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FUNDAMENTOS DA RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR

Profa. Luzineide W. Tinoco


IPPN/UFRJ

Aulas 1 e 2

Fundamentos da RMN - Profa. Luzineide W. Tinoco -IPPN/UFRJ

Felix Bloch
Stanford University

1945-46

Edward Purcell
Harvard University

Parafina

gua
PRMIO NOBEL DE FSICA EM 1952
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Packard
The first NMR spectrum of ethanol,
taken at Stanford University in 1951.
Courtesy Varian Associates, Inc.

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Nobel Prize Winners:


Richard R. Ernst, 1991 Nobel Prize in Chemistry, ETH, Zurich,
Switzerland.
Kurt Wthrich, 2002 Nobel Prize in Chemistry - for his development of
nuclear magnetic resonance spectroscopy for determining the threedimensional structure of biological macromolecules in solution.
Paul Lauterbur, 2003 Nobel Prize in Physiology and/or Medicine - "for
discoveries concerning magnetic resonance imaging."
Peter Mansfield, 2003 Nobel Prize in Physiology and/or Medicine "for
discoveries concerning magnetic resonance imaging."

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POR QUE A RMN TO


ESPECIAL?

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Estruturas em soluo ou no estado slido


Dinmica estrutural e de complexao
Processos de reconhecimento molecular
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Informaes Fornecidas pela RMN

DIRETAS
Intensidade
Nmero de ncleos que d origem ao sinal
Deslocamento Qumico
Ambiente qumico dos ncleos
Constante de Acoplamento
Geometria molecular e conectividade

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INDIRETAS
Difuso Rotacional - T1, T2, NOE
Tempo de correlao,
Interaes Intermoleculares,
Interaes espaciais
Difuso Translacional - Coeficiente de difuso
- Dimenses moleculares
- Interaes Intermoleculares

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ESPECTRMETROS DE RMN

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PREPARO DA AMOSTRA

Codena
Solvente deuterado

H usar 2-10 mg
13
C usar >> 10 mg
1

10 mm
8 mm
5 mm
4 mm
3 mm
1.7 mm

CDCl3
DMSO-d6
MeOH
D2O
Volume depende do tubo
Tubo mais comum 5 mm (0,5 mL)

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TUBOS DE RMN
Tamanho dos tubos:
depende da sonda usada (1.7mm, 3mm, 5mm, 10mm)
Tipos de tubos:

300 MHz NMR tubes: Wilmad 507-PP-7, Aldrich series 300 or Kontes grade 3
are sufficient.

400 MHz NMR use Willmad 528-PP-7, Aldrich series 400 or Kontes grade 6.

(For 11B NMR use 528-PP-QTZ. For 10 mm tubes use 513-PP.)

If the sample dissolves glass (e.g. HF) use a PTFE insert.

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Solvente
Usa-se solvente deuterado por duas razes:
1- lock trancar a frequncia do campo
2- evitar interferncia do H do solvente.

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Amostra slida diretamente no tubo:


corre-se o risco da amostra no dissolver totalmente
presena de partculas slidas interferem com o shimmming
piora a resoluo do espectro

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solvente

Faixa de deteco

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ESPECTROSCOPIA

Interao entre a matria e a radiao eletromagntica

tomos e molculas

Absoro e emisso de ftons

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E = Ealto -Ebaixo

Um fton somente pode ser absorvido se sua energia h, o que ir


corresponder a separao de energia entre os nveis

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CONDIO DE
DE BOHR
BOHR
CONDIO
cte de Planck

E = h

Freq. da radiao eletrom.

DIFERENTES ESPECTROSCOPIAS:

FREQUNCIAS CARACTERSTICAS

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REGRA DE SELEO Mecnica Quntica

Um fton de energia correta somente ser absorvido se a transio entre os


dois nveis de energia permitida.

Regra expressa em termos de um nmero quntico apropriado

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Quantizao de energia
Se medirmos a energia de uma molcula, o valor que iremos obter ir
sempre corresponder a um dos nveis de energia

Espectroscopia uma forma de medir a energia de uma molcula,


uma vez que determinamos a frequncia, e assim, a energia do
fton que absorvido.

Cada medida de energia ir dar um valor que corresponde a um dos


nveis. Ento, em espectroscopia d a impresso de que a transio
ocorre entre estes nveis.

