC, Neuronas verticales, Neuronas
de la lmina I, Neuronas en islotes.
Test de Student, ANOVA, test post-hoc de
Bonferroni
Todos los procedimientos experimentales
fueron aprobados por Institutional Animal
Care and Use Committee of the Fourth
Military Medical University.

MODELO
EXPERIMENTAL

DETERMINACIN
DE CONEXIONES
SINPTICAS Y
UBICACIN DE
LAS NEURONAS.

MTODO DE PATCH
CLAMP

Whole-cell
patch clamp

T- DE STUDENT
DESAPAREADA
Sirve para determinar si existe o no una diferencia
estadsticamente significativa entre las medias de dos
poblaciones..
En relacin con el EE.
Se utiliza en muestras pequeas.
Se compar con control. Muestras independientes.
Significancia
estadstica
P>0.05

ANOVA
nlisis de la varianza que permite
contrastar la hiptesis nula de que las
medias de K poblaciones (K >2) son
iguales, frente a la hiptesis alternativa
de que por lo menos una de las
poblaciones difiere de las dems en

RESULTA
DOS

16/51 fueron
conexiones inhibidoras
desde
la lmina III de
neuronas glicinrgicas
que
8 conexiones
excitatorias
van hasta la
1 neurona
presi-nptica
era
lmina
IIi
PKCy+.
3 neuronas
post-sinptica
donde
estn es
TC.
PKCy+no se
4
neuronas

51 de 242 pares de
neuronas, es decir,
21%, mostraron
conexiones sinpticas

17 pares restantes
hay
9 conexiones
inhibitorias
8 conexiones
excitatorias
no identificadas por
falta de informacin
determinaron
electrofisiolgica
Todas las conexiones encontradas
fueron unidireccionales

18/51 fueron
conexiones
excitatorias desde
PKCy+ hasta
neuronas TC en la
lmina IIo.
9 conexiones
inhibitorias
3
IPSPs
fueron
reversibles,
eliminados con el antagonista
bicuculina del receptor GABA pero
no por el del receptor de glicina, la
estrictina.
1 fue presinptica. Clula tipo
islote.
6 conexiones fueron Glicinrgicas
2 conexiones GABA en
inhibitoras
postisnptico.
N. TC.postsinpticas
3 de sta fueron
2 se conectan con PKCy+
1 se conecta con TC.
1 sola fue presinptica clula tipo
islote.

RESULTADOS

Al estimular las fibras AB se produce una

respuesta bifsica (EPSPs monosinptica e
IPSPs polisinptica) en las neuronas PKC+ y
EPSPs con potenciales de accin en las
neuronas Glicinrgicas.
La amplitud de EPSPs fue pequea ya que el
IPSPs aparece rpidamente disminuyndola.
Adems se aprecia que el EPSPs eliminado
con uso de estricnina

PKC+

Gly

NORMAL

Conexin excitatoria entre la neurona

PKC+ hasta la neurona TC perteneciente a
la va nociceptiva en condiciones normales
sta comunicacin se encuentra silente .

Las fibras AB en condiciones normales

no son capaces de provocar una
respuesta
post-sinptica
en
las
neuronas TC.

TC

PKC+

BICUCULI
NA

ESTRICNINA

RESULTADOS

LNE (SNL)

Se preparon los segmentos espinales L4 y L5 en ratas con dolor

neuroptico por lesin ipsilateral de L5.
44 de 221 pares neuronales
evidenciaron conexin sinptica en las
rebanadas de NE lesionados. (19.9%)
Conexiones
inhibitorias
(Gly --> PKC+
)
L5 ------ 9
L4 ------ 6

16 restantes
9 excitatorias
7 inhibitorias
No fueron incluidas
en este reporte por
insuficientes
detalles
morfolgicos y
electrofisiolgicos

Conexiones
excitatorias
(PKCy+ -->
TC)
L5 ------ 7
L4 ----- 6

Caractersticas electrofisiolgicas de las neuronas tanto en L4

como en L5 no difieren con respecto a las ratas ingenuas, lo
que sugiere que LNE no influye en la excitabilidad intrnseca

