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TUBERCULOSIS
Mycobacterium
tuberculosis
Agente
etiolgico de la
tuberculosis
HISTORIA
HISTORIA
HISTORIA
POSTULADO DE KOCH
La tuberculosis
Epidemiologa
Existen evidencias paleolgicas de tb en restos
neolticos precolombinos y egipcios.
Epidemiologa
La aparicin del SIDA ha supuesto un resurgimiento
excepcional de esta enfermedad en todo el mundo.
Las Micobacterias
3.
Caractersticas de la
micobacterias no
Han sido identificadas ms de 50
patgenas
especies
Propiedades Biolgicas de
Mycobacterium
Es un parsito estricto, por lo cual su
tuberculosis
Morfologia
Forma bacilar
Longitud de 2-4 micras y diametro 0.2-0.5 m
Pared celular-lpidos (>60%) glicolpidos y
protenas
Presencia de ac. Miclicos tpicos,
( 78 a 90 tomos de carbono )
Estos son el 50% del peso de la pared.
Son muy hidrofobicos, que las hace mas virulentas
Previenen los ataques por lisozima, fagocitosis y el
Complemento.
No esporulados , no mviles
Aerobios
Forman filamentos ramificados
Crecen lentamente
muy exigente en nutricin
Resistencia a detergentes
Resistencias a los antibiticos
De importancia medica :
Mycobacterium tuberculosis:
Tuberculum,
Pequea tumefaccin o tubrculo, en
referencia a la formacin de tubrculos en
los pulmones de los pacientes infectados
Mycobacterium
tuberculosis
Mycobacterium
tuberculosis
Lpidos
Mycobacterium tuberculosis
asociados a:
Impermeabilidad a colorantes.
Resistencia a los antibiticos.
Resistencia a cidos y lcalis.
Resistencia a lisis ( Complemento).
Resistencia a oxidacin y
sobrevivencia dentro de Macrfagos.
Tuberculosis
Reservorios son los
humanos.
Ovinos=reservorios de
M. bovis
Monos, perros gatos,
reservorios de
M.
tuberculosis complex.
Mecanismo de transmisin
Va aergena.
El enfermo elimina
microgotas
(aerosoles), al Rer,
cantar, toser etc..
Bacilos llegan al
alveolo en condiciones
ideales: con una
elevada tensin de O2
Transmisin area
Tuberculosis
Patogenia
35
Tuberculosis secundaria
El bacilo puede despertarse mucho
tiempo despus de latencia.
Aqu el bacilo se multiplica y llena
los bronquios, el paciente presenta
variedad de sntomas.
Con mal tratamiento o sin
tratamiento tiene 60% mortalidad.
Tuberculosis
extrapulmonar
En la TB secundaria el bacilo puede
invadir :
ndulos linfticos,
riones,
huesos,
tracto genital,
cerebro, meninges y otros.
Infeccin
nfermo
TB Infeccin
M.TB. Presente
Tuberculina- test positivo
TB pulmonar
M.TB. Presente
Tuberculina test positivo
Rayos-X= lesion
Rayos-X- normal
Baciloscopia y
cultivo=negativo
Infeccioso antes de
tratamiento
No infeccioso
Diagnstico de laboratorio
Muestra Esputo
Microscopia
Cultivo
Sensibilidad a frmacos
Coloracin Ziehl
Neelsen
Reactivos:
Coloracin Ziehl
Neelsen
Sensibilidad 50 a 80 %
Es necesario 5,000 a 10,000 bacilos / ml
de esputo
Necesita de personal entrenado
Control de calidad
BACILOSCOPIA
Informe de resultados
Se recomienda la siguiente escala
semicuantitativa:
NEGATIVA
POSITIVO 1+
POSITIVO 2+
POSITIVO 3+
No se observan BAAR en
100 campos
1 BAAR / campo en 100
campos observados.
De 1 a 10 BAAR / campo
en 50 campos
observados.
Ms de 10 BAAR / campo
en 20 campos
CULTIVO DE
MYCOBCTERIUM
TUBERCULOSIS
Medios de cultivo
Medios a base de huevo :
Lowestein Jensen
Stonebrink
Ogawa Kudoh
Medios semisintticos:
7H10
7H9
7H11
Mycobacterium
tuberculosis
Crecimiento aerobio a 37 C, 6
semanas.
LECTURA E INFORME
El desarrollo de M.
Tuberculosis
generalmente
aparece luego de 2
a 3 semanas.
Las colonias tpicas
son de color crema,
secas, rugosas de
aspecto de coliflor
y de borde irregular
Lpidos
Mycobacterium tuberculosis
asociados a:
Impermeabilidad a colorantes.
Resistencia a los antibiticos.
Resistencia a cidos y lcalis.
Resistencia a lisis ( Complemento).
Resistencia a oxidacin y
sobrevivencia dentro de Macrfagos.
IMPORTANCIA DEL
CULTIVO
Aspectos generales e
En el dx diferencial de
tubeculosis
indicaciones
del
cultivo
pulmonar de sintomticos respiratorios
Aspectos generales e
indicaciones del cultivo
LECTURA E INFORME
-
No se observan colonias
(negativ
o)
No...