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Tipos de Transio:
Ultra-violeta: transies entre estados eletrnicos
Infra-vermelho: transies entre estados vibracionais

RMN ?

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RMN
Transies de spins nucleares

?
Estados de energia degenerados

Introduo de um campo magntico externo

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Frequncia das transies: MHz

RMN
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- Momento

angular

Bohr (1913) quantizao de energia eletrnica no tomo de hidrognio


corresponde ao momento angular do respectivo eltron.

Particle

Massa

Carga

proton (p)

+1

neutron (n)

electron (e)

Muito pequena

-1

Pauli (1924) sugeriu a existncia de ncleos atmicos com momento angular


de origem diferente do momento angular do e-, j que esto praticamente em
repouso comparado ao e-.
como se os ncleos possussem um movimento de rotao em torno de um de
seus eixos (SPIN).

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Postulado da Mecnica Quntica: o momento angular de uma


partcula no pode assumir quaisquer, mas apenas determinados
valores.

O momento angular est QUANTIZADO


Esta quantizao implica na quantizao da energia da partcula.

A grandeza do momento angular expressa em termos do


nmero quntico de momento angular I (SPIN)

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tomo: eltrons, prtons e neutrons

C spins emparelhados total =


sem spin
12

H e 13C spins desemparelhados

No. de
PRTONS

No. de
NEUTRONS

No. de
MASSA

SPIN (I)

PAR

PAR

PAR

MPAR

PAR

MPAR

1/2, 3/2, 5/2

PAR

MPAR

MPAR

1/2, 3/2, 5/2

MPAR

MPAR

PAR

1, 2, 3, 4

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EXEMPLO
12

C, 16O

H, 13C, 15N,
19
F, 31P
B, 23Na

11

H, 14N

Spin

I=0

No tem sinal em RMN

I = 1/2

Sinal - rotao em
sistema esfrico

I > 1/2

Sinal - rotao em
sistema elipsoide

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Quadrupolos Nucleares
A interao entre o quadrupolo e o ambiente eletrnico
envolvente, se no isotrpico, encurta os tempos de vida entre os
estados nucleares.
Momento quadrupolar
Menor tempo de vida dos estados magnticos dos spins nucleares.
Maior incerteza nos valores de energia daqueles estados
Sinais alargados no espectro de RMN

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SPIN NUCLEAR

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O momento angular quantizado em unidades de:

L= hI

Onde I o spin do ncleo.

O spin uma propriedade macnico-quntica, no significa que o ncleo est


girando em torno do seu prprio eixo (se ele fizesse isto sua velocidade radial
deveria ser maior que a velocidade da luz).

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SPIN - I

Magnitude do Momento angular

L = [ I (I + 1)]1/2 h/2

Lz = mIh/2
mI = -I, -I+1,....+I

Mecnica Quntica: um ncleo com spin I tem 2I+1 orientaes possveis

Se I =1/2 2 orientaes

m = no. quntico magntico

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Ncleo na presena de um campo magntico

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Ncleos na presena de um campo magntico

- Na ausncia de um campo magntico a energia de um ncleo


isolado independente do nmero quntico mI

Na presena de um campo magntico (B0) com direo


Z, um momento magntico poder ter, em termos
clssicos, uma energia dada por:

E = - B0

E = - zB0
p/ spin nuclear
mI

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A RMN observada em sistemas onde os constituintes


magnticos tm um momento magntico e um momento
angular e so relacionados pela equao vetorial:

= L
Razo magnetogrica
Momento magntico

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Momento angular

Na presena de uma campo magntico:

Lz = mIh/2

= L

= mIh/2
E = -B

E = -mIh/Bo

E = +1/2 h/2 Bo

mI = 2I+1 nveis de energia separados por |hB0|


E = -1/2 h/2 Bo

E = E - E
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E = h
constantede
dePlanck
Planck
hh==constante
spinnuclear
nuclear
II==spin
razomagnetogrica
magnetogrica
==razo

= Bo /2

== B
Boo

EQ. FUNDAMENTAL DA RESSONNCIA

EQ. DE LARMOR

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= B0 /2

EQ. FUNDAMENTAL DA RESSONNCIA

H = 2,675 x 107 rad T-1 s-1


1T = 104 G

B0 = 14,1 T

= 600,03 MHz

Para 1H = 500 MHz B0=?