RESULTADOS

LNE (SNL)

LA CONEXIN INHIBITORIA (Gly - PKCy+) ABOLIDA

TRAS SLN

Segmento L5

PIPS (Gly --> PKCy+) disminuy su amplitud (0.9 0.3)

y se increment la tasa de fallo en la transmisin (30%
7%)
Alteracin en la dinmica de PACP ---DACP RPP (0,70,2)
PACP Potenciacin a corto
plazo
DACP- Decrecin a corto
plazo

Segmento L4
intacto
La amplitud de PIPS, la tasa de fallo en la transmisin y
la RPP no difieren de los de control.

LA CONEXIN EXCITATORIA (PKCy+ -- TC) MEJORA

TRAS SLN

Segmento L4

Menor tasa de fallo en la transmisin (9%

3%)
Alteracin en la dinmica de DACP -- PACP
RPP (1,90,3)

Segmento L5

No presenta cambios respecto

Los cambios slo ocurren en el

segmento lesionado. NO en las
adyacencias.

RESULTADOS
ESTIMULACIN A INTENSIDAD A-BETA RECLUT
PEPS
5/7
neuronas
verticales

7/7
neuronas
nociceptivas
TC

6/9 neuronas sustancia

P-sensitiva de la lmina
I

Todos los PEPS polisinpticos estaban

superpuestos
conlaPA.
La salida de PA hacia
va nociceptiva fue evocada por la
activacin de las fibras A-beta tras LNE

Estimulacin a intensidad
de fibra C no fue capaz de
reclutar ms fibras Adelta o C a neuronas
PKCy+, Gly, verticales y
de la lmina I.
Lo que indica que LNE o
bloqueo de glicina solo

RESULTADOS
ACTIVACIN O BLOQUEO DE
LA TRANSMISIN
GLICINRGICA MODULA LA
ALODINIA MECNICA
LNE indujo alodinia mecnica rpida y
persistente, reduccin en el umbral de
retirada de la pata, e hiperalgesia
trmica, reduccin de la latencia de
retirada de la pata.
LNE fue atenuada por inyeccin de
glicina, efecto que fue bloqueado por
estricnina.
La misma dosis de glicina no tuvo efecto
en la hiperalgesia.
Para
determinar
si
la
hipersensibilidad
del
dolor
era
dependiente
de
la
dosis
de
estrecnina, se prob en animales
ingenuos.
Altas dosis (10g) pueden causar
convulsiones.
Estricnina intratecal indujo marcada

DISCUSIN DE
RESULTADOS
Existe un circuito silente

que inhibe la conexin sinptica

excitatoria entre la va mecanoreceptiva de bajo umbral hacia la
va nociceptiva.
Estos circuitos inhibitorios pueden ser tanto GABArgicos como
glicinrgicos.
El principal circuito de prealimentacin en ste experimiento
corresponde a la va glicinrgica a nivel de la unin de las lminas
III/II.
Estudios previos de los mismos autores han determinado que la
conexin sinptica inhibitoria a nivel de la lmina II est solo
mediada por GABA.
Al
momento
la lesin la
microgla
libera inhibidores
BDNF lo queGABArgicos
incrementa la
El
uso de de
bicuculina,
como
estricnina,
y
excitabilidad
derespectivamente,
las neuronas de son
la lmina
I ydeatena
el sistema
glicinrgicos
capaces
activaras
la compuerta
inhibitorio
ejercido
por Gly & GABA por la regulacin de los receptor
y dar origen
a la alodinia.
KCC2
que desinhibe
regulan laelactividad
de los canales
deausando
cloro y produce
La SNL
circuito inhibitorio
de Gly,
alodinia. que
stas neuronas Gly y GABA al ser estmuladas no sean capaces de
generar PA capaces de liberar Gly o GABA para la inhibicin del
circuito. Tambin la liberacin de IL-1b y IL-6 suprime la trasmision
Este descontrol
en los Glycinrgicas
canales de cloro
provocan un descontrol
sinptica
de las neuronas
y Gabargicas
homeosttico que desencadena la apertura de la compuerta.