+
++
+++
CC
OTRAS TECNICAS
DIAGNOSTICAS DE
TUBERCULOSIS
OTRAS TECNICAS
DIAGNOSTICAS DE
TUBERCULOSIS
Mtodos de cultivo radiomtrico
(BACTEC)
Mtodos qumicos
Deteccin de anticuerpos
Determinacin de antgenos
bacterianos
Mtodos de recombinacin de los c
nucleicos.
Tcnicas inmunolgicas
*Mtodos serolgicos
vacuna
Prevencin y control
Higiene
Buenas condiciones de vivienda,
alimentacin y seguridad socialeconmica.
Gracias!
Coloracin Ziehl
Neelsen
Procedimiento:
TINCION DE KINYOUN
TINCION CON
FLUOROCROMOS
Recoleccin de muestra
Recoleccin de muestra
Procesamiento de la
muestra
Las muestras obtenidas aspticamente, puede
cultivarse prescindiendo de la descontaminacin:
-Muestras obtenidas por puncin: LCR, pleural,
peritoneal, articular. Se centrifuga y se siembra el
sedimento.
- Materiales de biopsia pleural, heptica y
ganglionar: se fraccionar con instrumento
quirrgico estril en una mortero de porcelana
estril se agrega una suspensin de agua estril y
se siembra en el medio de cultivo.
Procesamiento de la
muestra
Procesamiento de la
muestra
Medios de cultivo
Medios de cultivo
Lowestein Jensen
Solucin de sales:
fosfato monopotsico
-sulfato de magnesio
-citrato de
magnesio
-L-asparagina
-glicerina bidestilada
Suspensin de huevos enteros
Solucin acuosa de verde de malaquita al 2%
Medio ogawa
Solucin de sales:
-fosfato monopotsico
glutamato de sodio
-glicerol
-agua
destilada
-glicerina bidestilada
Suspensin de huevos enteros
Solucin acuosa de verde de malaquita al 2%
CULTIVO EN MEDIO
OGAWA ACIDIFICADO
CULTIVO EN MEDIO
OGAWA ACIDIFICADO
LECTURA E INFORME
TIPIFICACION DE
MICOBACTERIAS
Clasificacin de
micobacterias segn
M. kansassi
I-Fotocromogenas
RUNYON
M. marinum
CEPAS DE DESARROLLO
LENTO
(das o ms)
II-scotocromogenas
Pigmentan sin necesidad
del estimulo de la luz
III No cromgenas
No pigmentan
espontneamente ni por
estmulo de la luz
CEPAS DE DESARROLLO
RAPIDO
(7 das o menos)
IV-Crecimiento
rpido
Pueden pigmentar o no
M. simiae
M.escrofulaceum
M. gordonae
M. tuberculosis
M. bovis
M.avium
M. xenopi
M.fortuitum
M.phlei
M. vaccae
PRUEBAS BIOQUMICAS
Se fundamenta en la capacidad
que tienen algunas especies de
micobacerias de transformar un
producto en otro diferente
mediante la accin de enzimas.
Pruebas bioqumicas
Especie
Niacina
Reduccindenitratos
HidrolisisTween80
Catalasa68C
THC
Ureasa
CrecimientoenPZA
+/-
+/-
bovis BCG
+/-
M. africanun
M.avium
complex
M.
tuberculosis
M. bovis
M.
PRUEBA DE LA NIACINA
PRUEBA DE LA NIACINA
PRUEBA DE NITRATO
REDUCCION
PRUEBA DE NITRATO
REDUCCION
PRUEBA DE NITRATO
REDUCCION
Lectura:
reaccin positiva: coloracin roja
Reaccin dudosa: coloracin rosada
Reaccin negativa: sin coloracin o rosa
plido.
Realizar dos controles uno en un tubo con
el sustrato solamente (negativo) y otro con
cultivo joven de M. Tuberculosis (positivo)
PRUEBA DE HIDRLISIS
DE TWEEN 80
PRUEBA DE HIDRLISIS
DE TWEEN 80
PRUEBA DE LA CATALASA
68C
PRUEBA DE LA CATALASA
68C
PRUEBA DE LA CATALASA
68C
Tcnica de cultivo
radiomtrica (bactec)
Tcnica de cultivo
radiomtrica (bactec)
Tcnicas Qumicas
*determinacin de constituyentes
micobacterianos:
Tcnicas Qumicas
*Determinacin de derivados del
metabolismo de la enfermedad
tuberculosa:
Medicin de la actividad de la
enzima adenosina deaminasa (ADA)
Enzima proveniente del metabolimo de las
purinas que se encuentra en exudados
proveniente de pleuresia, pericarditis,
peritonitis y meningitis tuberculosas.
Tcnicas inmunolgicas
*Mtodos serolgicos
Tcnicas inmunolgicas
*Mtodos de recombinacin gentica
de acidos nucleicos-clonacinhibridacin
Deteccin de secuencias especiales de
ADN o ARN micobacteriano en
expectoracin u otras muestras orgnicas.
LOCALIZACION
TRANSMISIN