Para 13C B0 = 14,1 T

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MOVIMENTO DE PRECESSO

giroscpio

Precesso de Larmor

Os spins nucleares no se alinham com o campo magntico devido


rotao em torno do seu prprio eixo promovida pelo momento angular dos
eltrons

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O EXPERIMENTO DE RMN
Condio de Ressonncia: freq. B1 =

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= Bo /2

Processo da RMN: a condio de ressonncia

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Durao do pulso de rf x janela de excitao


Princpio de Incerteza de Heisenberg

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Populaes

p/ I=1/2

Amostra: conjunto de muitos ncleos idnticos


distribuidos pelos vrios estados de spin de
acordo com a lei de distribuio de Boltzman

N /N = -exp(E/KT)

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298 K a 60 MHz :

Em 2 milhes de ncleos h somente nove ncleos


a mais no estado de menor energia

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p/ I=1/2

N /N = -exp(E/KT)
Muito pequeno e comparao com a energia trmica KT

possvel fazer a aproximao:

N/N 1 + E/KT

n=N + N = 1

N = N - N = n E/2KT

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1) Qual a diferena de energia entre os dois estados de spin do 1H em um


campo magntico de 17,5 T e qual a frao dos ncleos de 1H entre os
estados e neste campo a 25 oC? Qual a frequncia de ressonncia?
2) Faa o mesmo para o 13C.

h = 6,626 x 10-34 J s
K = 1,3865 x 10 -23 J K-1
H = 26,7519 x 107 rad T-1 s1

E = 49,37 x 10-26 J
n/n = 1 + 1,19 x 10 -4
= 1 + 0,000119
= 1,000119

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n/n = 0,999881 = 1 000 000


1 000 119
Em 2 milhes 119 ncleos em excesso

Frequncia (MHz) Excesso de Ncleos


20
3
40
6
60
9
80
12
100
16
200
32
300
48
600
96

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INTENSIDADE DO SINAL DE RMN

Relao magnetogrica
Intensidade do campo magntico externo (Bo)
Nmero de ncleos
Intensidade de B1
Temperatura x diferena de populao

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Distribuio de Boltzman

TRANSFORMADA DE FOURIER

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FID

11H: INTEGRAL
RMN
DE
RMN DE H: INTEGRAL

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O ESPECTRO DE RMN 1D

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A ESCALA DE FREQUNCIAS -

Hz/MHz

PPM

HERTZ

ppm x MHz

2000 Hz / 400 MHz (Bo = 9,39 T) = 5 ppm


2500 Hz / 500 MHz (Bo = 11,75 T) = 5 ppm
3000 Hz / 600 MHz (Bo = 14,09 T) = 5 ppm
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Frequncia
Deslocamento qumico

TMS

= - TMS/ o
= Hz/MHz = ppm

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DESLOCAMENTO QUMICO

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Deslocamento Qumico

Bi

m
i

Bo

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Deslocamento Qumico

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Hibridizao sp3 (25% de carter s)

Hidrognios ligados a carbono sp3

Com o aumento do carter s os eltrons se aproximam mais do carbono e os H


ficam mais desblindados
Hibridizao sp2 (33% de carter s) mais eletronegativo 4,5 a 7 ppm
Metano (0,23 ppm), etano (0,86 ppm), eteno (5,28 ppm), etino (exceo)
Ciclobutano (1,98 ppm) e cubano (4,0 ppm) intermedirio entre sp3 e sp2
Hidrognios alifticos: 1-4 ppm
Hidrognios vinlicos: 5-6 ppm
Hidrognios aromticos: 7-8 ppm
Hidrognios aldedicos: 9-10 ppm
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anisotropia

Efeito de substituintes eletronegativos


Efeitos aditivos de desblindagem
Cpd./Sub.

X=Cl

X=Br

X=I

X=OR

X=SR

CH3X

3.0

2.7

2.1

3.1

2.1

CH2X2

5.3

5.0

3.9

4.8

3.8

CHX3

7.3

7.0

5.7

5.2

Proton Chemical Shifts of Methyl Derivatives

(CH3)4C

(CH3)3N

(CH3)2O

0.9

2.1

3.2

(CH3)4Si

(CH3)3P

(CH3)2S

0.0

0.9

2.1

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CH3F
4.1
CH3Cl
3.0

Efeito indutivo e efeito mesomrico


CH3X : F ( 4,26), OH( 3,38), H2N ( 2,47), H ( 0,23), Me3Si ( 0,0), Li ( -0,4)
Eteno (5,28 ppm)

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Efeito indutivo do heterotomo

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Anisotropia Magntica

Grupos isotrpicos

Os efeitos se cancelam susbstituintes isotrpicos no tm efeito sobre as


correntes locais
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Grupos anisotrpicos

Pouca corrente ou campo


induzido gerado nesta
situao

No ocorre o cancelamento como na situao isotrpica


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Anisotropia Diamagntica: ALCENOS

4-8

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Anisotropia Diamagntica

Efeito de blindagem: Alcinos

Hibridizao sp

1,80

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Efeito de Desblindagem: Aldedos

9-10

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Efeitos Anisotrpicos:CORRENTE DE ANEL

6-9

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Efeito de
desblindagem no
plano do anel
aromtico

Aromtico:Efeito
de blindagem
acima, no meio e
abaixo do plano

Antiaromtico:
efeito na direo
oposta

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CICLOFANO

ANULENO
[18]anuleno

1,8

8,9
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Efeitos do meio nos Deslocamentos Qumicos


1- Ligao de Hidrognio:
2-metil-3-butino-2-ol
OH ( 2.37)
4-hidroxi-4-metil-2-pentanona OH ( 3.87)
R-O-H + D O
2

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R-O-D + D-O-H

Ligaes de hidrognio: diminuem a proteo magntica

H menos blindados: deslocamentos qumicos mais altos

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Observaes experimentais:

1- Os deslocamentos qumicos de hidrognios hidroxlicos variam com a


concentrao.
2-metil-2-propanol em CCl4
OH ( < 1.0 em solues diludas)
( ~ 2.5 em solues concentradas)
2- Os hidrognios dos fenis mais acdicos so mais desblindados
Aumento da concentrao de fenol em CDCl3

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3- Devido ao favorecimento das associaes dimricas dos cidos


carboxlicos, os H hidroxlicos exibem altos valores de deslocamento qumico
( 10 a 13).

cido cloroactico

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cido 3,5-dimetilbenzico

4- As ligaes de hidrognio intramoleculares, principalmente as que


originam anis de 6 membros, geralmente levam a altos valores de .

Este exemplo ilustra a sensibilidade da RMN para estudos de mudanas


dinmicas
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5- Embora em menor grau, os grupos N-H de aminas e amidas tambm


sofrem variaes de deslocamento qumico devido a formao de ligaes de
hidrognio
6- Grupos O-H e N-H podem sofrer troca rpida de H: se 2 ou mais grupos
destes esto presentes na molcula, o espectro de H ir apresentar um nico
sinal com valor de deslocamento qumico mdio.
cido 2-hidroxi-2-metilpropanico (CH3)2C(OH)CO2H
Observado:
H - 1.5 intens. 3
H - 7.3 intens 1 para troca rpida
Esperado: (H lcool 2 ppm e H cido 12 ppm)
Em regime de troca rpida com D2O estes sinais desaparecem

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Anisotropia diamagntica: pares de eltrons no compartilhados

Ligao de H H hidroxlico do etanol em CCl4 - 0,7 ppm


puro 5,3 ppm

CH3CH2X : X= F(4,36 ppm), Cl(3,47ppm), Br (3,37 ppm), I (3,16 ppm)


CH3 (1,24 ppm), (1,33 ppm) (1,65 ppm) (1,86 ppm)

Efeito de desblindagem dos Hs CH3 com o aumento do tamanho do tomo

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Efeito do solvente
Molculas polares apresentam mais diferenas no DQ quando colocadas em
solventes aromticos (benzeno, piridina, C6F6) do que em solventes como CCl4,
CDCl3, CCl2D2, acetona-d6 e CD3CN

Este efeito pode ser devido a orientao parcial do solvente pelo momento de dipolo do soluto.
No caso do benzeno pode haver interao com a nuvem do anel aromtico com efeito de blindagem.
P. Laszlo Progr. NMR Spectrosc. 1967, 3, 231
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